新型產(chǎn)乙醇重組菌利用葡萄糖和木糖的乙醇發(fā)酵
- 期刊名字:食品與發(fā)酵工業(yè)
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- 論文作者:孫金鳳,王正祥
- 作者單位:淮陰工學(xué)院,江南大學(xué)
- 更新時(shí)間:2020-06-12
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生產(chǎn)與科研經(jīng)臉新型產(chǎn)乙醇重組菌利用葡萄糖和木糖的乙醇發(fā)酵孫金鳳1,王正祥21(淮陰工學(xué)院生命科學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院,江蘇淮安,2230012(江南大學(xué),生物工程學(xué)院,江蘇無錫,214036)摘要對構(gòu)建得到的新型產(chǎn)乙醇重組菌JM109( pEtac-PA)、947( pEtac-PA)利用不同濃度葡萄糖或木糖的乙醇發(fā)薩進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明,重組菌的乙醇發(fā)酵受到發(fā)酵碳源的類型、發(fā)酵液中糖濃度、發(fā)酵培養(yǎng)基的裝液量、發(fā)酵液的pH值、重組菌的宿主類型等多種因素的影響,以野生型菌株E.coli947為宿主的重組菌947( pEtac-PA)發(fā)酵產(chǎn)乙醇的能力和乙醇得率均高于JM109( pEtac- PA),尤其是在裝液量加大、高濃度糖發(fā)酵以及利用木糖發(fā)酵時(shí)更加明顯關(guān)鍵詞產(chǎn)乙醇重組菌,乙醇發(fā)酵,葡萄糖,木糖從2001年起我國開始進(jìn)行乙醇汽油推廣使用計(jì)1.1.1酋株與質(zhì)粒劃試點(diǎn),并已獲得初步成功。2006年5月,國家發(fā)改重組質(zhì)粒 pEtac-PA、E. coli JM09、野生型菌委計(jì)劃在原有的9個(gè)試點(diǎn)省基礎(chǔ)上將北京上海天株E,coli9471由江南大學(xué)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保津等中心城市納入下一步推廣范圍。若以全國汽油存。以重組質(zhì)粒 pEtac-PA轉(zhuǎn)化E. coli jM109及野年消費(fèi)量5000萬t計(jì)算按照我國的國家標(biāo)準(zhǔn),乙生型菌株E.coli947,在含有卡那霉素(Kan)的LB醇汽油中燃料乙醇占10%則需燃料乙醇500萬t平板上篩選陽性轉(zhuǎn)化子(實(shí)驗(yàn)操作參照文獻(xiàn)進(jìn)行),而實(shí)際上2005年我國的石油消費(fèi)已經(jīng)達(dá)到32億得到重組菌JM109 pEtac-PA)、947( pEtac- PA)t),要消化糧食1000多萬t。有不少專家擔(dān)心,如果1.1.2培養(yǎng)基大規(guī)模用糧食生產(chǎn)燃料乙醇可能會影響我國糧食安發(fā)酵培養(yǎng)基釆用含有不同濃度葡萄糖、木糖或葡萄糖和木糖混合糖的LB培養(yǎng)基(重組菌的培養(yǎng)基中因此大規(guī)模的燃料乙醇生產(chǎn)要求開發(fā)豐富廉價(jià)添加Kan,終濃度為501g/mL),pH7.0左右。培的替代性原料自然界中最豐富的碳水化合物木質(zhì)纖養(yǎng)基中添加CaCO3時(shí),添加的質(zhì)量濃度為0.5%維素便是一種很好的替代性資源。利用木質(zhì)纖維素1.2方法原料生產(chǎn)乙醇實(shí)現(xiàn)商業(yè)化的主要技術(shù)難題在于開發(fā)1.2.1乙醇發(fā)酵試驗(yàn)合適的菌種。傳統(tǒng)的乙醇發(fā)酵工業(yè)所采用的酵母菌1.2.1.1三角瓶發(fā)酵和運(yùn)動發(fā)酵單胞菌都不能發(fā)酵木糖或阿拉伯糖。自250mL三角瓶中裝液量分別為20、100mL。挑然界的一些細(xì)菌雖能發(fā)酵五碳糖,但是其發(fā)酵產(chǎn)物中取相應(yīng)菌株的單菌落接種于LB培養(yǎng)基中(重組菌的乙醇僅占很小的比例。人們通過代謝工程的手段構(gòu)培養(yǎng)基中添加Kan),37℃,200r/min振蕩培養(yǎng)過夜建能發(fā)酵六碳糖和五碳糖的產(chǎn)乙醇優(yōu)良重組菌使之作為種子液,接種量為2%。接種后37℃、200r/min能夠發(fā)酵葡萄糖、木糖或者阿拉伯糖產(chǎn)生酒精振蕩培養(yǎng)過夜,然后靜止發(fā)酵。采用IPTG誘導(dǎo)時(shí)利用前期研究中構(gòu)建得到的重組質(zhì)粒 PEtac IPTG添加量為100gk/mL,在振蕩培養(yǎng)后期加入,誘PA轉(zhuǎn)化 Escherichia coli JM109及前期研究中篩選得到的野生型菌株E.coli947得到新型產(chǎn)乙醇導(dǎo)2h重組菌JM09( pEtac-PA)、947( pEtac-PA,本文對12125L發(fā)酵罐發(fā)酵重組菌的乙醇發(fā)酵進(jìn)行了初步研究。采用KF-5L發(fā)酵罐(韓國發(fā)酵機(jī)株式會社)對重組菌947-( pEtac-PA)的乙醇發(fā)酵進(jìn)行初步放大試1材料與方法驗(yàn),培養(yǎng)基裝液量為3L,接種量為2%添加0.5%CaCO3,發(fā)酵溫度37℃。接種后先通無菌空氣并攪1.1材料拌(轉(zhuǎn)in以增加溶氯便于菌體的大量增第一作者:碩士,副教授殖,然中國煤化工教育部骨干教師資助項(xiàng)目(No.1696)2.CNMHG收稿日期:2006-10-18采用氣相色譜法(1490氣相色譜儀,安捷倫科技208年第34卷第5則(總第245)105食品與發(fā)酵工業(yè) FCOD AND FERMENTATION INDUSTRIES上海分析儀器有限公司)測定,色譜參數(shù)為:進(jìn)樣溫度的乙醇發(fā)酵200℃,檢測溫度200℃,柱溫140℃。2m不銹鋼柱2.1.1裝液量為20mL時(shí),重組菌JM109( pEtac-(內(nèi)徑3mm),采用滬產(chǎn)401白色有機(jī)擔(dān)體。載氣PA)利用5%葡萄糖的乙醇發(fā)酵(N2)壓力0.2MPa,H2壓力0.10MPa,空氣0.2同樣條件下對重組菌JM109 pEtac-PA)及其宿主菌E. coli jM109(作為對照)的乙醇發(fā)酵進(jìn)行了研1.2.3pH值測定究。如圖1所示,重組菌JM09( pEtac- PA)的耗糖采用320SpH計(jì)( METTLER TOLEDO公主要發(fā)生在發(fā)酵前期的24~36h,耗糖的同時(shí)伴隨司)測定。著乙醇產(chǎn)量的增加。發(fā)酵初期菌體大量增殖,重組菌1.2.4糖濃度測定JM109( pEtac- PA)最終達(dá)到的菌體濃度(OD0m=葡萄糖濃度測定采用SBA生物傳感分析儀(山6.734)明顯大于宿主菌E. coli jm109(ODom=4.東省科學(xué)院生物研究所)測定。木糖濃度測定采用苔0)。發(fā)酵前期發(fā)酵液的pH值顯著下降,到發(fā)酵后期黑酚法。基本保持穩(wěn)定,說明酸的產(chǎn)生集中在發(fā)酵前期,可能1.2.5細(xì)胞密度測定是由于發(fā)酵初期菌體大量生長增殖,需要消耗大量氧在600nm波長下進(jìn)行光電比濁測定,用吸光度氣,造成供氧不足,糖代謝的產(chǎn)物中就會有較多酸產(chǎn)值ODo大小表示細(xì)胞密度的高低生(。在發(fā)酵液中添加CaCO3可以部分中和發(fā)酵過2結(jié)果與分析程產(chǎn)生的酸,維持發(fā)酵液較高的pH值(始終在p以上)(圖1A)。2.1量組菌JM109( pEtac-PA)利用葡萄糖和木糖一葡萄糖濃度值細(xì)胞密度葡暫濃度(%)乙醇濃度隔細(xì)胞密度pH值(加aC)乙醉濃度(%)◎-葡萄糖濃度(加CxCO)乙醇濃度(加CaCO)發(fā)酵時(shí)間/h發(fā)時(shí)間/hB)EoodJMI09圖1重組菌JM09( pEtac- PA)及其宿主菌 E coli JN109乙醇發(fā)酵過程乙醇濃度、pH值葡萄糖濃度及細(xì)胞密度(以O(shè)Dm表示)的變化宿主菌E. coli jM109發(fā)酵5%葡萄糖僅能產(chǎn)生下降較小,乙醇產(chǎn)率高,極微量的乙醇(0.04%乙醇濃度為體積分?jǐn)?shù),下同),2.1.2裝液量為20mL時(shí),JM109( pEtac-PA)利用如圖1B;而重組菌JM109( pEtac-PA)發(fā)酵5%葡萄5%木糖的乙醇發(fā)酵糖48h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率,為1.89%顯著高于其宿為了確定重組菌JMl09( pEtac-PA)的乙醇發(fā)酵主菌證明該重組菌中成功引入了乙醇生物合成途是否受到IPTG誘導(dǎo)作用的影響,在進(jìn)行5%木糖的徑。若在發(fā)酵液中添加CaCO3,重組菌發(fā)酵24h左乙醇發(fā)酵試驗(yàn)時(shí)對于IPTG誘導(dǎo)和不誘導(dǎo)條件下的右即可達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率1.92%,為理論轉(zhuǎn)化率(1乙醇發(fā)酵結(jié)果進(jìn)行了比較。添加IPTG誘導(dǎo)時(shí)g葡萄糖可產(chǎn)生0.51g乙醇)的59.5%。CaCO3的JM109( pEtac-PA)利用5%木糖發(fā)酵36h達(dá)到最大添加使得發(fā)酵時(shí)間顯著縮短,可能是由于加入的Ca乙醇產(chǎn)率(僅為0.35%),殘留的木糖為3.25%;而同CO3部分中和了發(fā)酵產(chǎn)生的酸使得發(fā)酵液pH值相樣條件下不加誘導(dǎo)物IPTG時(shí)發(fā)酵36h達(dá)到最大對穩(wěn)定,對菌體生長有利菌體濃度高則產(chǎn)乙醇能力乙醇產(chǎn)率為1.78%,為理論產(chǎn)率的55.2%。結(jié)果表大明,添加PTG誘導(dǎo)pd、adhB基因的表達(dá),乙醇產(chǎn)對照乙醇發(fā)酵過程菌體濃度、乙醇產(chǎn)率、pH值率反中國煤化工明了pd、adhB基及殘?zhí)堑淖兓梢园l(fā)現(xiàn),JM09( pEtac-PA)比其宿主因的CNMHG的產(chǎn)生,與以前的研菌E. coli jM109的最終菌體濃度大,殘?zhí)堑?pH值究結(jié)果一致(.因此在進(jìn)一步的發(fā)酵試驗(yàn)中不添加No.5(Toa|245)產(chǎn)與科研經(jīng)驗(yàn)IPTG誘導(dǎo)。0.21%,殘留木糖3.21%(圖2C)。發(fā)酵10%葡萄糖21.3裝液量為100mnL時(shí),M109( pEtac-PA)利用36h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率3.4%,殘?zhí)菫?.6%(圖葡萄糖和木糖的乙醇發(fā)酵2D)。結(jié)果同樣表明,乙醇發(fā)酵時(shí)重組菌優(yōu)先利用了裝液量為100mL時(shí),JM109( pEtac-PA)發(fā)酵混合糖中的葡萄糖5%葡萄糖48h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率(為0.825%),殘2.2.2裝液量為100mL時(shí),947( pEtac-PA)利用葡糖2.9%。發(fā)酵5%木糖48h時(shí)達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率萄糖和木糖的酒精發(fā)酵(為0.7%),殘?zhí)菫?.12%。利用5%葡萄糖和5%裝液量為100mL時(shí),947( pEtac-PA)利用5%葡木糖的混合糖發(fā)酵48h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率為萄糖發(fā)酵36h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率2.83%,殘?zhí)菫?.764%殘留的葡萄糖和木糖分別為3%和4.44%.0.2%。發(fā)酵5%木糖36h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率為發(fā)酵10%葡萄糖,36h時(shí)乙醇產(chǎn)率僅為0.918%殘2.22%,殘?zhí)菫?.6%。發(fā)酵5%葡萄糖和5%木糖糖為7.65%;發(fā)酵48h時(shí)殘?zhí)侨愿哌_(dá)7.35%的混合糖36h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率為243%殘留的由以上結(jié)果可以看出,利用葡萄糖和木糖混合糖葡萄糖和木糖分別為0.83%、4.15%。發(fā)酵10%葡的乙醇發(fā)酵過程中重組菌優(yōu)先利用了混合糖中的葡萄糖48h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率為3.12%,殘?zhí)菫?萄糖。有資料報(bào)道,戊糖發(fā)酵微生物會優(yōu)先利用己糖7%。結(jié)果表明裝液量加大時(shí)947( pEtac-PA)的乙和戊糖混合物中的己糖因此如果發(fā)酵時(shí)間不足,則醇發(fā)酵結(jié)果與裝液量為20mL時(shí)差別不太大。乙醇戊糖會有殘留。試驗(yàn)結(jié)果與資料報(bào)道一致。在裝發(fā)酵結(jié)果均好于同樣條件下JM109( pEtac- PA)的乙液量加大為100mL時(shí)乙醇產(chǎn)率降低,殘?zhí)禽^高,這醇發(fā)酵。這可能是由于野生型菌株生長速度快,可以可能是由于裝液量加大后溶氧效果差,導(dǎo)致菌體量不達(dá)到較大的菌體濃度。另外,發(fā)酵培養(yǎng)基中糖濃度升足而影響乙醇的產(chǎn)率。此外,發(fā)酵培養(yǎng)基的糖濃度升高時(shí)殘?zhí)且草^高,乙醇得率降低,說明由野生型宿主高,發(fā)酵產(chǎn)乙醇的產(chǎn)率降低,殘?zhí)歉哌@可能是由于細(xì)菌構(gòu)建得到的產(chǎn)乙醇重組菌的乙醇發(fā)酵同樣受到高菌耐受高滲透壓環(huán)境的能力比傳統(tǒng)的酒精發(fā)酵酵母濃度糖的抑制。弱,高濃度糖所造成的高滲透壓環(huán)境對細(xì)菌的生長不2.2.3重組菌947( pEtac-PA)的乙醇發(fā)酵初步放大試驗(yàn)2.2重組菌947{ pEtac-PA)的乙醇發(fā)酵采用5L發(fā)酵罐對重組菌947( pEtac- PA)的乙2.2.1裝液量為20mL時(shí),947( pEtac-PA)利用葡醇發(fā)酵進(jìn)行初步放大試驗(yàn)。結(jié)果表明,947( pEtac萄糖和木糖的乙醇發(fā)酵PA)發(fā)酵5%葡萄糖達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率(2.07%)如圖2所示,培養(yǎng)基中不加CaCO時(shí),947發(fā)酵10%葡萄糖48h產(chǎn)生2.8%乙醇。發(fā)酵5%木( pEtac-PA)利用5%葡萄糖發(fā)酵36h達(dá)到最大乙醇糖48h產(chǎn)生1.22%乙醇。發(fā)酵5%葡萄糖和5%木產(chǎn)率1.86%,而添加CaCO時(shí)發(fā)酵24h達(dá)到最大乙糖的混合糖48h產(chǎn)生2.15%乙醇。5L罐乙醇發(fā)酵醇產(chǎn)率1.96%圖2A)。添加CaCO3時(shí)947( pEtac初步放大試驗(yàn)的結(jié)果表明,947-( pEtac-PA)的乙醇PA)發(fā)酵5%木糖24h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率2.21%,產(chǎn)率比三角瓶發(fā)酵有所降低??赡苁怯捎诟鶕?jù)三角而不加CaCO3時(shí)發(fā)酵36h僅產(chǎn)生1.91%乙醇(圖瓶發(fā)酵而確定的初步放大試驗(yàn)的發(fā)酵條件并不適用2B)。這一結(jié)果進(jìn)一步說明,在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加于發(fā)酵罐試驗(yàn),如溶氧可能不足,導(dǎo)致菌體濃度低,且CaCO3可以顯著縮短發(fā)酵時(shí)間。同時(shí)也說明了發(fā)酵發(fā)酵副產(chǎn)物增多等等。液pH值的降低對乙醇發(fā)酵有很大影響。因此在進(jìn)步的乙醇發(fā)酵試驗(yàn)中,發(fā)酵培養(yǎng)基中均添加Ca3討論CO3。在同樣條件下,宿主菌E.coli947分別利用研究結(jié)果表明,引入pdc、adhB基因的重組菌5%葡萄糖和5%木糖的乙醇發(fā)酵結(jié)果顯示,E. coli JM09 pEtac-PA)能夠有效利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生乙947只能產(chǎn)生極微量乙醇(分別為0.02%和醇,發(fā)酵5%葡萄糖36h可產(chǎn)生1.8%乙醇,而宿主菌46%),說明重組菌947( pEtac-PA)中乙醇生物合EA1背酵衢萄蟠何能產(chǎn)生極微量的乙醇成途徑成功引入。同樣中國煤化工li947僅能產(chǎn)生極947( pEtac-PA)發(fā)酵5%葡萄糖和5%木糖的混微CNMHGPA)可以有效利用合糖36h達(dá)到最大乙醇產(chǎn)率2.76%殘留葡萄糖葡萄糖、木糖發(fā)酵產(chǎn)生乙醇,證明乙醇生物合成途徑200年第34卷第5期(總第245期)107食品與發(fā)酵工業(yè) FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES.5一不加碳酸鈣一不加碳酸鈣口添加碳酸鈣霹加碳酸鈣發(fā)酵時(shí)間/h發(fā)酵時(shí)間/h(A)5%葡萄糖(B)5%木糖乙醇濃度(%)一乙醇濃度(%-pH值△葡萄糖濃度(%)-pH值3葡萄糖濃度(%)發(fā)酵時(shí)間/h發(fā)酵時(shí)間/h()5%葡萄糖+5%木糖圖2重組菌947( pEtac-PA)利用葡萄糖和木糖的乙醇發(fā)酵結(jié)果在宿主菌E. coli jM09,947中成功引入[2207%。資料表明,合理的發(fā)酵工藝控制可以給微生根據(jù)本研究結(jié)果,乙醇發(fā)酵過程中發(fā)酵培養(yǎng)基的物提供良好的環(huán)境,提高目標(biāo)產(chǎn)品的生產(chǎn)水平,同時(shí)裝液量、發(fā)酵碳源的類型、發(fā)酵培養(yǎng)基中糖濃度、發(fā)酵減少不需要的特別是有害的代謝副產(chǎn)物的積累?;囵B(yǎng)基的pH值、重組菌的宿主類型等因素均對乙醇因工程菌在構(gòu)建時(shí),通常都是采用搖瓶培養(yǎng)的方法比產(chǎn)率具有一定影響。發(fā)酵過程中發(fā)酵液pH值的降較其生產(chǎn)能力,這樣得到的培養(yǎng)工藝一般并不直接適低對于乙醇產(chǎn)率影響顯著。在發(fā)酵液中添加CaCO3,用于發(fā)酵罐,而且搖瓶的操作方式和提供的培養(yǎng)環(huán)境可以部分中和發(fā)酵產(chǎn)生的酸維持發(fā)酵液的pH值相與發(fā)酵罐有很大的差別。因此對基因重組菌進(jìn)行深對穩(wěn)定,有利于菌體生長,因而可以顯著縮短發(fā)酵時(shí)的發(fā)酵特性研究,對發(fā)酵過程加以優(yōu)化,可以充分間。在裝液量加大時(shí)乙醇產(chǎn)率降低。同樣裝液量時(shí),發(fā)揮其生產(chǎn)能力1。因此對本研究中采用的新型產(chǎn)糖濃度提高,乙醇產(chǎn)率降低。發(fā)酵液pH值的降低、乙醇重組菌的乙醇發(fā)酵工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,有望進(jìn)一裝液量加大(溶氧效果較差)、糖濃度提髙(滲透壓增步提高其乙醇產(chǎn)率大)最終都使得乙醇產(chǎn)率降低,原因可能是這些因素都會影響菌體的生長,導(dǎo)致菌體濃度降低。以野生型考文讞菌株E.coli947為宿主的重組菌947( pEtac- PA)發(fā)1孫金風(fēng)諸葛健,王正樣重組腸道細(xì)菌作為產(chǎn)乙醇生物催酵產(chǎn)乙醇的能力要高于以E. coli jM109為宿主的化劑的研究進(jìn)展[].工業(yè)微生物,2004,34(3):44~48JMo9( pEtac-PA),尤其是在裝液量加大高濃度糖2孫金風(fēng),徐敏,張峰,等,利用木糖和葡萄糖合成乙醇的新發(fā)酵、以及利用木糖發(fā)酵時(shí)更明顯。這可能是由于野型重組大腸桿菌的研究[J].微生物學(xué)報(bào),2004,44(5);600~604生型菌株生長速度較快,可以達(dá)到較大的菌體濃度,3孫金風(fēng),諸葛健,王正祥,有效利用木糖的腸道細(xì)菌的篩從而乙醇產(chǎn)率高。無論是重組菌JM109( pEtac-PA選,無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào)[].200322(1):21~24或947( pEtac- PA)利用葡萄糖和木糖的混合糖進(jìn)行(美)薩姆布魯克J,拉塞爾著DW.,黃培堂等譯,分子發(fā)酵時(shí),菌株均優(yōu)先利用其中的葡萄糖,與資料報(bào)道克隆實(shí)驗(yàn)指南(第三版)M].北京:科學(xué)出版社,2002.96~99,1599重組菌947( pEtac-PA)的5L發(fā)酵罐乙醇發(fā)酵初5寧正祥主編食品成分分析手冊[M.北京中國輕工業(yè)出步放大試驗(yàn)結(jié)果要遜色于三角瓶發(fā)酵。三角瓶發(fā)酵版社,1998.21時(shí)(裝液量為100mL),947( pEtac-PA)發(fā)酵5%葡萄糖最大乙醇產(chǎn)率為2.83%,而上罐發(fā)酵時(shí),9477HH中國煤化工寒驗(yàn)(第三版MCNMH( pEtac-PA)發(fā)酵5%葡萄糖的最大乙醇產(chǎn)率為ethanologenic enzymes from ymomonas mobilis in recom108208vol4No5o|245)生產(chǎn)與科研經(jīng)驗(yàn)binant strains of escherichia coli[. Appl Environ Micro9沈萍主編微生物學(xué)[M]北京:高等教育出版社,200080biol,1988,54(2):397~4048 Olsson l, Hahn-H Gerdal B. Fermentation of lignocellu10李育陽主編基因表達(dá)技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,losic hydrolysates for ethanol production[JJ. Enzyme andMicrobial Technol, 1996,18: 312-331Ethanol Production of Novel Ethanologenic RecombinantEnteric Bacteria from Glucose and xyloseSun jinfeng, wang zhengxiang1(School of Life Science and Chemical Engineering, Huaiyin Instititute of Technology, Huaian 223001, China)2(School of Biotechnology, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China)ABSTRAct In this article, ethanol production of recombinants E, coli JM109(pEtac-PA)and E. coli 947(pEtac-PA) at different concentrations of glucose and xylose or mixture of glucose and xylose was studied.Results indicated that E. coli 947(pEtac-PA)was efficient for ethanol fermentation from glucose and xylose.Fermentation was completed in 36h and the maximum ethanol yield were 87. 4% and 68. 7% of the theoretical, respectively, which were both much better than that of E. coli JM109(pEtac- PA). Ethanol productionof the recombinants was influenced by various factors such as carbon source, sugar concentration, pH value,host type of the recombinants, etc.Key words ethanologenic recombinants, ethanol fermentation, glucose, xylose2009年i國際烘焙糖果巧克力及糕點(diǎn)博覽會北京新間發(fā)布會召開2008年5月13日,2009年iba國際烘培、糖果、巧克力及糕點(diǎn)博覽會北京新聞發(fā)布會在北京皇家大飯店舉行國聯(lián)邦烘培業(yè)聯(lián)合會(ZVB)主席 Peter Becker先生、德國聯(lián)邦烘培業(yè)聯(lián)合會(ZVB)董事總經(jīng)理 Eberhard Groebel博士、德國工業(yè)博覽會公司(GHM)董事會主席Mr. Raisbeck先生分別致辭,a是國際領(lǐng)先的烘、糖果及咖啡食品業(yè)實(shí)易展會,60年來,3年一屆的ba一直不斷拓展其領(lǐng)導(dǎo)地位。上屆-2062年ha在尼黑舉行期間共吸引來自14個(gè)國家的800觀眾及1000來自世界各地的參展商.Dba200將+2001年10月3~10日在杜塞爾多夫舉行iba展品菟圍:從零部件到成套生產(chǎn)線等各類最新設(shè)備、機(jī)械于設(shè)施;冷藏、發(fā)酵與空調(diào)最新技術(shù);各類原材料;IT硬件與件;衛(wèi)生設(shè)備與產(chǎn)品;零食小吃;咖啡相關(guān)設(shè)備與產(chǎn)品;資格認(rèn)證相關(guān)產(chǎn)品與麋務(wù),訕致力服務(wù)所有規(guī)模的企業(yè),它不僅適合工業(yè)生產(chǎn)企業(yè),各類中小型企業(yè)也能從中獲取許多的發(fā)展助益,如有要求,ba可考慮合作舉辦相關(guān)展期特別活動,i2009將在展覽同期舉辦一系列研討交流活動,其中包括研討論壇、 iba Cup、德國烘焙學(xué)會研討會和杜塞爾多夫地區(qū)烘焙廠考作為iba200的主辦機(jī)構(gòu)德國聯(lián)邦烘培業(yè)聯(lián)合會( Central Association of German Bakers)將舉辦主題廣泛的教育活動,向來自世界各地的觀眾介紹烘焙技術(shù)、質(zhì)量管理及市場推廣等各方面的發(fā)展現(xiàn)狀致力提升業(yè)界經(jīng)營水平為滿足旺盛的海外需求德國聯(lián)邦烘焙業(yè)聯(lián)合會在佛國烘焙業(yè)學(xué)院下設(shè)了國際烘焙學(xué)院(IBA)。IBA將為個(gè)別學(xué)員團(tuán)體提供具有直接針對性的研討培訓(xùn)課程,并通過專業(yè)翻譯確保德國烘焙專業(yè)技術(shù)的準(zhǔn)確傳達(dá)培訓(xùn)項(xiàng)目并非只面向世界各地烘塘與糖果行業(yè)的協(xié)會、組織和技術(shù)學(xué)院,同時(shí)還可為企業(yè)的合資格員工提供針對性的服務(wù),而且,在達(dá)成適當(dāng)協(xié)議蚋情況下,國際烘塘學(xué)院(IBA)專家還可在其國家舉辦這類研討培訓(xùn)活動。學(xué)員在完成培訓(xùn)課程后可獲得學(xué)院頒發(fā)的資格證書(參見ww. akademie- baeckerhandwerk.de)。欲進(jìn)一步了解以上提到的教育培訓(xùn)課程,請光臨在iba2009的“ zentralverband deDeutschen BA ckerhandwerks”展位TYH什看年第34卷第5期(總第245期)109
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