安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)Joumal of Anhui Agri.209,37(9)4110-4111責(zé)任編輯張楊林責(zé)任校對(duì)況玲玲黃芪的乙醇提取工藝優(yōu)化研究昝麗霞(陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院,陜西漢中2001摘【目的]優(yōu)選黃芪的最佳乙醇提取工藝?！痉椒╙采用正交試驗(yàn)法,以干膏收率、黃芪甲含量、總黃含量為指標(biāo),對(duì)影響黃芪中有效成分提取的因素進(jìn)行考察。[結(jié)果]黃芪有效成分最佳提取工藝條件為70%乙醇濃度,溫度70℃,料液比1:12,提取3h。在該工藝條件下,測(cè)得干青得率為25%左右,黃芪甲含量超過(guò)3%,總黃酮含量在0.8%左右。[結(jié)論優(yōu)選出的黃芪乙醇提取工藝科學(xué)經(jīng)濟(jì),可有效節(jié)約資源,用于工業(yè)生產(chǎn)關(guān)鍵詞黃芪甲;總黃酮正交試驗(yàn);綜合評(píng)分中圖分類號(hào)R917文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)01-661(209-0410-0 Study on the Optimization of Ethanol Extraction Techniques for Radix astragali liquid ratio of 1: 12 and extraction time of 3 h. Under these technology co the extract yield was about 25%, the astragaloside content was more than 3% and total flavone content was about 0.8%. Conclusion] The optimal technokogy for the ethanol extraction of R. astragali was scientific and e- Key words soures and instruet the industrial practice effectively adir astragali黃芪( Radixa stragali)為豆科植物膜黃芪 Astragalus1.2.4樣品中黃芪甲苷含量的測(cè)定。稱取黃芪甲苷對(duì)照品 mebrananceusfich.)Bee.和蒙古黃. mongholiaus(.)2mg,用無(wú)水乙醇定容至10ml量瓶中搖勻分別精密吸取 Hsiao.的干燥根,主要分布于我國(guó)西北、華北和東北等地區(qū),對(duì)照品溶液0、0.6、0.8、1.01.2、1.4、1.6m于量瓶中,水浴加具有補(bǔ)氣固表、脫毒排膿、生肌、利尿的功效。筆者采用乙醇熱揮去溶劑各加入0.20ml濃度5%香草醛冰醋酸溶液和提取正交試驗(yàn)法,以干膏收率、黃芪甲苷和總黃酮含量為指0.80m高氯酸,密塞,于70℃水浴恒溫加熱20min,取出后立標(biāo),采用綜合評(píng)分法對(duì)黃芪的乙醇提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。即用流水冷卻,加冰醋酸5m搖勻,顯色。用未加對(duì)照品的1材料與方法溶液作空白對(duì)照,在540mm處測(cè)定,制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.1材料T-1221型外分光光度計(jì)(北京惠譜通用儀器參考文獻(xiàn)[2]對(duì)黃芪樣品中甲苷進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)回歸方公司),WD800G型微波爐(佛山市順德微波爐電器有限公程計(jì)算結(jié)果司),KS-120E型超聲波清洗機(jī)(寧波生科儀器廠),SHH41-1.2.5樣品中總黃酮含量的測(cè)定。稱取在120℃燥至恒420型恒溫水浴鍋(河北省黃驊市航天儀器廠),2004n型重的蘆丁對(duì)照品10mg,置50m量瓶中加甲醇定容至刻度,電子天平(上海天平儀器廠)。中藥黃芪(購(gòu)自陜西漢中藥材搖勻吸取該溶液01、2、3、4、5ml分別置于25ml量瓶中加公司),黃芪甲苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,標(biāo)號(hào)濃度5%aNO21ml,依次每隔6min加濃度10%l(O3)3107812丁標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)080-20中國(guó)藥品生物制品ml,度4%NaOH10ml最后各用水稀釋至刻度,搖勻放置15檢定所),試劑均為分析純。min,用第1瓶作空白,在500mm處測(cè)吸收度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.2方法參考文獻(xiàn)[3]對(duì)黃芪樣品中總黃酮進(jìn)行測(cè)定,根據(jù)回歸1.2.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選擇料液比、提取溫度、提取時(shí)間、方程計(jì)算結(jié)果乙醇提取溶劑濃度為考察因素,每因素各取3個(gè)水平,選用2結(jié)果與分析L(3)正交表進(jìn)行試驗(yàn)以干青收率黃芪甲苷含量及黃酮含2.1千收率試驗(yàn)結(jié)果由表1可知,3號(hào)試驗(yàn),即乙醇提量為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用綜合評(píng)分法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析(其權(quán)重系數(shù)取濃度70%,料液比1:2,提取溫度70℃條件下提取4h所分別為0.1、0.5、0.4)。得干膏收率最高,為27.13%。1.2.2樣品溶液的制備。稱取9份黃芪藥材粉末(過(guò)40目2.2黃芪中甲苷含量的測(cè)定結(jié)果篩),每份10g,按正交表各列號(hào)項(xiàng)下條件分別進(jìn)行提取,過(guò)221標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果。以吸收度值A(chǔ)為縱坐標(biāo)黃芪濾,濾液合并,離心,取上清液,減壓濃縮至無(wú)醇味,加水定甲苷量C(ug)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸得方程:a=487.805C于100ml量瓶中,備用。-7.317,0.99(n6)表明黃芪甲苷在120-320g1.2.3干膏收率試驗(yàn)。量取9份樣品溶液各50ml,置干范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴蒸干,殘?jiān)?05℃干燥3h取2.2.2含量測(cè)定結(jié)果。由表1可知2號(hào)試驗(yàn)即乙醇提取出,置干燥器中放置30min后迅速稱重,計(jì)算。濃度70%,料液比1:10,提取溫度60℃條件下提取3h測(cè)得甲苷含量最高,為3.41%基金項(xiàng)目陜西省教育廳專項(xiàng)科研計(jì)劃項(xiàng)目(06JK329)陜西理工學(xué)院2.3黃芪中黃酮含量的測(cè)定結(jié)果專項(xiàng)科研基金項(xiàng)目(SLGQD514)助作者簡(jiǎn)介麗(197-)女陜西韓城人,士,講師,從事天然藥2.31標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果。以吸收度(作縱坐標(biāo)蘆丁濃物有效成分研究。度(X)作橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程:=0.4995X+收稿日期2009-01-150.0023,r=0.9999(n=5)。結(jié)果表明,面積與濃度呈良好37卷9期麗霞黃芙的乙醇提取工藝優(yōu)化研究4111的線性關(guān)系。濃度70%,料液比1:12,提取溫度70℃條件下提取4h,測(cè)得2.3.2含量測(cè)定結(jié)果。由表1可知,3號(hào)試驗(yàn),即乙醇提取黃酮含量最高,為0.93%表1正交試驗(yàn)方案及結(jié)果 Tible 1 The scheme and results of orthogonel test試驗(yàn)號(hào)提取濃度因素 Fadtars料液比提取時(shí)間評(píng)價(jià)指標(biāo) Evaluation indice綜合評(píng)分A∥% B//g/'ml//h提取溫度干青得率%黃芪甲苷含量%黃酮含量∥% Symthetic Exrection concertration Solid-liquid ratio Extraction time Extrction terrperature yield cortert merk1:824.053.180.3191.411:100026.103.410.539.481:1243427.133.370.9399.301:817.053.000.297.92801:1017.503.040.5879.2981:126020.623.130.8685.48901:846010.802.180.2554.28901:1027015.602.580.5868.40901:1235019.072.780.767.029.8312.736853.16注:千膏收率評(píng)分=干膏收率/最大千青收率0.1×100:黃芪甲含量評(píng)分=黃芪甲苷含量/最大黃芪甲苷含量0.5×100總黃酮含量評(píng)分總黃酮含量/最大黃酮含量×0.4×100綜合評(píng)分=千膏收率評(píng)分+黃芪甲含量評(píng)分+總黃酮含量評(píng)分。最優(yōu)水平為ABCD Note: The extract yield mark extract yield menimum extract yield x0.I x 100; Astragalcside content mark sstragaloside content/ marinam antragaloaide con- tent x0. 5x 100 Total flavane corteart mark total flavone cortent mecimum total flavone content x 0.4 x 100: Syuthetical mark= exdract yield mark+ astragaloside content mark+ total flarvone content murk. The optimuan level is A. B,C D3.2.4因素影響分析結(jié)果表1表明乙醇提取試驗(yàn)中根據(jù)率最高。在通常情況下,人們認(rèn)為提取時(shí)間越長(zhǎng),有效成分極差大小得出各因素作用主次為A>B>C>D,提取濃度提出率越高。該試驗(yàn)結(jié)果顯示,長(zhǎng)時(shí)間高溫條件將會(huì)使黃>料液比提取時(shí)間提取溫度;最佳工藝組合為芪甲分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使其喪失生物活性。因此ABC2D3,即乙醇提取濃度70%,料液比1:12提取溫度70℃降低提取溫度對(duì)保持甲苷提取物活性具有重要意義熱浸法的條件下提取3h。方差分析結(jié)果表明提取濃度對(duì)提取效果更好地保持了甲的活性,使甲苷提取率有所提高。的影響有顯著意義,其他3因素的影響無(wú)顯著意義。(2)黃芪中甲苷和黃酮均為黃芪的有效成分。該試驗(yàn)采2.5驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果為驗(yàn)證上述優(yōu)選的微波提取工藝最佳用正交設(shè)計(jì),以黃芪中黃芪甲苷和總黃酮2種成分的含量作條件的穩(wěn)定性,稱取20g黃芪3份,分別按所確定的最佳條為優(yōu)選正交方案的指標(biāo)進(jìn)行考察以綜合評(píng)分值優(yōu)選黃芪熱件進(jìn)行提取,測(cè)得結(jié)果見(jiàn)表2。浸提的工藝,以節(jié)約藥品用量,降低能量得到最大產(chǎn)率為原表2驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果則,重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,優(yōu)選出的工藝科學(xué)、經(jīng)濟(jì),可用于指 Ible 2 The results odf validation test%導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)。黃芪藥材粗粉∥g膏黃芪甲總黃參考文獻(xiàn) rude powder from得含量含量1]羅毅劉剛周本宏等綜合評(píng)分法優(yōu)選黃芪的水煎提工藝中國(guó) astragall medicine yield contert content[2]姚麗娜林政義,陳芳不同種類黃芪的皂苷含量比較準(zhǔn)海醫(yī)藥,25.863.410.7525.233.203陳水城,李寶,張健等蘆廠提取工藝改進(jìn)的研究門(mén)中醫(yī)藥學(xué)2024.363.030.81200211114]歐陽(yáng)臻常鈺,李永輝,等桑葉多的提取純化及其含量測(cè)定[]時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥20010)1403結(jié)論與討論(1)試驗(yàn)結(jié)果表明,熱浸法提取黃芪中甲苷和黃酮的效(上接第4059頁(yè))[6]劉寶華張所劍,等乳腺成體干細(xì)胞體內(nèi)及體外特性的實(shí)驗(yàn)研究 igmeis Bid C.200246):35081-35087.]中國(guó)老年學(xué)雜志2007,27(5):447-49 [3] KENNEY N J. 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