SSN1009-3079C14-1019世界華人消化雜志2000年3月第8卷第3期355表2不同阻斷劑對(duì)NOS活性及NO合成水平的影響程度持續(xù)至損傷后24h.NO組織NO胃液胃粘膜損傷后PTK和NOS活性呈現(xiàn)相似的變化規(guī)律,應(yīng)分組g白mmdg蛋min)(nmol mg蛋白min)(ud)用PTK選擇性抑制劑使胃粘膜NOS活性、組織和胃液NO水對(duì)照組3.12±0.53 DOC9.31±1.68181.39±19.24平分別下降了25.4%,22.5%和19.3%.表明PK可能參與6.89±0.51.60±2.88394.79±22、13mc+typy5.140.3715.19±2.35318.78±26.486.8n合成的調(diào)節(jié)但PTK激活后導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)NOS活性變化的P<0.01,其余各組,P<0.01v對(duì)照組機(jī)制仍不清楚,推測(cè)PTK激活后導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增高可能是其重要的機(jī)制之一,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增高是受體型3討論P(yáng)T激活后細(xì)胞內(nèi)第二信息傳遞者,而細(xì)胞內(nèi)NOS活性的提胃粘膜在受到一定程度的損傷性刺激后,可啟動(dòng)快修復(fù)機(jī)高有賴(lài)于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的增高,9NOS激活后合成NO增制使胃粘膜迅速恢復(fù)其完整性,以避免損傷向深層發(fā)展,這是加,而NO反過(guò)來(lái)又對(duì)細(xì)胞內(nèi)a+濃度起負(fù)調(diào)控作用因而生胃粘膜抵抗疾病的一種重要的屏障能力1,21胃粘膜快修復(fù)機(jī)長(zhǎng)因子受體的激活、NO的合成、以及Ca2穩(wěn)態(tài)組成細(xì)胞內(nèi)信制主要表現(xiàn)為損傷區(qū)周?chē)蛏畈炕罴?xì)胞的遷移,由于不需要號(hào)傳導(dǎo)的一個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)4DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成,只需要對(duì)細(xì)胞內(nèi)一系列功能蛋白胃粘膜表達(dá)有多種生長(zhǎng)因子多肽,而且有結(jié)構(gòu)型NOS高表質(zhì)的適當(dāng)修飾即可完成,因而是一種快速的反應(yīng),但這種機(jī)制達(dá),在胃粘膜損傷后,PTK和NO出現(xiàn)迅速的反應(yīng)性變化,表明仍不甚清楚3-61.在胃粘膜損傷修復(fù)過(guò)程中,生長(zhǎng)因子多肽參PTK和NO共同促進(jìn)了損傷后胃粘膜上皮的快速修復(fù)由于與其調(diào)節(jié),而蛋白氨酸激酶(PTK)是生長(zhǎng)因子受體胞內(nèi)區(qū)行PTK對(duì)NO的合成有一定的影響,PTK的作用可能在一定程度使信號(hào)傳遞的一個(gè)主要的功能部分,其活性變化必然對(duì)胃粘膜上通過(guò)影響NOS的活性以及NO合成而完成,但其深層機(jī)制有修復(fù)具有重要影響,但其機(jī)制仍不清楚[2待進(jìn)一步研究本文結(jié)果表明,胃粘膜損傷后,PTK活性發(fā)生顯著變化,而且這種變化主要發(fā)生于胃粘膜修復(fù)的早期.損傷后30min呈短4參考文獻(xiàn)暫下降,可能是因?yàn)閾p傷性因素仍然大于修復(fù)性因素,1h后開(kāi)1 Relan NK, Fligiel SEG, Dutta Tureaud, Chauhan DP, Majumdar APN始上升,并在3h內(nèi)迅速達(dá)到峰值,提高的幅度為160.69%. muoroard and effects of aging. Lab Imesr 1995; 73: 717-726 2 Playford RJ. Peptides and gastruintestinal mucsil integrity. Gut, 1995:37: 595然在胃粘膜修復(fù)的中后期,PTK活性逐漸降低,但其活性較基礎(chǔ)水平增高一直持續(xù)至48h,表明PTK可能參與胃粘膜完整性 3 Peimela H, Goddard P], William S. Present views on restitution of gastrointestinal epithelium. Dig Dis Sci, 1995:40: 2495-2496修復(fù)的整個(gè)過(guò)程,而損傷后24hPTK活性二度增高可能是由 4 Moncada S, Palmer RMJ, Higgs EA. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology. Pharmacol Rev, 1991: 43: 109-142于多種生長(zhǎng)因子表達(dá)增加的結(jié)果,這一時(shí)期PK活性再度增5 Tepperman, voroolo Effect of neutropenia on gastric mucosal ty and e rat. Dig Dis Sci, 1993;38:2056用 Konturek SK, Konturek PC. Role of nitric oxide in the digestive system我們?cè)谖刚衬そM織勻漿中檢測(cè)到NOS活性7,8,并且在胃7e ison O'Brien PE Protection against gstrice粘膜中度損傷性刺激后可發(fā)NOS活性發(fā)生與PTK相似的變 ischemia-reperfusion injury by nitric oxide generators. Dig Dis Sci, 1994:39: 366化,在損傷后的早期迅速提高,并且NO的合成增加.組織NOS8 Caskun, Yegen BC, Alican Peker Kurtel. Cold restraint stress inducod活性和NO以及胃腔內(nèi)的NO水平在胃粘膜損傷后3h達(dá)到峰 ide Sci64:956-963值,上升的幅度分別為118.5%,123.2%和130.15%,其增高的 morphine The rde of endo3 phine. Eur Pharmarod, 1994; 255: 33-37IN10009Cn14-1019/R世界華人消化雜志2008(3):355研究快報(bào)乙醇對(duì)大鼠胃粘膜的影響灌注入胃能引起全胃腸道(以胃為主)的粘膜病變,并延緩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性胃粘膜病變的自然愈合(4-81.本實(shí)驗(yàn)試圖探討0蘇紅曹之憲林兆鑫800mL/L酒精灌注法所誘發(fā)的動(dòng)物胃粘膜損害的發(fā)病機(jī)制, Subject headings ethanol; gastric mucosa/ pathology以便指導(dǎo)臨床 tumor necrosis factor主題詞乙醇;胃粘膜/病理學(xué);腫瘤壞死因子1材料和方法眾所周知,正常胃粘膜的完整性是由攻擊因子與防御因子1.1材料選擇健康早SD大鼠,體質(zhì)量190g~230g,每組16的動(dòng)態(tài)平衡來(lái)維持的,一旦這一平衡遭受破壞就會(huì)導(dǎo)致粘膜損只~18只,實(shí)驗(yàn)前24h禁食不禁水;分別胃內(nèi)灌注蒸餾水正害1-3.據(jù)報(bào)道,各種損傷因子如酒精(ETOH)、消炎痛(M)經(jīng)常組)和800mL/L乙醇(ETOH8mL/kg,酒精組),隨后自由進(jìn)1中山醫(yī)科大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院消化內(nèi)科食及水,于72h處死廣東省廣州市5101201.2方法香港大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理系1.2.1胃粘膜病變及漿膜血流量測(cè)定上述處理72h后,經(jīng)乙3香港大學(xué)瑪麗醫(yī)院胃腸肝病內(nèi)科開(kāi)隆露置用光齊普儀在古置測(cè)定獎(jiǎng)膜血356issn1009-3079cn14-1019/r世界華人消化雜志2000年3月第8卷第3期損傷面積(mm2),然后分別計(jì)算每組血流及損傷面積,并刮取胃本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)組PCE2水平均顯著高于對(duì)照組(P粘膜層組織迅速置入液氮后轉(zhuǎn)入-70℃低溫冰箱保存,用于測(cè)<0.01),但仍未能提供有效保護(hù)作用,說(shuō)明酒精所致大鼠胃粘定粘膜MPO,PGE2及TNFa水平膜損害尚存在其他機(jī)制.據(jù)報(bào)道,6,13ETOH誘導(dǎo)的粘膜病1.2.2胃粘膜PGE2測(cè)定采用放射免疫學(xué)方法,碘標(biāo)記的變與粘膜靜脈收縮、GMBF降低有關(guān),而且其損傷程度與PGE放免試劑盒(Amersham International PIC)求操作,用yGMBF呈負(fù)相關(guān)3.S. Konturek et al發(fā)現(xiàn)乙酰水楊酸可引閃爍儀測(cè)放射性CPM,并換算為:g/mg上清蛋白起劑量依賴(lài)性急性胃粘膜病灶增多并伴PMN增加、血液PGs1.2.3胃粘膜MPO活性測(cè)定取凍存胃粘膜層組織稱(chēng)重,在降低,但重復(fù)試驗(yàn)誘發(fā)粘膜的適應(yīng)性改變,此時(shí)粘膜血流增加、4℃下制成勻,收集上清液,用 BECKMAN DU6650分光光度EGF及細(xì)胞增殖均顯著升高,而PMN明顯減少本實(shí)驗(yàn)結(jié)果儀測(cè)定其在437mOD值,并換算為酶活性單位(IU/g上清蛋未發(fā)現(xiàn)800mL/ ETOH對(duì)漿膜血流有影響,可能與酒精濃度、白)劑量、作用時(shí)間及測(cè)定GSBF時(shí)的部位有關(guān)1.2.4胃粘膜 mTNFa測(cè)定按 Factor-XTMst- Mouse Tsuboil et al1研究發(fā)現(xiàn)非體類(lèi)消炎藥能促進(jìn)人淋巴TNF.酶標(biāo)儀免疫試劑盒(Genzyme,USA)操作,用 BIO-RAD細(xì)胞合成TNF2本實(shí)驗(yàn)兩組TNF水平無(wú)差異,提示可能 MODEL3550孔板讀數(shù)儀測(cè)定其450nm的吸收峰,再換算為T(mén)NF并非ETOH損傷粘膜的機(jī)制或與所給酒精的劑量、療程g/mL上清蛋白不足以引起粘膜TNF水平的改變,值得進(jìn)一步探討統(tǒng)計(jì)學(xué)處理參數(shù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組均數(shù)的顯著與正常組比較,除SBF,TNF無(wú)明顯變化,試驗(yàn)組粘膜損性檢驗(yàn)用t檢驗(yàn),以P<0.05為顯著性水準(zhǔn)傷面積顯著增加伴有粘膜MPO活性及PGE2水平明顯升高(P<0.01),提示800mL/ ETOH所致的損傷與PMN活化、浸潤(rùn)2結(jié)果等攻擊因子增加有關(guān),而與內(nèi)源性防御PGE水平無(wú)關(guān).2.1800mL/ ETOH對(duì)鼠胃粘膜損傷的影響(表1)2.2酒精對(duì)鼠GSBF,Pe2,MPO及TNFa的影響(表2)4參考文獻(xiàn) 1 Robert A, Nezamis JE, Lancaster C. Harchar AJ. Cytoprotexction by表1鼠胃粘膜損傷的改變±s prostaglandins in rats. Prevention of Gastric necrosis prodooed by alchohol, HCI, NaOH, Hypertoric NiCI, and Thermal Injury. Gastroenterology, 1979; 77:433分組出血點(diǎn)(mm2)糜爛點(diǎn)(mm2)-443對(duì)照組n860.00±0.000.00±0.00 2 Rairsdard KD. Me rinal toxicity of nonsteroidal anti-酒精組11.62.003.94±1.02b inflammatory drugs. S Lacy ER, Ito S. M1989:24(sup13):9-16bp<0.01,對(duì)照組 treatment with g of acetic induced gastric uleers in mats6:393-402表2800mL/ ETOH(8mL/kg)對(duì)大鼠胃粘膜的影響 5 Ojihara Y, Okabe S. M ays gastric ulcer±s) healing in the rat armeol, 1993;61:123-1317 6 Konturek SI, B M.. oastic Rale of對(duì)照組380.0438045474.61 bkood flow in gastric酒精組37.83±0.43912.08±79.10103.79±10.9762.67±7.97 adsption to 7 Kvietys PR, Twohig B urty to the ratP<0.01,對(duì)照組 gastric mucosa. Ro ved radicals. Gastrventeralogy, 199 8 Eastwood GL. P3討論 Gasroenterlogy 9 Wallace.大量的臨床與實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,酒精可誘發(fā)胃粘膜急性損 rotection pathogenesis ary,1992:27傷3121但其確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚.PMN被認(rèn)為參與其損(Sppl192):3 10 Alican I, Cask傷機(jī)制,PGs減少則解除其對(duì)PMN活化的抑制,PMN的粘膜 neutrophils inin rtel H. Rode of s. Inflamm Res,1995;44:164-168潤(rùn)增加并進(jìn)一步釋放MPO、氧自由基、活性氧化代謝產(chǎn)物如bH al anti超氧化陰離子(O2-)、蛋白酶并粘附于血管內(nèi)皮造成大血管閉 inflan塞等方式導(dǎo)致粘膜損傷.正常粘膜細(xì)胞對(duì)損傷有一定抵抗能力,所以PMN與靶細(xì)胞的比率必須達(dá)到一定的非生理性水平12hph(>20:1),才能引起損傷,如同時(shí)存在其他炎癥遞質(zhì)和細(xì)胞介13 Cho CH,Chen素,則該比率可以降低,而非活化的PMN幾乎不引起胃粘膜上 and reflectance nder ischemic and皮細(xì)胞損傷.超氧化歧化酶(SOD)則可通過(guò)分解超氧化陰離子(O2)為過(guò)氧化氫和氧,對(duì)PMN介導(dǎo)的粘膜損傷有保護(hù)作用6,9,10,15本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,800mL/ ETOH引起粘膜 apri):209 Abstr)Mpo活性顯增加p<0.01)支持pM活化及釋放的MPO15 5 Kowol Kopstsis Fligiel SEGc Callewert Neutrophil mediated injury to gas l surface cells. Dig Dhis Sci, 1994: 39: 138-144參與胃粘膜病變的形成