●1514●檢驗醫(yī)學與臨床2008年12月第5卷第24期Lab Med Clin,December 2008,Vol, 5,No. 24床旁分析技術吳曉勇,史俊敏(貴州省貴陽市第一人民醫(yī)院50002)[關鍵詞]床旁分析; 醫(yī)學檢驗: 質量管理中囝分類號:R446文獻標志碼:A文章編號:1672-9455<2008)24-1514-02床旁分析(POCT)是指在患者醫(yī)療現(xiàn)場進行的實時醫(yī)學表面,樣品中的分析物將與抗體結合,加人標記第二抗體。反檢驗([1。從早期的使用液體試劑在試管中反應,發(fā)展為塑料襯應可直接肉限觀察定性,也可用反射光度計定量檢測。蟄干試劑(尿干化學)和集高新技術(基因芯片)的反應系統(tǒng)。3.2 層析和液體循環(huán)裝置原理是 利用側向流動。溶劑(通該技術最早用于家庭或醫(yī)院患者在床旁監(jiān)測尿糖和血糖水平.常是樣品)流過含有標記抗體的多孔基質之后,進人固定第二隨著新技術的發(fā)展,POCT使用更為便捷,范圍更廣,可監(jiān)測血抗體的區(qū)域產生顏色反應,用反射光度計定量檢測。例如衣原凝狀態(tài)、心肌損害酸堿平衡、感染性疾病、藥物濃度、內分泌體、藥物、毒物、心肌標志物等。另一種利用免疫層析原理不用等?，F(xiàn)已由臨床檢驗擴展到食品衛(wèi)生、環(huán)境和法醫(yī)等。儀器達到定量。例如膽固醇測定:將血液樣加到多孔基質-1 P0CT基本技術端.滲人含有酶標記物的溶劑貯存池，通過毛細作用樣品和標POCT的儀器要求方便、準確、安全、快捷。可獨立的.一記物流向固定抗體的反應區(qū)發(fā)生反應.樣品中分析物濃度越次性檢測裝置,連接溫度檢測器、混合器、光吸收器、熒光檢測高,反應面積和呈色帶越長、越深。器時,既可實現(xiàn)定量又可進行數(shù)據(jù)處理貯存.如曲線校正.質控生物傳感技術分析結果保存等(2)。生物傳感器含有一個生物識別分子(酶、細胞、組織抗體、1.1 POCT設備簡易的試紙條.手掌式讀數(shù)檢測器、全自動抗原、蛋白質,DNA等)和一個傳導裝置。常規(guī)應用的兩個識多通道式檢測器.別分子是酶和抗體或被檢抗體檢測的抗原,傳導裝置是利用電1.2 POCT材料 單層或多層材料裝置.化學和光化學原理設計而成。例如將e知抗體標記在一個反1.2.1單層原理將被檢樣品滴在層析紙上,利用層析紙的射物表面構成光柵,樣品中的抗原被捕獲后將改變折光方式和特殊性質,血液將均勻分布,待檢成分與預先浸漬在層析紙上反射光的顏色,通過光學檢測器而達到定量的目的。另一項技的試劑產生顏色反應,有色產物通過與標準色板比較而定量。術是在波導表面產生瞬時光,以激發(fā)熒光的產生。波導構成反例如尿液中的葡萄糖在試紙中葡糖萄氧化酶的催化下,生成葡應室的一面;其比固有捕獲抗體,標記有熒光的“二抗”沉積于萄糖酸內酯和過氧化氫。在過氧化物酶的催化下,過氧化氫使另一面或置于反應室中,樣品加人后,標記“二”抗被溶解下來，色素原(鄰甲聯(lián)苯胺、碘化鉀)氧化而呈色。被測物與固化的抗體及標記二抗形成“夾心"。瞬時波只激發(fā)1.2.2 多層材料 多層的分類:第一種多層試劑由高分子膠 波導表面的熒光分子,檢測熒光強度可定量被測物濃度。片組成,上層是擴散層也是反射層,由醋酸纖維獻和二氧化鈦5 POCT的質量管理(TiO2)色素組成。使反應按順序進行,直至終點互不干擾。臨床實驗室為了獲取正確的檢驗結果,要求正確的從患者在膜的底層檢測反射光的強度監(jiān)測顏色的變化來定量。第二身上、在適當時間采取正確的標本,使用恰當?shù)姆治龇椒?合理種多層試劑由血液分離層和反應層構成，血液樣品經過血漿分的費用,最后獲得可靠的檢驗結果。由于POCT方便、快速，離層時,紅細胞被過濾掉，上血漿進人玻璃纖維構成的貯存池操作容易,可由非檢驗人員操作,不必在正規(guī)的實驗室進行,質與各種試劑反應,該設計避免了樣品的制備。量控制難于保證。因此●必須加強POCT的質量管理。POCT2電化學檢測裝置的使用必須堅持與合格實驗室實踐的標準,開展室內質控、質電化學終點檢測法是當今POCT技術的新進展，以血糖量保證、能力比對和記錄.校正記錄。檢測為例,使用葡萄糖氧化酶和鐵氰酸鹽反應系統(tǒng),檢測條有5.1室內質控(IQC)IQC是控制檢驗性能的重復性或精密10個測定點,將其安裝于檢測器中,通過敏感電極檢測氰鐵酸度,保證系列結果的一致性,實時評價檢驗性能是否符合規(guī)定鹽的還原產物而定量葡萄糖濃度。該裝置叮小到類似于鋼筆,要求,是否建立在可接收范圍內。在分析前.分析中分析一定也有手掌式檢測器。的質控物濃度,可以確認分析過程和操作是否正確。均值標非儀器定量檢測條,不需要特殊檢測器,但可通過呈色的準差質控最常用的質控方法，是以生化室內質控圖的制作為大小、顏色的深淺而定量。例如膽固醇測定:試劑和樣品通過例。用單一濃度未定質血清反復測定20次(批間、日間),計算層析條中含膽固醇脂和氧化酶的區(qū)城,產生過氧化氫反應,該均值()、警告線(工士2s)和失控線(士3s)。用同批號的質控物進入含有辣根的過氧化物酶和MBTH/DMA的檢測區(qū),產血清,隨患者標本分析,結果點在圖上,直線連接。生顏色變化。呈色的大小深淺與含量呈正比。葡萄糖測定:葡5.2-警告一個結果超出靶萄糖分析系統(tǒng)含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶指示劑染料和.值的中國煤化工超出靶值的3倍標準葡萄糖氧化酶抑制劑。抑制劑濃度是建立在每- -分析區(qū)臨界差。 2fHCNMHG向超出靶值的2倍標值濃度值域上。顏色的變化區(qū)城數(shù)取決于分析物濃度。準差。R.行動表示2個連續(xù)結差異超出4倍標準差。4.行動3免疫分析裝置表示4個連續(xù)結果在同- - 方向超出靶值的1倍標準差。102。3.1 流動式裝置其原理是將第- -抗體共價結合在多孔基質行動表示10個連續(xù)結果在同一側。該規(guī)則要求每天做2次質檢驗醫(yī)學與臨床2008年12月第5卷第24期L.ab Med ClinDecember 2008,Vol. 5.No. 24●1515●控分析。對于POCT質控,要求操作者在分析時作一次質控安全、鍵康要求,如樣品和消耗品的處置;(10)開展POCT的分析。不需儀器分析的由制造商提供陰性、陽性對照。利弊。培訓后,經專門的相關組織考核,發(fā)給認可或合格證書，5.3窒間質量評價(EQA) EQA 是能力比對試驗,是比較不并定期接受檢查和再培訓。同檢驗點的試驗性能。參與實驗室在同- -時間 、對同- -樣品進6.7 國內外對于 POCT應用的管理方法(門(1)美 國的管理行分析,將分析結果回報給組織者。組織者對回報結果進行分辦法 :按照美國法規(guī),開設任何一個POCT點都必須接受政府析,相互與靶值進行比較分析。對每一個參與者的結果作出評有關部門審核,有人員培調訓計劃、認可證書、有對檢驗科所要求價。EQA評價實驗的實驗性能，而對患者樣品的檢驗結果的 的所有制度,有質量保證、質量控制措施,有各項文檔記錄,以質黛控制則依賴于IQC, POCT 開展EQA難度較大，及有和檢驗科結果的比對和工作協(xié)調的程序性文件和記錄。5.4 質量保證 開展臨床實驗室所要求的質控活動。要求 經審核批準后,在規(guī)定時間內開展有關項目,期間還必須參加POCT儀器穩(wěn)定方法準確可靠、耐用、操作方便。人員培訓簡政府指定的室間調耷評價,隨時接受政府有關部門的質量評單、易使用者接受。維護保養(yǎng)、試劑保存方便。估,不合格者將取消其開展資格。POCT的所有活動計劃都必6 POCT 應用指南0]須服從美國病理家學會的實驗室認可標準要求,POCT的所有開展POCT的主要原因是縮矩檢驗時間?；颊叩氖芤媸菣z查項 月都須經過認可。認可內容包括能力比對、質氧控制和縮短住院時間.檢查方便。醫(yī)院受益是節(jié)省支持性耗材。質量改善、標本處理試劑、校正和標準物及過程、儀器設備、人6.1 問題分析 檢驗項目少,操作人員缺乏正規(guī)的培訓,工作 員素質和職責.實驗室安全等。(2)英國的管理辦法:POCT檢環(huán)境不- .定符合分析要求。驗也需要通過英國皇家病理學會的認可,其認可標準包括組織6.2 生物安全問題 生物安全保障困難.管理、人員和指南、設施和設備、政策和策略、人員發(fā)展及教育6.3效益分析哪些患者需要效 益分析,現(xiàn)在實驗室服務存5個方面。在什么樣的問題.實驗室的檢驗費用與POCT比較差異是否POCT是臨床實踐的一部分。從商業(yè)上講,它有幾十億美較大,實施POCT人員能否標準操作，提供準確.可靠的檢驗元的市場。高精技術的應用及操作指南的管理體系的逐步健結果,患者是否接受,是否有適合的儀器.便于保存的試劑和消全,使POCT的應用前景廣泛,但真正效益還并非明確,盡管耗品。最重要的問題是使用POCT臨床受益什么?患者受益它的使用極 大縮短了檢驗結果回報時間( turn around time,什么?是否能提高醫(yī)療服務水平?TAT),但對死亡率、住院率、住院時間的改善并不明顯。因6.4 性能分析POCT的服務文持與實驗室檢驗有很大的不 此,關于POCT的有效性還有待進一步研究。由于醫(yī)生對快同,如技術、裝備、人員素質、實驗條件、質量保證體系等。速診斷的要求(特別是 在加強病房、急診室),患者作自我臨測POCT的性能評價包括儀器的技術性能、人員素質、結果分析的需要,以及新 技術的整合,使得POCT的發(fā)展勢頭必將繼續(xù)判斷解釋、標本的采集管理、生物安全措施.檢驗結果的可靠下去。性、結果的記錄等。6.5 設備的選型 需要用于哪些項目的檢驗?要求的準確性參考文獻和精確性.檢驗周期是多少?常規(guī)分析量是多少?要求的環(huán)境1 陶 義訓.對POCT的認識[J].上海醫(yī)學檢驗雜志,999,14條件、消耗品的貯存條件.維護保養(yǎng)條件,體積大小,儀器使用(3);3. .的難易程度,安全支持條件.檢驗結果與專業(yè)實驗室結果是否2叢玉隆.當代檢驗分析技術與臨床[M].北京:中國科技出-致。版社,2002.368.6.6 人員培訓為保證POCT的檢驗質量,有必要對使用者3彭黎明.檢驗醫(yī)學自動化及臨床應用[M].北京:人民衛(wèi)生進行培訓。培訓內容包括分析前、分析中和分析后的全過程，出版社,2000. 14.具體內容為:(1)檢驗.臨床、病理生理的基本知識;(2)標本類4 Hadson MP. Cavdiac mauvestpoint of care tesing[J]. Clin型、采樣時間要求.生理變化、藥物影響等;(3)標本采集技術;chim Acta,2999 ,4(2) :32-37.(4)分析儀器及試劑準備;(5)試驗操作;(6)質量控制和質控分析.解釋;(7)結果記錄、報告和保存;(8)結果解釋及咨詢;(9)(收藊8期:2008-06-30)(上接第15f1頁)3米洪元,楊健.SCRP在AOPP中的價值[J].中華臨床醫(yī)藥雜志,2002 ,3(22) :68.參考文獻.4楊健.外周血WBC增多與臨床[J].醫(yī)師進修雜志,1990,131楊健,陳高紅. C-反應蛋白的臨床應用近況[J].重慶醫(yī)藥，(4) :29-31.1992 ,21(2):123-125.2黃維周,徐勉珍,諶輝,等. C反應蛋白在感染性疾病中的臨中國煤化工(稿日期200807-03)床研究[J].中華內科雜志,1993,32(1) :55-56.MHCNMHG