安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), Joumal d Anhui Agri,si.200,37(9):4110-4ll貴任編輯張楊林責(zé)任校對(duì)況玲玲黃芪的乙醇提取工藝優(yōu)化研究昝麗霞(陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院,陜西漢中n嬰[目的]優(yōu)選黃芪的最佳乙醇提取工藝。[方法]朱用正交試驗(yàn)法,以干青收率、黃芪甲苷含量、總黃酮含量為指標(biāo)對(duì)形響黃芪中有效威分提取的因素進(jìn)行考察。[結(jié)果]黃芪有效成分最佳提取工藝條件為加%乙醇濃度,濫度加0℃,料液比1:12,提取3h。在該工藝條件下,測(cè)得干膏得率為25%左右黃芪甲苷含量超過(guò)3%,總黃酮含量在0.8%左右。[結(jié)論]優(yōu)選出的黃芪乙醇提取工藝科學(xué)、經(jīng)濟(jì),可有效節(jié)約資源,用于工業(yè)生產(chǎn)。關(guān)鍵詞黃芪甲苷;總黃酮;正交試驗(yàn);綜合評(píng)分中圖分類(lèi)號(hào)R97文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)017-6611(2009)09-04110Study on the Optimination of Ethanol Extraction Tect niques for rodix astragaliZAN Li-xia (School of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong, Shaam 723001)Abstract [Objective] The aim watraction techniques for Radi astragali. [Method ] with extract yield, astagtotal flavone content as indices, the influencing factor on the extraction of active components from R. astragali were investigated. I Result] The bestchnological conditions for the extraction of activents from R. astraas follows: 70% ethanol, extraction temperature of 70C, solid-liquid ratio of 1: 12 and extraction time o 3 h. Under these technology conditions, the extract yield was about 25%, the astragaloside content was morethan 3% and total flavone content was about 0.8%.[Conchusion] The optimal technology for the ethanol extraction o R. astagali was scientific and ecanonical. And can save resources and instruct the industrial practice effectivelyKey words Radir astragali; Saponins: Total flavone: Orthogonal eperimental; Synthetical mack黃芪( Radia astragali)為豆科植物膜莢黃芪 astragalus124樣品中黃芪甲苷含量的測(cè)定。稱(chēng)取黃芪甲苷對(duì)照品ebrananceus(Fsch,)Bge,和蒙古黃芪A. mongholicus(Bg.)2m,用無(wú)水乙醇定容至0m量瓶中,搖勻。分別精密吸取Hsia的干燥根,主要分布于我國(guó)西北、華北和東北等地區(qū),對(duì)照品溶液0、0.6、0.8、1.0、12、1,4、1.6m于量瓶中,水浴加具有補(bǔ)氣固表脫毒排膿生肌、利尿的功效。筆者采用乙醇熱揮去溶劑,各加入020m濃度5%香草醛冰醋酸溶液和提取正交試驗(yàn)法以干膏收率黃芪甲苷和總黃酮含量為指0.80ml高氯酸密塞,于7℃水浴恒溫加熱20min,取出后立標(biāo)采用綜合評(píng)分法對(duì)黃芪的乙醇提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。即用流水冷卻加冰醋酸5m搖勻,顯色。用未加對(duì)照品的1材料與方法溶液作空白對(duì)照在540mm處測(cè)定,制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。11材料TU12型紫外分光光度計(jì)(北京惠譜通用儀器參考文獻(xiàn)[2]對(duì)黃芪樣品中甲苷進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)回歸方公司),w8OG型微波爐(佛山市順德微波爐電器有限公程計(jì)算結(jié)果司),Ks120E型超聲波清洗機(jī)(寧波生科儀器廠),SH421-1.2,5樣品中總黃酮含量的測(cè)定。稱(chēng)取在120℃干燥至恒420型恒溫水浴鍋(河北省黃驊市航天儀器廠),FAON型重的蘆丁對(duì)照品10mg,置50m量瓶中加甲醇定容至刻度電子天平(上海天平儀器廠)。中藥黃芪(購(gòu)自陜西漢中藥材搖勻。吸取該溶液0、1、2、34、5m分別置于25m量瓶中加公司),黃芪甲苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所標(biāo)號(hào)濃度5%NNO21m,依次每隔6min加濃度10%A(NO3)210781-08),蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)00802005,中國(guó)藥品生物制品ml,濃度4%NaOH0ml,最后各用水稀釋至刻度,搖勻放置15檢定所),試劑均為分析純mn,用第1瓶作空白,在500m處測(cè)吸收度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。12方法參考文獻(xiàn)[3]對(duì)黃芪樣品中總黃酮進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)回歸1.21正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選擇料液比提取溫度、提取時(shí)間、方程計(jì)算結(jié)果乙醇提取溶劑濃度為考察因素每因素各取3個(gè)水平,選用2結(jié)果與分析L4(3)正交表進(jìn)行試驗(yàn)以干膏收率黃芪甲苷含量及黃酮含21千膏收率試驗(yàn)結(jié)果由表1可知3號(hào)試驗(yàn)即乙醇提量為評(píng)價(jià)指標(biāo)采用綜合評(píng)分法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析(其權(quán)重系數(shù)取濃度0%料液比1:2提取溫度0℃條件下提取4h,所分別為0.1、0.504)1得干膏收率最高,為27.13%。122樣品溶液的制備。稱(chēng)取9份黃芪藥材粉末(過(guò)40目2.2黃芪中甲苷含量的測(cè)定結(jié)果篩)每份10g,按正交表各列號(hào)項(xiàng)下條件分別進(jìn)行提取,過(guò)221標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果。以吸收度值A(chǔ)為縱坐標(biāo)黃芪濾濾液合并離心取上清液減壓濃編至無(wú)醇味加水定容甲苷量c(g)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸得方程:A=487805C于100ml量瓶中,備用。7.317,r=0.994(n=6)。表明黃芪甲苷在120~320鵂12.3千膏收率試驗(yàn)。量取9份樣品溶液各50m1,置已干范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。燥至恒重的蒸發(fā)皿中水浴蒸干,殘?jiān)?06℃干燥3h取2.22含量測(cè)定結(jié)果。由表1可知2號(hào)試驗(yàn)即乙醇提取出,置干燥器中放置30min后迅速稱(chēng)重計(jì)算。濃度1:1n面沮度“nq條件下提取3h,測(cè)得甲苷含中國(guó)煤化工基金項(xiàng)目陜西省教育廳專(zhuān)項(xiàng)科研計(jì)劃項(xiàng)日(6K):陜西理工季院2,3CNMHG作者摘介普麗霞(1-),女陳西韓城人,項(xiàng)士,講師,從事天然藥231標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果。以吸收度(Y作縱坐標(biāo)蘆丁濃物有效成分研究度(X)作橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得回歸方程:Y=0.4995X+收稿日期20001-150003,r=0.99n=5)。結(jié)果表明峰面積與濃度呈良好3褻9期昝麗霞黃甕的乙醇提取工藝優(yōu)化研究4111的線性關(guān)系濃度70%料液比1:12,提取溫度70℃條件下提取4h,測(cè)得232含量測(cè)定結(jié)果。由表1可知,3號(hào)試驗(yàn)即乙醇提取黃酮含量最高,為09%。表1正交試驗(yàn)方案及結(jié)果因素Fass評(píng)價(jià)指標(biāo) Evaluation ind提取濃度提取時(shí)間提取溫度干膏得率∥%黃芪甲苷含量∥%黃酮含量∥%綜合評(píng)分Exraction concentration Soid-liqunid ratio Extraction time Extract3.1803191,4126.100.5%480m∞∞∞∞3.3717.03.000.2I:1017.5079.2.623.130.8685.48:100568,402.787.0注:千膏收率評(píng)分=干膏收率最大干膏收率x0.1×100:黃芪甲苷含量評(píng)分=黃芪甲苷含量/最大黃芪甲苷含量x0.5×100;總黃酮含量評(píng)分x總黃酮含量/最大黃酮含量x0.4×100;綜合評(píng)分=干膏收率評(píng)分+黃芪甲苷含量評(píng)分+總黃酮含量評(píng)分。最憂(yōu)水平為AB3C2DNote: The extract yield mark s extract yield/maximum etract yield O 1 x 100: Astragalaside oontent mark astragaloside content/ maximum astragaloside can-tent x0. 5x 100: Total flavone content mark total flavone content/ mmmm total flavone content 0. 4 x 100; Synthetical mark= extract yield markcontent mark+ total flavone content mak. The optiman level is A, B,Cl24因素影響分析結(jié)果表1表明,乙醇提取試驗(yàn)中根據(jù)率最高。在通常情況下,人們認(rèn)為提取時(shí)間越長(zhǎng),有效成分極差大小得出各因素作用主次為A>B>C>D,即提取濃度提出率越高。該試驗(yàn)結(jié)果顯示,長(zhǎng)時(shí)間高溫條件將會(huì)使黃>料液比>提取時(shí)間>提取溫度;最佳工藝組合為芪甲苷分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變從而使其喪失生物活性。因此AB3C2D3,即乙醇提取濃度7%料液比1:12提取溫度70℃降低提取溫度對(duì)保持甲苷提取物活性具有重要意義熱浸法的條件下提取3h。方差分析結(jié)果表明提取濃度對(duì)提取效果更好地保持了甲苷的活性,使甲苷提取率有所提高。的影響有顯著意義,其他3因素的影響無(wú)顯著意義。(2)黃芪中甲苷和黃酮均為黃芪的有效成分。該試驗(yàn)采25驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果為驗(yàn)證上述優(yōu)選的微波提取工藝最佳用正交設(shè)計(jì),以黃芪中黃芪甲苷和總黃酮2種成分的含量作條件的穩(wěn)定性稱(chēng)取20g黃芪3份,分別按所確定的最佳條為優(yōu)選正交方案的指標(biāo)進(jìn)行考察以綜合評(píng)分值優(yōu)選黃芪熱件進(jìn)行提取測(cè)得結(jié)果見(jiàn)表2。浸提的工藝,以節(jié)約藥品用量,降低能量得到最大產(chǎn)率為原衰2證試驗(yàn)結(jié)果則,重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)表明優(yōu)選出的工藝科學(xué)、經(jīng)濟(jì),可用于指ble 2 The results d validation te導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)。黃芪藥材粗粉∥g干膏黃芪甲總黃酮參考文獻(xiàn)Crude powder frun[]羅毅劉剛周本宏等綜合評(píng)分法優(yōu)選黃芪的水煎提工藝[刀]中國(guó)Astragaloside Total flavone醫(yī)院學(xué)雜志,2004,2411):667-60.cuta(2]姚麗哪林政義陳芳不同種類(lèi)黃芪的皂苷含量比較[門(mén)]淮海醫(yī)藥25.863.41x06,23(2):102025.233.200833]陳永城李寶才張健,等.蘆丁提取工藝改進(jìn)的研究[門(mén)]中醫(yī)藥學(xué)刊x0042():x061[4]歐陽(yáng)臻常鈺,李永輝,等桑葉多糖的提取純化及其含量測(cè)定[時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,06,3(10):1403結(jié)論與討論(1)試驗(yàn)結(jié)果表明熱浸法提取黃芪中甲苷和黃酮的效4N以ⅧA八心mN,W%乳原成體細(xì)形體內(nèi)及體外性的實(shí)驗(yàn)研究(上接第4059頁(yè))regenesis[J].J Bad Chen,0,1(46):3081-3037[3] KENNEY N J SMITH G H. 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