中國(guó)醫(yī)藥指南2012年8月第10卷第22期·實(shí)驗(yàn)研究·1:鼻淵片提取工藝研究崔春愛(ài)王會(huì)弟(1一汽總醫(yī)院,吉林長(zhǎng)春130013;2吉林省藥物研究院,吉林長(zhǎng)春130061)【摘要】目的確定鼻淵片提取及干燥工芑參數(shù)。方法以揮發(fā)油量、茜草素提取率為指標(biāo)確定工藝。結(jié)果茜草用η0%匚醇滲漉提取,滲漉液的量為藥材量8倍時(shí),茜草素提取率可達(dá)83%。揮發(fā)油提取工藝是加10倍水提取4h。結(jié)論提取工藝能夠充分提出有效成分,且工藝穩(wěn)定【關(guān)鍵詞】鼻淵片;提取工藝;揮發(fā)油;茜草素中圖分類(lèi)號(hào):R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼文章編號(hào):1671-8194(2012)22-0115-02鼻淵片處方由蒼耳子、辛夷、金銀花、茜草、野菊花組成,收載2方法與結(jié)果于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)》第6冊(cè)WS3-B-1265-92,原提2.1辛夷、金銀花、野菊花揮發(fā)油提取條件的研究取、干燥工藝參數(shù)不明確,我們對(duì)此進(jìn)行了詳細(xì)的研究按原工藝,辛夷、金銀花、野菊花提取揮發(fā)油,由于原工藝中沒(méi)1試劑與藥材有加水倍數(shù)與提取時(shí)間,所以我們對(duì)提取揮發(fā)油進(jìn)行了較詳細(xì)的研究化學(xué)試劑:滲濾用乙醇為醫(yī)用乙醇,藥材采購(gòu)于吉林省大藥房實(shí)驗(yàn)方法:將一個(gè)處方量的辛夷、金銀花、野菊花藥材去雜,破0、1、2、4、8、12h測(cè)定。測(cè)得咖啡酸的峰面積RSD=1.52%,表明供試品咖啡酸含量在12h內(nèi)穩(wěn)定。244重復(fù)性試驗(yàn)精密稱(chēng)取5份同一批次(批號(hào)為108129)蒲公英顆粒1.0g,制備供試品溶液,上述色譜條件下測(cè)定。測(cè)得RSD=0.47%,表明測(cè)定方法的有良好的重現(xiàn)性24.5回收率試驗(yàn)01.003.005精密稱(chēng)取已知含量的咖啡酸的蒲公英顆粒9份,每份約lg,精密加入咖啡酸對(duì)照品102.7、205.4、308.1μg個(gè)三份,參照供試品溶液的配置和色譜條件測(cè)定,計(jì)算回收率。結(jié)果如表2。表2提取物中咖啡酸加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果0L.03005007.0900含量(pg)加入量(pg)測(cè)得量(pg)回收率(%)平均值RSD(%)A:陰性對(duì)照組;B圖2咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)曲線198.698.17試品溶液;C對(duì)照品溶液圖1高效液相色譜圖394.698.33在2.1中色譜條件下,取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液39940.89各10山進(jìn)樣。結(jié)果表明,供試品與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同,陰性對(duì)照在此無(wú)吸收峰,對(duì)樣品無(wú)干擾(圖1)488.624.2線性實(shí)驗(yàn)精密稱(chēng)取對(duì)照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL,分別置于308.1l0mL容量瓶中,添加5%的甲醇溶液稀釋至刻度,得濃度為10.27、246樣品含量測(cè)定20.54、30.81、41.08、51.35、6162μgmL各取10μL進(jìn)樣。以咖啡酸取三個(gè)不同批次的樣品,在上述色譜條件下進(jìn)行對(duì)咖啡酸進(jìn)行進(jìn)峰面積(A)為縱坐標(biāo),進(jìn)樣濃度(C)為橫坐標(biāo),得到回歸方程為樣測(cè)定。測(cè)定結(jié)果批號(hào)為1108123、1108124,1108127的樣品中咖啡Y=54830X4381.5,R=0.999故咖啡酸濃度在10.276262μgmL范酸含量分別為02357、0.1996、0.12019mgg圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。見(jiàn)表1、圖2。討論表1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果(n=6)效液相色譜法測(cè)定蒲公英顆粒中咖啡酸含量,具有靈敏度和準(zhǔn)濃度(μg/mL)1020.5430.81410851.3561.62確性高,重現(xiàn)性好方傭可田千蒲公繭顆粒中咖啡酸含量峰面積(A)5600421201911685001224838428100043375172的測(cè)定。中國(guó)煤化工24.3精密度與穩(wěn)定性試驗(yàn)參考文獻(xiàn)CNMHG精密取對(duì)照品溶液0μL,在上述色譜條件下,重復(fù)進(jìn)樣6次。以[]國(guó)家藥典委員會(huì)中華人民共和國(guó)藥典(一部)S]北京:化學(xué)工業(yè)咖啡酸峰面積計(jì)算得RSD=0.24%。取同一供試品溶液10μL,分別于出版社,2005:244-245116·實(shí)驗(yàn)研究·August 2012,Vol10,No.22Guide of China Medicine碎,水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油至揮發(fā)油提取器的揮發(fā)油不再增加,計(jì)表38倍量滲漉液大葉茜草素含量提取率揮發(fā)油得量,然后用同樣方法處理藥材,降低加水倍數(shù),所得揮發(fā)油量與25倍提取揮發(fā)油量比較,試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表大葉茜草素含量(mg)1113.0114241141.0表1加水倍數(shù)及時(shí)間對(duì)揮發(fā)油提取量影響試驗(yàn)結(jié)果大葉茜草素提取率(%)85.2提取時(shí)間(h25倍水10倍水6倍水干膏率(%)12.69注:藥材的大葉茜草素的含量為0.67%,200g藥材應(yīng)含1340mg大葉茜草素3.6從表3可以看出,茜草的滲漉工藝非常穩(wěn)定,大葉茜草素的提取34563.8率均在83%以上。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)我們確定茜草滲漉提取條件為:以70%乙醇為溶媒,浸泡時(shí)間24h,溶媒流速5mL/min(1000g),溶媒用量為粗粉量的8倍。結(jié)合前述試驗(yàn)結(jié)果,茜草滲漉的干膏率在由表1我們可以看出揮發(fā)油提取量隨著加水量的增加而增大,但12.66-12.8‰%。是加水10倍與加水25倍提取的揮發(fā)油的量相差很小,所以為了節(jié)約用2.3水煎工藝技術(shù)條件的研究水及能源,提取揮發(fā)油我們選擇加水倍數(shù)為10倍。由表可以看出揮發(fā)鼻淵片中,金銀花、野菊花、辛夷提取揮發(fā)油后的藥渣與蒼耳子油提取時(shí)間4h的得量為3.7mL,提取時(shí)間5h揮發(fā)油得量為3.8mL,提加水煎煮二次,每次3h,合并煎液,濾過(guò),濾液和蒸餾后的水溶液取時(shí)間增至h的揮發(fā)油得量為39mL,提取時(shí)間超過(guò)4h后,揮發(fā)油量合并,濃縮至相對(duì)密度1.10-1.20(80℃測(cè)),加乙醇使含乙醇量為就沒(méi)有眀顯的増加,所以確定揮發(fā)油提取時(shí)間4h。按確定的工藝提60%,攪拌,靜置,濾過(guò);沉淀用60%乙醇洗滌,洗液并人濾液中取一個(gè)處方的揮發(fā)油,三份,揮發(fā)油的量分別為3.72mL、3.73mL、原提取工藝中沒(méi)有加水倍數(shù),但是精制工藝比較詳細(xì),根據(jù)預(yù)試3.80mL,揮發(fā)油提取工藝比較穩(wěn)定。驗(yàn)得知按原工藝提取、精制出干膏率很小,所以我們以出膏量為指22茜草滲漉工藝的研究標(biāo),對(duì)加水倍數(shù)進(jìn)行了比較詳細(xì)的研究原滲漉工藝中,沒(méi)有溶媒用量及滲漉速度,根據(jù)茜草的性狀和生試驗(yàn)方法:取一個(gè)處方量的蒼耳子與一個(gè)處方提取揮發(fā)油后的金產(chǎn)實(shí)際情況,滲漉法提取莤草最主要考察的因素應(yīng)該是浸岀溶媒用銀花、野菊花、辛夷藥渣,由于水煎時(shí)間較長(zhǎng),所以我們?cè)O(shè)計(jì)毎次加量,其次為滲漉速度。根據(jù)中藥藥劑學(xué),我們知道滲漉法有比較成水15倍,水煎2次,每次3h,合并煎液,濾過(guò),濾液和蒸餾后的水溶熟的技術(shù)條件借鑒:可以根據(jù)藥粉的性狀,浸出溶媒用量一般為l液合并,濃縮至相對(duì)密度1.10-1.20(80℃測(cè)),加乙醇使含乙醇量為48(藥材粉末:浸岀溶媒),浸泡時(shí)間在24-48h,漉液流岀速度以60%,攪拌,靜置,濾過(guò),濾液回收乙醇,濃縮,80℃減壓干燥,得1000藥材計(jì)算,每分鐘流出速度為l-3mL或3-5mL。因?yàn)檐绮菟幉谋雀筛嘀亓?。逐漸降低加水量,同樣方法處理得干膏重量,與加水15倍較硬,所以我們選擇浸泡時(shí)間同原工藝為24h,溶媒流速選擇每分鐘量的浸膏重量相比較,結(jié)果見(jiàn)表4。mL(1000g);為了盡可能以少量的滲漉溶媒提取出較多的有效成表4不同加水倍數(shù)對(duì)出膏量的影響試驗(yàn)結(jié)果分,我們對(duì)滲漉溶媒用量做重點(diǎn)考察。加水倍數(shù)干膏量(g)干膏率(%)實(shí)驗(yàn)方法:將茜草藥材去雜,洗凈,于60℃干燥,粉碎,過(guò)10目107.1篩(預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明,藥粉過(guò)20目篩,滲漉液流動(dòng)不暢),準(zhǔn)確稱(chēng)量12茜草粗粉200g,將其放在有蓋容器內(nèi),再加入藥材粗粉量70%的乙醇98.7(70%乙醇)潤(rùn)濕后,密閉,放置2h,使藥材充分膨脹后分次裝入滲漉筒中,緩緩加入70%乙醇,加蓋放置24h后,讓漉液以毎分鐘lmL的速度從表4可以看出加水12倍與15倍所得千膏量相差很小,說(shuō)明當(dāng)加流出,滲漉液0-4倍、46倍、6-8倍分別接在不同的容器內(nèi)結(jié)果見(jiàn)水量達(dá)到一定程度時(shí),干膏量并不隨著加水量的增加而有較大的增表2不同倍滲漉液中大葉茜草素的含量測(cè)定結(jié)果Ⅲ,所以我們選擇加水倍數(shù)為12倍。滲漉液倍數(shù)大葉茜草素含量(mg)葉茜草素提取率(%)我們?nèi)∫粋€(gè)處方的水煎藥材,三份,驗(yàn)證水煎工藝,分別加水12倍,按工藝提取、精制,三份干膏得量分別為104.0g、110.8g14.3106.7g,結(jié)合表5試驗(yàn)結(jié)果,水煎工藝的出干膏量在104.0-10.8g,出干膏率在11.79%-12.56%088.881.33討論注:藥材的大葉茜草素的含量為0.67%,200g藥材應(yīng)含1340mg大確定的提取條件能夠充分提岀有效成分,茜草用η0%乙醇滲漉提葉茜草素取,滲漉液的量為藥材量8倍,茜草素提取率可達(dá)83%。辛夷、茜草、從表2看出,滲漉液為藥材量6倍時(shí),大葉茜草素提取率可達(dá)金銀花揮發(fā)油用10倍水蒸氣蒸餾,提取時(shí)間4h。水煎時(shí)間、次數(shù)采用76%;滲漉液為藥材量8倍時(shí),大葉茜草素提取率可達(dá)81%,所以,原工藝條件,10倍水提取我們采用滲漉溶媒的量為8倍。將部分0-8倍滲漉液回收乙醇、濃縮,參考文獻(xiàn)80℃減壓干燥,測(cè)定干膏率為12,6%[]衛(wèi)生部藥典委員會(huì)中國(guó)藥典(一部川M]北京:化學(xué)工業(yè)出版社,滲漉提取條件的驗(yàn)證:為了進(jìn)一步證明8倍滲漉液用量的可行性,我們又做了下列試驗(yàn):準(zhǔn)確稱(chēng)取茜草粗粉200g,按上述滲漉條(2]奚念朱藥劑學(xué)中國(guó)煤化工件:滲漉液量為8倍,浸泡時(shí)間24h,溶媒流速每分鐘1mL(同10009[3]楊云天然藥物HCNMHG北京中國(guó)中醫(yī)藥藥材5mL),按前述方法測(cè)定大葉茜草素的含量,然后將部分滲漉液出版社,2003收乙醇、濃縮、80℃減壓干燥,測(cè)定干膏率,結(jié)果見(jiàn)表3。[4]曹春林中藥藥劑學(xué)[M]J上海?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1986.