2005年第1事| 調(diào)查研分不同生產(chǎn)工藝對中藥添加劑生物活性的影響曹國文,曾代勤,戴榮國,姜永康,陳春林,周淑蘭,翟少欽,劉宗惠,鐘正澤,歐秀群,江山(重慶市養(yǎng)豬科學(xué)研究院,重慶榮昌402460)摘要:本試驗(yàn)比較了不同工藝制備的中草藥添加劑即常規(guī)散劑、水煮提取制劑和醇水提取制劑對豬生長性能等影響，結(jié)果三種制劑對豬的生產(chǎn)性能、腸道益生茵指數(shù)和對豬外周血液T淋巴細(xì)胞比值與豬瘟抗體滴度均有不同程度的提高。,其中醇水提取物制劑能顯著提高豬的日增重、飼料報(bào)酬、腸道益生菌乳酸桿菌和雙歧桿菌指數(shù)以及T淋巴細(xì)胞比值,并能提高豬瘟疫苗免疫后的抗體合格率。常規(guī)散劑次之,水煮提取制劑較差。關(guān)鍵詞:中草藥添加劑;不同工藝;生物活性中圖分類號: S817. 19文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A .文章編號: 1000 -6354(2005)01 -0011-03中草藥作為豬的飼料添加劑,不僅能提高生產(chǎn)性能，降1.2 試驗(yàn)方法低飼養(yǎng)成本,而且具有增強(qiáng)免疫、抗應(yīng)激和保健等多種功能，1.2.1中草藥添 加劑制備與添加量且不存在安全和環(huán)保問題,因而受到國內(nèi)外同行的廣泛重1.2.1.1常規(guī)散劑的制備將中藥飲片置 60 C烘干,粉碎,視。但就我國目前研究狀況來看,由于對中草藥飼料添加劑過80目篩,按比例混合即成,按3%的比例加入飼料中。的開發(fā)用資金投入少、研究不深入、工藝水平落后、技術(shù)水平1.2.1.2水煎煮法提取物的制備 復(fù)方中藥飲片 ,加水(首低等,大多仍然停留在傳統(tǒng)的配方、配伍、制成粉(散)劑的粗次10倍,2.3次6倍)煎煮3次,每次1 h,過濾,合并濾液,濾制階段,很少有將其有效成分提取濃縮后制成精專型或復(fù)合液加熱濃縮至1:1-1:2時(shí),在60~80 C下按10%加入絮凝產(chǎn)品,這不利于現(xiàn)代工廠化生產(chǎn)、藥效評價(jià)和產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)劑,攪拌5min,置室溫過夜,過濾.濾液濃縮至稠膏狀,加入的制定與產(chǎn)品質(zhì)量控制,亦不利于產(chǎn)品的廣泛推廣和應(yīng)用。少量載體混合，于60 C烘干,粉碎,過80目篩,分裝備用。本試驗(yàn)為篩選產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝而設(shè)計(jì),為此,我們對經(jīng)飼喂用時(shí)按1% (相當(dāng)于生藥3 g)加入飼料中。試驗(yàn)優(yōu)選出來的中草藥添加劑組方進(jìn)行了不同工藝制備試1.2.1.3 醇一水提取物的制備 復(fù)方中藥飲片粉碎成粗驗(yàn),以確定適宜的生產(chǎn)工藝，為中草藥提取物制劑產(chǎn)業(yè)化奠粉,加5倍70%乙醇浸泡2 h后回流提取1 h,濾出乙醇液，定基礎(chǔ)?；厥找掖?過濾,棄沉淀備用。藥渣加水(8倍),于80 C溫1 材料與方法浸2次,合并浸出液,過濾,減壓濃縮至1:1~1:2時(shí),在60~1.1 實(shí)驗(yàn)材料80 C下按10%加入絮凝劑，攪拌5 min, 置室溫過夜,過濾,1.1.1設(shè)備與儀器 FC- 160全不銹鋼高效萬能粉碎機(jī)濾液與乙醇提取液合并,再減壓濃縮至稠膏狀,加入少量載(湖南衡陽市制藥設(shè)備廠生產(chǎn)) ;CTG - 10中草藥多功能提取體混合,于60 C烘干,粉碎,過80目篩,分裝即成。用時(shí)按罐(湖南衡陽市藥物機(jī)械廠生產(chǎn)) ;MDRP -5噴霧干燥器(無0. 5% (相當(dāng)于生藥1.5 g)加入飼料中。錫市現(xiàn)代噴霧干燥設(shè)備有限公司生產(chǎn));CS101電熱干燥箱1.2.2不同中草 藥制劑對豬生產(chǎn)性能影響的測定(重慶銀河試驗(yàn)儀器有限公司制造);全自動(dòng)生化測定儀AG1.2.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧 ,同文獻(xiàn)"。I(美國Land Mark Scienifie公司生產(chǎn));紫外分光光度計(jì)1.2.2.2試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理本 試驗(yàn)在重慶市養(yǎng)豬科學(xué)UVIKON923(瑞士BI0 -TEK KONTRON公司生產(chǎn))。研究院豬場進(jìn)行,在榮昌縣農(nóng)村選約10 kg斷奶日齡相近的1.1.2 主要試劑95%乙醇、腸道菌培養(yǎng)基、戊二醛、甲基健康長白x榮昌雜交仔豬,每組8頭,4個(gè)重復(fù)。經(jīng)驅(qū)蟲與免綠及常用化學(xué)試劑等(購自重慶市醫(yī)藥公司化學(xué)試劑部);殼疫接種后進(jìn)行正式試驗(yàn)。試驗(yàn)期間,自由采食,自由飲水。聚糖絮凝劑(上海偉康生物制品有限公司出品);豬瘟正向血每天清掃圈舍1次,定期進(jìn)行消毒。全期試驗(yàn)120 d。凝試劑(中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所提供)。1.2.2.3 測定指標(biāo)及方法 主要測定平均日增重和料重1.1.3 中藥組方的確定 根據(jù)配方篩選試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合藥比。試驗(yàn)豬于試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的早上8: 00后空腹稱重計(jì)算全期物來源的廣泛性和盡量不與人爭藥源的原則,本試驗(yàn)選擇平均日增重和料耗情況,然后計(jì)算料重比。杜仲葉、女貞子、山楂等多種中藥組成。杜仲葉、女貞子收1.2.3_不同中草藥制劑對豬腸道菌群影響的測定試驗(yàn)自榮昌農(nóng)村,其余購自榮昌縣長壽中藥行,經(jīng)鑒定均為地道35 d中國煤化工主要腸道菌系大腸桿中藥材。菌、腸fYHCNMH G1.2.4個(gè)同中草約啊創(chuàng)對陌珊肥和1A液免疫影響的測定1收稿日期:2004-07 -091.2.4.1豬外周血 T淋巴細(xì)胞的測定,參照文獻(xiàn)介紹的方項(xiàng)目來源:重慶市攻關(guān)項(xiàng)目作者簡介:曹國文(1956-)，男，高級獸醫(yī)師，主要從事中普藥、中法)]進(jìn)行。1.2.4.2豬瘟抗體的測定 ,參照使用說明書進(jìn)行。藥添加劑和動(dòng)物微生態(tài)制劑研究。005年第1期V中算唐涯藥雜點(diǎn)FFBTM調(diào)查研究表1不同劑型 中草藥添加劑對育肥豬生產(chǎn)性能影響試驗(yàn)結(jié)果項(xiàng)_E常規(guī)散劑組水提取物醇水制劑抗生素組對照組豬數(shù)/頭8平均始重/kg11. 45 +0.3911. 58 +0.4511.65+0.4111.92 +0.4511. 50+0.41平均末重/kg93.63 2.8989.90 +3.2494.76+2. 1889.87 +2.5287.44+1.82平均日增重/g673.57 +22. 83.642.01 +23. 62681. 28 +15.93*638. 86 +21.25622. 4415.92"料重比/kg3.243.293.163.53.52注:肩注不同小寫字母表示差異顯著(P <0.05),2試驗(yàn)結(jié)果對照組比較有顯著性差異(P <0.05)。飼料報(bào)酬分別比對照2.1生產(chǎn)性能測定結(jié)果組提高7.95% .6.53%和10.23%,比抗生素組分別提高不同劑型(常規(guī)散劑、水煎提取物、醇-水提取物)中草7. 43% .6. 00%和9.71%。藥添加劑對育肥豬的生產(chǎn)性能影響，試驗(yàn)結(jié)果見表1。2.2腸道菌群測定結(jié)果表I結(jié)果表明,所篩選出中草藥添加劑的不同劑型(常試驗(yàn)35d后,三個(gè)中藥添加劑組和對照組豬腸道菌群中規(guī)散劑、水煎提取物和醇水提取制劑)均能提高豬的生產(chǎn)性主要菌系大腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的變化,結(jié)能，日增重分別比對照組提高8.21% 3. 14%和9. 45% ,比抗果見表2。生素對照組分別提高5.43%、0. 50%和6.64%。醇水制劑與從表2可以看出，中藥常規(guī)散劑組、水煮提取組和醇水表2豬腸道菌群的變化菌種水煮提取組醇水提取組大腸桿菌/10*個(gè).1. 79 +0.51°11. 92 +0.6511. 99+3.8223.2+1.24*腸球菌/10°個(gè).g-'1.17 +0.40*2.87 +0.702.62 +0.924.84 +0.916乳酸桿菌/100個(gè).g'7.67 +1.64*5.68 +2.457.58+1. 10*1. 62 0.61"雙歧桿菌/109個(gè).g-16.03 +0.32".5.43+1.59"8.70+1.19°.1.16 +0.05注:表中n=6;肩注不同字母表示差異顯著(P <0.05 ) ;腸逍菌群數(shù)量用Logloctu/g糞樣表示。提取組糞便中的大腸桿菌與腸球菌數(shù)均低于對照組,尤其是水提取物和抗生素各組的豬瘟抗體合格率均高于對照中藥常規(guī)散劑組與對照組相比具有顯著性差異(P<0.05)。組。尤以醇水制劑組較高。中藥各組糞便中的乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)均明顯高于對照3討論與結(jié)論組,其中常規(guī)散劑、醇水提取組的乳酸菌比對照組顯著提高3.1不同工藝制備中草 藥添加劑對育肥豬生產(chǎn)性能影響(P <0.05)。中藥各組的雙歧桿菌與對照組相比均呈顯著性試驗(yàn)結(jié)果表明,我們研制的中草藥常規(guī)散劑、水煎提取差異(P<0.05)。物和醇水提取制劑均能提高豬的生產(chǎn)性能,但僅醇水制劑與2.3 細(xì)胞和體液免疫測定結(jié)果對照組比較有顯著性差異(P <0.05)。飼料報(bào)酬亦分別比常2.3.1 T 淋巴細(xì)胞測定結(jié)果(%)中藥各組與抗生素 和空規(guī)散劑和水提取物有較大提高(2.1% -3.5%)。從生產(chǎn)性白對照組T細(xì)胞檢測結(jié)果為常規(guī)散劑:43.69 +2. 53;水提取能看,醇水提取制劑明顯優(yōu)于常規(guī)散劑和水煮提取制劑,這物:42. 04 +3. 70;醇水制劑:48.94 +2.85 ;抗生素組:43.44土可能是因?yàn)榇妓植教崛。茏畲笙薅忍崛∑溆行С煞?尤2.79;對照組:38.40+2.44。其是黃酮類化合物),加之溫度不超過80 C ,減少了活性的試驗(yàn)結(jié)果表明,中草藥添加劑和抗生素組與空白對照組損失,從而產(chǎn)生良好的促生長性能。水煮提取物的促生長效相比,中草藥添加劑和抗生素均有提高T細(xì)胞的百分比的趨果明顯差于另外兩組，可能是有效成分提取不全和長時(shí)間煮勢經(jīng)SPSS分析軟件分析處理,醇水提取物組與水提敢物沸的持續(xù)高溫造成部分活性喪失的緣故。組、土霉索組和粉劑組與對照組相比差異顯著(P <0.05),而3.2不同工藝制備中草藥添加劑對斷奶豬腸道菌群的影響醇水提取物組與對照組相比差異極顯著(P <0.01),其余處從研究結(jié)果可以看出,我們研制的中草藥添加劑(常規(guī)理組間無顯著性差異。表明中草藥添加劑與適量抗生素(.土散劑或提取物制劑)對豬腸道中大腸桿菌和腸球菌均有一定霉素)可以提高豬的細(xì)胞免疫功能,尤以醇水I藝制備的中的抑制中國煤化工1相比具有顯著性差草藥添加劑效果明顯。異(P<于常規(guī)散劑組,這可2.3.2豬瘟抗體測定 接種豬瘟兔化弱毒疫苗35 d后能是由:MHCN M H G性成分(揮發(fā)性部12采血,分離血清以正向血凝試驗(yàn)測定豬瘟抗體,抗體滴度分)所致。但中藥各組均能促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌如乳酸桿菌、達(dá)1:16或以上為免疫合格。結(jié)果抗體合格率分別為常雙歧桿菌的增殖,其中常規(guī)散劑和醇水提取組的乳酸菌比對規(guī)散劑75. 0% ;水提取物62. 5% ;醇水制劑87.5% ;抗生照組顯著提高(P <0.05)。中藥各組的雙歧桿菌與對照組相素組所方數(shù)搪照組50. 0%。中藥散劑、水煮提取物、醇比均呈顯著性差異(P <0.05)。大量研究證實(shí),乳酸菌和雙2005年第1期V中冀廈隆蕩點(diǎn)RRKMt調(diào)查研究妥曲珠利在雞組織內(nèi)的殘留研究王學(xué)紅,梁劍平,華蘭英,牛建榮,史彥斌,呂嘉文,崔穎,尚若鋒(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所農(nóng)業(yè) 部新獸藥工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州730050)摘要:研究雞單劑量喂服(50 mg/kg●d, 100mg/kg.d,連服2 d)妥曲珠利后在肝臟、腎臟、肌肉組織中的殘留量,以便制定妥曲珠利預(yù)混劑的休藥期。用乙腈-乙酸乙酯(3/2, v/v)提取組織中的藥物，利用高效液相色譜法測定組織中妥曲珠利的濃度。試驗(yàn)結(jié)果表明， 100 mg/kg飼料添加妥曲珠利在雞體內(nèi)休藥期為14 d, .50 mg/kg時(shí)休藥期為8d。該結(jié)果與農(nóng)業(yè)部制定的無公害食品飼養(yǎng)獸藥使用準(zhǔn)則中所規(guī)定的75~ 100 mg/kg雞飲水妥曲珠利的休藥期一致。關(guān)鍵詞:妥 曲珠利;雞;組織殘留;高效液相色譜法( HPLC)中圖分類號: S859.7文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A .文章編號: 1000 - 6354(2005 )01 -0013 -04妥曲珠利(商品名位Baycox)是德國拜耳公司于20世紀(jì)內(nèi)的多種原蟲。其中對柔嫩堆型、毒害布氏、巨型、和緩等80年代開發(fā)的三嗪酮類抗球蟲藥物.可有效殺滅包括球蟲在艾美耳球蟲的抗球蟲指數(shù)均超過180,屬高效抗球蟲藥物。由于其殺蟲效果好，毒性低，在歐洲、日本、加拿大等應(yīng)用廣收稿日期:2004-07-22泛。目前,我國上海新亞藥業(yè)已成功的合成妥曲珠利,其各作者簡介:王學(xué)紅(1975-),女,研究實(shí)習(xí)員，主要從事藥物提取研究。項(xiàng)化學(xué)指標(biāo)均達(dá)到國外水平。為了較全面地了解國產(chǎn)妥曲歧桿菌的生理功能與動(dòng)物機(jī)體的生命活動(dòng)息息相關(guān)(!。這本試驗(yàn)結(jié)果證明,不同T.藝制備的中草藥添加劑,其生些益生菌在胃腸道增殖后.能大量合成維生素,增加營養(yǎng),輔物活性有異。常規(guī)散劑用量大,吸收利用不完全,質(zhì)量難于助食物消化,促進(jìn)宿主代謝,抑制蛋白質(zhì)腐敗、有助于恢復(fù)和控制;水煮提取物從促生長性能、對腸道有益菌的作用以及保持正常胃腸道功能,增加胃腸蠕動(dòng),促進(jìn)消化和吸收,提高對細(xì)胞和體液免疫的影響來看,雖有作用,但均不如常規(guī)散增重和降低料耗,增加經(jīng)濟(jì)效益。中草藥添加劑其有效成分劑和醇水提取制劑;醇水制劑無論是在促進(jìn)豬只生長和腸道主要為有機(jī)酸(綠原酸、齊墩果酸、山楂酸)、多糖和黃酮類有益菌的增殖,還是提高豬外周血T淋巴細(xì)胞比值和豬瘟抗等,這些化合物可能通過對腸道中益生菌的增殖,從而實(shí)現(xiàn)體合格率方面則明顯優(yōu)于常規(guī)散劑和水煮提取物,且用量對動(dòng)物機(jī)體免疫力的增強(qiáng)和生產(chǎn)性能的提高。小，質(zhì)量易控,適宜推廣。3.3不同工 藝制備中草藥添加劑對豬細(xì)胞和體液免疫的影響參考文獻(xiàn):本試驗(yàn)用酯酶染色法測定了試驗(yàn)各組外周血液中T淋[1]戴榮國,曹國文.曾代勤,等。中草藥添加劑的組方篩選巴細(xì)胞百分率,用豬瘟正向血凝試驗(yàn)測定了試驗(yàn)各組接種豬試驗(yàn)[J].四川畜牧獸醫(yī),003.,11):26 ~27.瘟疫苗的抗體升長情況。結(jié)果表明,3%粉劑能顯著的提高[2]朱玉蘭,張明偉,何明清,等.20種選擇性培養(yǎng)基的制備豬只T淋巴細(xì)胞百分率,醇水提取物能極顯著的提高T淋巴方法[A].四川農(nóng)學(xué)院科研處情報(bào)室。幼齡畜禽腹瀉與細(xì)胞百分率,說明該添加劑能增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能。不同T.藝促菌生菌群調(diào)整療法研究專集[ C].1984,49 ~55.制劑其增強(qiáng)效果不一，醇水提取物組(低濃度組)明顯優(yōu)于[3] 徐叔云,卞如濂,陳 修,等。藥理試驗(yàn)方法學(xué)[M].北其它T藝和濃度組。豬瘟抗體合格率測定結(jié)果證實(shí),中藥散京:人民衛(wèi)生出版社,1982.劑、水煮提取物和醇水提取制劑各組均有提高豬瘟抗體合格[4]趙紅霞,詹勇,許梓榮. 乳酸菌的研究及其應(yīng)用[J].率與增強(qiáng)體液免疫功能,且以醇水制劑組較好。江西飼料,2003,(1):9-12.Effects of different production craft on Chinese herbal additive biological activityCAO Guo - wen,ZENG Dai -qin, DAI Rong - guo,JIANG Yong - kang ,CHEN Chun - lin,ZHOU Shu - lan,ZHAI Shao - qin,uU Zong 0 hui ,ZHONG Zheng - ze,0U Xiu - qun,JIANG Shan( Chongqing Swine Science Academy Rongchang chongqing 402460 .China)Abstract: In this experiment, the efets of the dfferent production e中國煤化Ilcoboal -water - abstrac) on Chinese herbal aditive in pigs were studied. The resutls showed;YHC N M H G! probiotioss index,13peripheral blood T lymphocyte ratio and antibody titer of swine fever were raised in three preparations，but, daily gain, feed re-ward, intestinal Lactie acid bacteria and Bifidobacterium' index, T lymphocyte and antibody qualified rate of swine fever were raisedsignificanly in the acohol - water - abetract preparation group, powder preparation group taking second place,Key words: Chinese herbal additive; diferent craf; biological activity ;ffc