中國醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmal of Pharmaceuticals 2012, 43 (6)●401●化學藥物與合成技術奎奴普丁的合成趙傳猛'，裘鵬程'，肖立，尹明星”，張福利*(1.中國醫(yī)藥工業(yè)研究總院上海醫(yī)藥工業(yè)研究院，創(chuàng)新藥物與制藥工藝國家重點實驗室，上海200040;2.浙江海正藥業(yè)股份有限公司，浙江臺州318000)摘要:普那霉素1包括主成分普那霉素I s和次成分普那霉素1日、普那霉素I c.粗晶經甲基化反應將普那霉素1。轉化為普那霉素I A純化后經Mannich反應和消除反應制得58-亞甲基普那霉素1 s(3)， 3與(5)-3-奎寧環(huán)硫醇反應得抗感染藥奎奴普丁，總收率約37% (以普那霉素I s計).關鍵詞:奎奴普丁;普那霉素;甲基化;合成:純化;抗感染藥中圖分類號: R978.1 文獻標志碼: A文章編號: 1001-8255 (2012)06-0401-04Synthesis of QuinupristinZHAO Chuanmeng', QIU Pengcheng', XIAO Li', YIN Mingxing , ZHANG Fulil*(1. State Key Lab. ofNew Drng and Pharmaceutical Process, Shanghai Institute of Pharmaceutical Indhustry, China State lnstitute ofPharmaceutical Industny; Shanghai 200040; 2. Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co,, Ltd, Tatzhou 318000)ABSTRACT: Pritinamycin I , including pristinamycin I n pristinamycin I B and pristinamycin I。was treated bymethylation, in order to convert pristinamycin I B to pristinamycin I s, then followed by Mannich reaction and eliminationto give 58-methylenepristinamycin I a(3), which was subjected to reaction with (S) -3-mercaptoquinuclidine to obtainanti-infective agent quinupristin with an overall yield of about 37% (based on pristinamycin I .Key Words: quinuprstin; pristinamycin; methylation; synthesis; purification; anti-infective agent奎奴普丁(quinupristin, 1) 為鏈陽性菌素普膿性鏈球菌引起的皮膚及軟組織感染(23).那霉素I(PI)的半合成衍生物，達福普汀原料普那霉素I (P I )屬于B族鏈陽性菌素，(dalfopristin)為鏈陽性菌素普那霉素II A的半合主要成分為PIA，含量大于80%;次要成分為.成衍生物，兩者以30 : 70(w/w)比例組成的抗生普那霉素I g(P I )和普那霉素I c(P I c),前素復合制劑于1999年首次在英國上市"，商品名.者含量10%以上。文獻4)報道1中含有3個主要Synercid*,臨床主要用于治療由醫(yī)院獲得性肺炎、有關物質(圖1): 4和5分別是由原料中P I g和耐萬古霉素屎腸球菌(VREF)菌血癥引起的嚴重感P I c經合成引入，6是1的非對映異構體，其中染，和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)及化4的含量較高。本研究通過甲基化反應使P I。的含量由12%降低到1%以下，再經3步反應制得1,^謹以此文恭祝王其灼老師九秩華誕收稿日期: 2012-04-16從源頭上減少了4的生成，提高了1的純度。甲基.基金項目:上海市科技人才計劃項目(10XD1422800化反應條件溫和，反應液HPLC譜圖見圖2，其中.作者簡介:趙傳猛(1982-), 男，博士研究生，專業(yè)方向:藥物化7.58 min的峰為P I B，反應后基本消失;另外，Tel: 01555460023012.15 min的峰經確證為下步反應的中間體58-亞甲E-mail: botcmeng@163 com通僧聯(lián)系人:張福利(1968-), 男，研究員，博士生導師，從事藥基普代報道。.物化學研究。中國煤化工體3與(S).3-童Tel 021-62892872. 13916607640E-mail: zhangf@sipi.com.cn寧環(huán)YHCNMH&方法;①PIA●402.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmal of Pharmaceuticals 2012, 43 (6)MwyMe,MeoHCOOHHCHO0心ar陽sHpI。。Me明eMe~MoM~yMeaginyoHPlc5圖1結構式400p格昂貴，成本較高:②P I A與嗎啉和多聚甲醛進fPlInA行Mannich反應制得58-(嗎啉甲基)普那霉素I A300(2), 2不經純化直接消除得3,收率68%[“,此024681012141618 20法成本低，收率較高。1 00本研究參考文獻[5.7),由P I A經Mannich反jPLaB應和消除反應制得3, 3與(S) -3-奎寧環(huán)硫醇(按503文獻(5]自制)反應制得1，總收率約37% (以02468101214161820P 1 s計),合成路線見圖3.制備1時,3與(S)-3-圖2原料P 1甲基化前(A) 和甲基化后(B) 反應液奎寧環(huán)硫醇反應過程中會生成非對映異構體雜質6。經考察，溫度是影響6含量的關鍵因素，本研究選的HPLC譜圖在一牛成。1的分離純化中國煤化工與叔丁氧基雙(二甲胺基)甲烷縮合后，在氰基硼是本三曾或重結晶純化。TH氫化鈉作用下制得3，收率40% (0),此法試劑價研究發(fā)元J.rcCNMHG溶解和室溫析晶中國醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Joumnal of Pharmaceuticals 2012, 43(6)●403●MeyMe .Mx、yMe ;HOAcPIλ-1(CH2O]。0y麗yoH圖3 1的合成路線過程中，1會轉化為6,同時會生成其他降解雜質，示反應完全后冷卻至室溫，加飽和碳酸鉀溶液調至導致純化困難。本研究用丙酮-甲醇(10 : 1)混pH7.2,用二氯甲烷(120 mlx2)萃取，合并有機相，合溶劑，室溫溶解，-10 C析晶，可有效去除6并經無水硫酸鎂干燥后過濾，濾液減壓蒸除溶劑，剩避免生成降解雜質，6含量降到0.1%以下，1純度余物經柱色譜分離[洗脫劑:甲醇.二氯甲烷(5 :達9.11% (圖4)。95)]，得類白色固體(36.2g, 78.5%)， 含P I A96.54%，P I 80.36%， 中間體3 1.62% [HPLC歸A5.一化法: 色譜柱Promosil Crg柱(4.6 mmx250 mm,2.0fwunasthwh5μum);流動相0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸0.0- N調至pH 3.0)-乙腈(50 : 50);流速1.1 ml/min;5 1015s _2025 30 35t/min檢測波長250 nm;進樣量10山].7.5p5.0B58-(嗎啉甲基)普那霉素I (2)2.5在氮氣保護下將嗎啉(19.3 g, 0.222 mol)溶于甲醇(180 ml)中，冷卻至0~5 C,滴加甲磺酸520230 351/min(16.9 g, 0.176 mol)，加畢室溫攪拌20 min,依次圖4市售Synercid* (A)和自制1(B)的HPLC譜圖加入P I (20g, 0.022 mol)和多聚甲醛(3.26 g,0.109 mol),升溫至35 C反應18 h。減壓蒸除溶劑，由于所購Synercid (Monarch Pharmaceuticals)加入乙酸乙酯(450 ml)和水(450 ml)，加飽和碳為達福普汀和1的復方制劑，因此HPLC譜圖中包酸氫鈉溶液調至弱堿性，靜置分層，水層由乙酸乙含了達福普汀的相關峰。本研究為了方便各成分含酯(120 mlx2)萃取，合并有機相，經無水硫酸鈉量的對比，只對1相關峰進行了積分。由圖4可見，干燥后過濾，濾液減壓濃縮至剩約300 ml,直接投入下步反應。自制1中4、5、6的含量均低于所購產品。58-亞甲基普那霉素1。(3)實驗部分將乙酸鈉(1.91 g, 0.023 mol)和乙酸(26.6 ml)普那霉素I。(P I N)將PI粗品(購自浙江海正藥業(yè)股份有限公溶于水(450 ml)中，加入如上所得2的乙酸乙酯司，含P I 82.86%，P I g11.95%，45 g)加入溶液(300 ml),升溫至40 C反應4h,冷卻至室溫，到水(90 ml)中，依次加入甲酸(36 g, 0.783 mol)加飽和碳酸氫鈉溶液調至pH 6.6，靜置分層，水層和37%甲醛溶液(24 g，0.296 mol),升溫至40 C用乙酸乙酯(120 ml)萃取,合并乙酸乙酯層，經無.水硫酸中國煤化工至剩約200 ml.反應3.5h, HPLC檢測(含P 1 A86.51%, P 1。冰浴機YHCNMHG (20 ml)洗滌，0.72%，中間體3 4.96%; P I。轉化率94.0%)顯干燥后用乙酸乙酯重結晶，得白色固體3(12.8 g,●404●中國醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmal of Pharmaceuticals 2012, 43(6)66.3%)，mp226~ 230°C (文獻”:約230 C)。J=6.4 Hz, 3H), 1.39~ 1.45(m, 1H), 1.52 ~ 1.67(m,純度97.08% (HPLC條件同P I ]。ESI-MS(mlz):3H), 1.71 ~ 1.81 (m, 2H), 1.89(s, 1H), 1.19~ 2.12(m,879[M+H]*; 'H NMR(CDCI1,) δ: 0.64 (dd,J=2H), 2.24 ~ 2.90(m, 1H), 2.31~ 2.40(m, 2H),5.6 Hz, J,=16.8 Hz, 1H), 0.91 (t, J=7.6 Hz, 3H)，2.51 ~ 2.57 (m, 2H), 2.77 ~ 2.98 (m, 12H), 3.11 (dd,1.22 ~ 1.30(m, 2H), 1.32(d, .F=6.4 Hz, 3H),1.61~ J=4.0 Hz, J2=13.2 Hz, 1H), 3.21 ~ 3.36(m, 6H)，1.79(m, 3H),2.01 ~ 2.07(m, 1H), 2.48(d, J=3.50~ 3.55(m, lH), 4.57(t J=7.2 Hz, 3H), 4.79~16.4 Hz, 1H), 2.88 ~ 2.93(m, 7H), 3.23 ~ 3.29(m,4.87(m, 2H), 5.01 ~ 5.06 (m, 1H), 5.21 ~ 5.29(m,5H), 3.49 ~ 3.60(m, 2H), 4.60(dd, J=5.4 Hz, J:=2H), 5.85 ~ 5.91 (m, 2H), 6.46(d, J=10.0 Hz, 1H),8.0 Hz, 1H), 4.78 ~ 4.84(m, 2H), 5.05 (dd,I=6.62(d, JF-8.4 Hz, 2H), 7.05(d,.5=8.4 Hz, 2H),7.18 ~4.0 Hz, J,=11.6 Hz, 1H), 5.25 ~ S.31 (m, 3H), 5.84(d,7.32 (m, 5H), 7.42 ~ 7.47(m, 2H), 7.84(s, IH),J=8.8 Hz, 1H), 5.87~ 5.92 (m, lH), 6.13(s, 1H),8.40(d, J=9.6 Hz, 1H), 8.73(d, =10.4 Hz, 1H);6.46(d, J=9.2 Hz, 1H), 6.58(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.94(d,"C NMR(CDCl,)8: 9.91, 16.71, 21.03, 24.59, 25.01,J=8.4 Hz, 2H), 7.21 ~ 7.33(m, 5H), 7.42 ~ 7.48(m,26.05, 27.71, 27.99, 30.95, 35.67, 40.50, 41.20, 41.74,2H), 7.85(m, 1H), 8.35(d, J=9.6 Hz, lH), 8.71(d, .44.13, 46.79, 47.66, 47.77, 48.70, 51.43, 54.02, 55.68,J=9.2 Hz, 1H), 11.58(s, 1H); "C NMR (CDC1) δ:55.94, 56.23, 57.45, 71.82, 112.61, 122.76, 126.94,9.96, 16.70, 24.58, 25.18, 27.72, 31.14, 35.87, 39.78,127.56, 128.13, 128.82, 129.04, 130.51, 136.25,40.50, 42.69, 47.77, 51.54, 54.88, 56.22, 56.37, 57.49,139.78, 150.47, 158.53, 167.20, 167.93, 168.48,71.79, 112.93, 121.84, 122.36, 126.93, 127.76, 128.23,169.73, 170.00, 171.01, 12.37.128.90, 129.14, 130.19, 136.26, 138.30, 139.98,150.53, 158.53, 167.31, 168.08, 168.47, 169.87,參考文獻: .170.01, 171.61, 172.53, 193.28.1] Murchison A. 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Synergistin derivatives[HPLC歸-化法:色譜柱Promosil Cig柱(4.6 mmxand pharmaccutical compositions which contain them: US,250 mm, 5μm);流動相A: 0.1 mol/L磷酸二氫鉀4798827 [P]. 1989-01-17.溶液(用磷酸調至pH3.0)，B:乙腈，梯度洗脫:6] Corbet JP, Cotrel C, Farge D, et al. Syergistin derivatives and0~ 40 minB 25%→55%，40~45 min B 55%→their preparation US, 4617377 [P]. 1986-10-14.25%;流速1.1 ml/min;檢測波長250 nm;進樣刀] Bastart JP, Marc J, Marne VS, et al. Pristinaymcinia or量10 μl]. ESI-MS (m/z): 1 022 [M+H]*; H NMR中國煤化Ipanatio: us, 5304642(CDCI;) 8: 0.67 (dd, J=5.6 Hz, J2=14.8 Hz, 1H),MYHCNMHG0.90(t, J=7.2 Hz, 3H), 1.12~ 1.28(m, 2H), 1.31 (d,