sSN1009-3079cN14-1019/R世界華人消化雜志2000年3月第8卷第3表2不同阻斷劑對(duì)NOS活性及NO合成水平的影響程度持續(xù)至損傷后24h.NO組織NO胃液胃粘膜損傷后PIK和NOS活性呈現(xiàn)相似的變化規(guī)律,應(yīng)(mxg蛋自-min-1)mmg蛋自-min-1)(p①)用PIK選擇性抑制劑使胃粘膜NOS活性、組織和胃液NO水3.L2±0.53平分別下降了254%,22.5%和19.3%.表明PIK可能參與DC組6.89±0.511960±288394.79±22,13°D+T5.140.37±2.35b318.78±26.48bO合成的調(diào)節(jié).但PIK激活后導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)NOS活性變化的P<0.01,ws其余各組,P<0.01w對(duì)照組機(jī)制仍不清楚,推測(cè)PTIK激活后導(dǎo)致細(xì)煦內(nèi)Ca2濃度增高可觸是其重要的桃制之一,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)Ca2濃度增高是受體型3討論P(yáng)TK激活后細(xì)胞內(nèi)第二信息傳遞者,而細(xì)胞內(nèi)NOS活性的提冒粘膜在受到一定程度的損傷性刺激后,可啟動(dòng)快修復(fù)機(jī)高有賴于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的增高(·9,NS激活后合咸№O增制使胃粘膜迅速恢復(fù)其完整性,以避免損慚向深層發(fā)展,這是加,而NO反過(guò)來(lái)又對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2濃度起負(fù)調(diào)控作用,因而生胃粘膜抵抗疾瘸的亠種重要的屏障能力(1,2).胃粘膜快修復(fù)機(jī)長(zhǎng)丙子受體的激活、O的合成、以及Ca2穩(wěn)態(tài)組成細(xì)胞內(nèi)信制主要表現(xiàn)為損傷區(qū)周?chē)蛏畈炕罴?xì)胞的遷移,由于不需要號(hào)傳導(dǎo)的一個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)4DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成,只需要對(duì)細(xì)胞內(nèi)一系列功能蛋白胃粘膜表達(dá)有多種生長(zhǎng)因子多肽,而且有結(jié)構(gòu)型NO6商表質(zhì)的適當(dāng)修飾即可完成,因而是一種快速的反應(yīng),但這種機(jī)制達(dá),在胃粘膜損傷后,PTK和NO出現(xiàn)迅速的反應(yīng)性變化,表明仍不甚濟(jì)楚3-61.在胃粘膜損傷修復(fù)過(guò)程中,生長(zhǎng)因子多肽參PIK和NO共同促進(jìn)了損傷后胃粘膜上皮的快速修復(fù).由于與其調(diào)節(jié),而蛋白酪氨酸激酶(PTK)是生長(zhǎng)因子受體胞內(nèi)區(qū)行PIK對(duì)NO的合成有一定的影響,PIK的作用可能在一定程度使信號(hào)傳遞的一個(gè)主要的功能部分,其活性變化必然對(duì)胃粘膜上通過(guò)影響NOS的活性以及NO合成而完成,但其深層機(jī)制有修復(fù)異有重要影響,但其機(jī)制仍不清楚2待進(jìn)一步研究本文結(jié)果表明,胃粘膜損傷后,PTK活性發(fā)生顯著變化,而且這種變化主要發(fā)生于胃粘膜修復(fù)的早期.損傷后30min呈短參考文獻(xiàn)暫下降,可能是因?yàn)閾p傷性因素仍然大于修復(fù)性因素,1h后開(kāi)Relan NK, FLigiel SEG, Dutta S, Tureaud ], Chauhan DP, Majumdar APN始上升,并在3h內(nèi)迅速達(dá)到峰值,提高的幅度為160.69%.雖4Lb,19577m6k然在胃粘膜修復(fù)的中后期,PTK活性逐漸降低,但其活性較基2 Playford R. Peptides and gastrointestinal mural integrity. Gut, 1995: 37: 595礎(chǔ)水平增高一直持續(xù)至48h,表明PIK可能參與胃粘膜完鏊性3Pmw山H,CwmP,. liam 5. Present views on restitution of gastrointestina修復(fù)的整個(gè)過(guò)程,而損傷后24hPIK活性二度增高可能是由4 Moncada s, Palmer RM, Higgs EA. Nitricysiology, pathophysioks于多種生長(zhǎng)因子表達(dá)增加的結(jié)果這一時(shí)期PTK活性再度增5 Tepperman Bl, Voula bl, Soper Br. Effect of neutropenia on gastric mu高的主要作用可能是加速細(xì)胞增殖,可能還有促進(jìn)分化的作and mucosal6 Kooturek SK, Konturek PC. Role of nitric oxide in the digestive system我們?cè)谖刚衬そM織勻裳中檢測(cè)到NOS活性8,并且在胃7Ax時(shí), Malooententi-Wilson C,oBwE.oian粘膜中度損傷性刺激后可誘發(fā)NOS活性發(fā)生與PTK相似的變ischemia-reperfusion injury by nitric oxide generators. Dig Dis Sci化,在損傷后的早期迅速提高,并且NO的合成增加.組織NOs8 Coskun t, Yegen BC, Alican i, Peker o, Kurtel h. Cold restraint strese- induccd活性和NO以及胃腔內(nèi)的NO水平在胃粘膜損傷后3h達(dá)到峰stric mucosal dysfunction: ole of nitric oxide. Dig Dis Sci, 1996441: 956-9639 Gyres K. The role of endogenous nitric oxide in the gastroprotective action of值,上升的幅度分別為118.5%,123.2%和130.15%,其增高的orpine. EurJ Pharmacol, 1994: 255: 33-37ISSN100-3079CN14-1019/R世界華人消化雜志,20008(3):355·研究快報(bào)·乙醇對(duì)大鼠胃粘膜的影響灌注入胃能引起全胃腸道(以胃為主)的粘膜病變,并廷緩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性胃粘膜病變的自然愈合4-8).本實(shí)驗(yàn)試圖探討口蘇紅1曹之憲2林兆鑫800mL/酒精灌注法所誘發(fā)的動(dòng)物胃粘膜損害的發(fā)病機(jī)制,ubject headinthanol; gastric mucosa/ pathology;以便指導(dǎo)臨床tumor necrosis factor主題詞乙醇;胄粘膜/病理學(xué);腫瘤壞死因子1材料和方法眾所周知,正常胃粘膜的完整性是由攻擊因子與防御因子1.1材料選擇健康♀SD大鼠,體質(zhì)量190g~230g每組16的動(dòng)態(tài)平衡來(lái)維持的,一旦這一平衡遭受破壞就會(huì)導(dǎo)敦粘膜損只~18中國(guó)煤化工分別胃內(nèi)灌注蒸餾水(正害1-3.據(jù)報(bào)道,各種損傷因子如酒精(ETOH)、消炎痛(M)經(jīng)常組)CNMHG4g,酒精組),隨后自由進(jìn)食及水,了山醫(yī)科大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院消化內(nèi)科12方法2香港大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理系1.2.1胃粘膜病變及漿膜血流量測(cè)定上述處理72h后,經(jīng)乙香港大學(xué)瑪麗醫(yī)院胃腸肝病內(nèi)科項(xiàng)目數(shù)數(shù)據(jù)接受日期199126醚麻醉,開(kāi)腹暴露胃,用漱光多普勒儀在大鼠腺胃測(cè)定漿膜血收稿日期流量(GSBF)后離斷胃,并暴露巖膜面,釆用四方格法計(jì)算粘膜ssN1009-3079cN14-1019/R世界華人消化雜志2000年3月第8卷第3期損傷面積(mm2),然后分別計(jì)算每組血流及損傷面積,并刮取胃本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn)組PGE2水平均顯著高于對(duì)照組(P粘膜層組織迅速置入液氮后轉(zhuǎn)入一70℃低溫冰箱保存,用于測(cè)<0.01),但仍未能提供有效保護(hù)作用,說(shuō)明酒精所致大鼠胃粘定粘膜MPO,FGE2及TNFa水平膜損害尚存在其他機(jī)制.據(jù)報(bào)道山,9,13ETOH誘導(dǎo)的粘膜病1.2.2胃粘膜PG2測(cè)定釆用放射免疫學(xué)方法,按碘標(biāo)記蚋變與粘膜靜脈收縮、GMBF降低有關(guān),而且其損傷程度與FGE放免試劑盒( Amersham International PIC)要求操作,用y-GMBF呈負(fù)相關(guān)[13].s]. Konturek et al6發(fā)現(xiàn)乙酰水楊酸可引爍儀測(cè)放射性QHM,并換算為:{g/mg上清蛋白起劑量依賴性急性胃粘膜瘸灶增多并伴PM增加、血液PCs1.2.3胃粘膜MPo活性測(cè)定取凍存胃粘膜層組織稱重,在降低,但重復(fù)試驗(yàn)誘發(fā)粘膜的適應(yīng)性改變,此時(shí)粘蒺血流增加、4℃下制成勻漿,收樂(lè)上清液,用 BECKMAN DC650分光光度BGF及細(xì)胞增殖均顯著升商,而PMN明顯減少.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果儀測(cè)定其在437mmOD值,井換算為酶活性單位(IU/g上清蛋未發(fā)現(xiàn)800mL/ L ETOR對(duì)漿膜血流有影響,可能與酒糟濃度、劑量、作用時(shí)間及測(cè)定GSBF時(shí)的部位有關(guān)1.2.4胃粘膜mTNFα測(cè)定按 Factor- Test-XTM Mouse Tsuboi et al11究發(fā)現(xiàn)非甾體類消炎藥能促進(jìn)人淋巴TNF,酶標(biāo)儀免疫試劑盒( genzyme,USA)操作,用 BIO-RAD細(xì)胞合成TNF2本實(shí)驗(yàn)兩組TNFa水平無(wú)差異,提示可能MDEL3550徼孔板讀數(shù)儀測(cè)定其450mm的吸收峰,再換算為T(mén)Fa并非ETOH損傷粘膜的機(jī)制或與所給酒精的劑量、療程/mL上清蛋白不足以引起粘膜TNF水平的改變,值得進(jìn)一步探討統(tǒng)計(jì)學(xué)處理參數(shù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組均數(shù)的顯著與正常組比較,除SBF,TVF。無(wú)明顯變化,試驗(yàn)組粘蔑損性檢驗(yàn)用t檢驗(yàn),以P<0.05為顯著性水準(zhǔn)傷面積顯著增加伴有粘膜MPO活性及PGE2水平明顯升高(P<0.01),提示800mL/ L ETOH所致的損傷與PMN活化、浸潤(rùn)2結(jié)果等攻擊因子增加有關(guān),而與內(nèi)源性防御HGE水平無(wú)關(guān)2.1800 mL /L ETOH對(duì)鼠胃粘膜損傷的影響(表1)22酒精對(duì)鼠GSF,PGF2,MP及TNFa的影響(表2)4參考文獻(xiàn)I Robert A, Neaamis JE, Lancaster C, Hanchar A. Cytoprotection by表1鼠胃粘膜損傷的改變x±sNaOH, Hypertoric NaC, and Thermal Injury. Gastroenterology, 1979: 77:433對(duì)照組0.00±0.002 Rainford KD, Mechanisms of gastrointestinal toxicity of nonsteroidal anti酒精組flammatory drugs. SandJGtro,1989;24(Sup163):9-163 Lacy ER, Ito S. Microscopic analysis of ethanol damage to rat gastrP<0.01,w對(duì)照組4 Wang JY, Yamasaki S, Kojitakeuchi, Okabe S. Delayed healiastric ulcers in rats by indomethacin. Gastroenterology, 1989: 96: 393-402表2800mL/ L ETOH(8mL/kg)對(duì)大鼠胃粘腰的影響5 Cjihara Y, Okabe S. Mechanisn by which indomethacin delays gastric ulcerdng/g)6 Konturek s], Braowowski T, StschuraJ, Dembinski A, Majika ] Rule uf gastricooxd flow, neutrophil infiltration3783±04391208±79,1051030962.67t797 Kvietys PR, Twohig B, Danzel J, Specian RD, Ethanol-induced injury to the rat4P<0.01,vs對(duì)照組hine oxidase- derived radicalsGastroenterology, 1990: 98: 909-9208 Eastwood GL. Progress in gastroenterology. gastrointestinal epithelial renewal3討論serology,1977;72:962-975大量的臨床與實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,酒精可誘發(fā)胃粘膜急性損9 Wallace JL.. Nonsteroidal anti-infammatory drugs gastropathy and cytoprotectionthogenewis and mechanisns re-examined. Snd Jof Ga傷3,12),但其確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚.PMN被認(rèn)為參與其損(Sul192):3-810 ALcan I, Coskun T, Coxak A, Yegen BC, Oktay S, Kurtel H. Role of傷機(jī)制,FGs減少則解除其對(duì)PMN活化的抑銅,PMN的粘膜phils in indamethscin-induoed gastric mucosal lesions in rats. In/amm Res浸潤(rùn)增加并進(jìn)一步獰放MPO、氧自由萎、活性氧化代謝產(chǎn)物如u1:061,hmM,hs.hK. nonsteroidal超氟化陰離子(O2-)、蛋白酶并粘附于血管內(nèi)皮造成大血管閉flammatory drugs differentially regulate cytokine production in human塞等方式導(dǎo)致粘膜損傷.正常粘膜細(xì)胞對(duì)損傷有一定抵抗能mphocytes up-regulation of INF, IFN-y and IL-2 in amtrast to down1995;7:372-379力,所以PMN與靶細(xì)胞的比率必須達(dá)到一定的非生理性水平12 uth PH. Gastric blood flow in ethanol injury and prostaglandin cytoprotection(>20:1),才能引起損傷,如同時(shí)存在其他炎癥遞質(zhì)和細(xì)胞介13ChCH, hen bw,HbCS,KoJ,Lmn. Assessment of hemodynamic素,則該比率可以降低,而非活化的PMN幾乎不引起胃粘膜上pectrophotometry: effects of ethanol and prostaglandin Ez under ischemic and皮細(xì)胞損傷.超氧化歧化酶(SOD)則可通過(guò)分解翅氧化陰離子conditions. Digestion, 1994: 55: 389-39414 Santucci l, Fiorucci S, Brunori PM, D Mitten? FM, Chiorean M, Morelli A.(O2)為過(guò)氧化氫和氧,對(duì)PMN介導(dǎo)的粘膜損傷有保護(hù)作mor necrosis factor a receptor- antagonists proteet against in用69115.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,800mL兒 L ETOH引起粘膜atric mucosal injury in rats. Gastroenterology, 1995: 108( Suppl AprilMPO活性顯著增加(P<0.01),支持PMN活化及釋放的MPO15KolR, Kopatsis A, Fligiel SEG, cranko,R, Callewaert D, Neutrophil參與胃粘膜病變的形成中國(guó)煤化工s,131CNMHG