植物生理學(xué)通訊第40卷 第3期，2004年6 月361聚乙二醇在植物滲透脅迫生理研究中的應(yīng)用張立軍樊金娟'阮燕曄1關(guān)義新2'沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，沈陽(yáng)110161; 2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所，北京100081Application of Polyethylene Glycol in the Study of Plant Osmotic StressPhysiologyZHANG Li~Jun", FAN Jin~Juan', RUAN Yan-Ye', GUAN Yi-Xin2'ollege of Biological Science and Technology. Shenyang Agriculural Universit, Shenyang 1161:1nstinte of Crop Bredingand Cultivation, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Bejing 100081提要介紹聚二醇(PEG)在調(diào)節(jié)培養(yǎng)液和固體培養(yǎng)基水勢(shì)以及在水分脅迫和鹽脅迫研究中的應(yīng)用及應(yīng)注意的問(wèn)題，并介紹PEG溶液水勢(shì)的測(cè)定方法和水勢(shì)計(jì)算公式.關(guān)鍵詞聚乙二醇;植物;滲透脅迫;水勢(shì)計(jì)算.植物在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)遇到由干旱大分子的質(zhì)量!)，以及促進(jìn)種子萌發(fā)4-61等。和高鹽引起的滲透脅迫。受到滲透脅迫的植物脫2 PEG水分滲透脅迫研究中的應(yīng)用水，細(xì)胞膨壓?jiǎn)适В瑢?duì)植物產(chǎn)生許多不利效應(yīng):在研究植物對(duì)干早和高鹽的反應(yīng)時(shí)需要低水發(fā)育受抑，生產(chǎn)力降低，甚至死亡。長(zhǎng)期以來(lái)，勢(shì)處理。-般的做法是減少土壤或其它固體培養(yǎng)人們一直想通過(guò)揭示滲透脅迫傷害機(jī)理，尋找提基的水分供應(yīng)，但在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間很難保持水勢(shì)高植物抵抗脅迫能力的途徑。但在研究過(guò)程中常的恒定和一致。而且有些試驗(yàn)，例如要求嚴(yán)格控為一些客觀因素所困擾:-是 土壤的組分非常復(fù)制培養(yǎng)基水勢(shì)、需要在短時(shí)間內(nèi)使植物體達(dá)到較雜，作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)常難以控制:二是有時(shí)難以將低水勢(shì)、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要進(jìn)行放射性標(biāo)記的實(shí)滲透脅迫效應(yīng)與土壤系統(tǒng)中的其它脅迫效應(yīng)有效區(qū)驗(yàn)不適合用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)植物，而用液體培養(yǎng)分開(kāi)。因此，在植物滲透脅迫生理研究中，實(shí)則較為合適。此外，在觀察滲透脅迫對(duì)植物根系驗(yàn)?zāi)芊裨谝粋€(gè)穩(wěn)定而易于控制的模擬系統(tǒng)中進(jìn)行就生長(zhǎng)和形態(tài)變化的影響時(shí)，溶液培養(yǎng)也有較大的顯得十分重要。聚乙二醇(polyethylene glycol,優(yōu)勢(shì)。PEG)溶液培養(yǎng)則是人們?cè)谶M(jìn)行植物滲透脅迫研究2.1 PEG溶液培養(yǎng)的特點(diǎn)及應(yīng)用用溶液培養(yǎng)對(duì)植中一個(gè)常用而比較理想的系統(tǒng)。物進(jìn)行滲透脅迫時(shí)，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的水勢(shì)。如1PEG的性質(zhì).果單從調(diào)節(jié)水勢(shì)的角度考慮，無(wú)機(jī)鹽、小分子的PBG是乙醇聚合物，分子式為HOCH2 -[CH-糖、 醇等都可以選用。但對(duì)土壤干旱來(lái)說(shuō)，不0- CH2]. - CH2OH，分子量有200~20 000不等。僅要使植物的細(xì)胞脫水，而且還要使細(xì)胞壁脫常見(jiàn)商品的分子量在200~8 000之間，pH 5~7,溶水。因此，模擬土壤干旱的滲透物質(zhì)，其分子于水，也溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑。隨著分子量的增量要足夠大，才能不透過(guò)細(xì)胞壁，產(chǎn)生與土壤干大，PEG 的物理性質(zhì)也隨之變化，從無(wú)色無(wú)味的旱相同的脫水效應(yīng)。如果滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)透過(guò)細(xì)胞液體變?yōu)橄灎罟腆w。由于PEG的性質(zhì)特殊，在很壁，甚至透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，被代謝或產(chǎn)多行業(yè)中都有廣泛的用途。如橡膠、紡織、金生其它效應(yīng)，將會(huì)使研究的問(wèn)題復(fù)雜化。屬等行業(yè)中用作水溶性潤(rùn)滑劑、軟化劑、不飽和Greenway”對(duì)液泡化和非液泡化的玉米組織進(jìn)行滲樹(shù)脂等。PEG分子有非離子化的長(zhǎng)鏈，化學(xué)性質(zhì)透脅迫時(shí)，發(fā)現(xiàn)復(fù)水后液泡化組織的代謝物外滲不活潑川，對(duì)生物的毒性很小，所以也應(yīng)用于制速率訊迪增士，而非滴泊化的細(xì)糾織內(nèi)含物外滲只藥業(yè)、化妝品業(yè)和醫(yī)療中。在生物科學(xué)研究中中國(guó)煤化工PEG也有廣泛的應(yīng)用。例如，PEG用于介導(dǎo)細(xì)胞JYHCNMH G,融合、DNA轉(zhuǎn)移，分離生物大分子42和測(cè)定生物B-mail: ljzhang@sya.cdu.cn, Tel: 024-88443713362植物生理學(xué)通訊第40卷 第3期，2004年6月有輕微的增加。因此，溶質(zhì)是否能夠透過(guò)細(xì)胞壁些物質(zhì)不適合較長(zhǎng)時(shí)間的滲透脅迫實(shí)驗(yàn)119。PEG對(duì)植物細(xì)胞的效應(yīng)是不同的8。PEG可作為滲透可以應(yīng)用于長(zhǎng)時(shí)間的植物滲透脅迫實(shí)驗(yàn)，但在配調(diào)節(jié)物質(zhì)9。實(shí)驗(yàn)表明，分子量在6 000及6000制培養(yǎng)基的過(guò)程中，如果將PEG直接加入培養(yǎng)基以上的PEG不能透過(guò)細(xì)胞壁。當(dāng)細(xì)胞置于低水勢(shì)中會(huì)干擾瓊脂糖凝固，從而限制PEG在固體培養(yǎng)溶液中，細(xì)胞內(nèi)水分流出，細(xì)胞體積變小，如植物的滲透脅迫生理研究中的應(yīng)用。Linossier 等201果溶質(zhì)的分子量很小，可以透過(guò)細(xì)胞壁，則會(huì)引在研究PEG和脫落酸對(duì)橡膠樹(shù)(Hevea brasisliesis)起質(zhì)壁分離(plasmolysis);如果溶質(zhì)的分子量很大，體細(xì)胞胚發(fā)育的影響時(shí)， 向培養(yǎng)基中加入75、 140不能透過(guò)細(xì)胞壁，水分的移出則會(huì)使細(xì)胞發(fā)生塌和178 g:L'的PEG3350溶液(其水勢(shì)分別相當(dāng)于陷(cyorrhysi)。Carpita 等101用溶質(zhì)分子量不同的58、174 和290 mmol:L"1的蔗糖溶液),在制備培溶液處理活體細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)，甘露醇、PEG2000 引養(yǎng)基時(shí)，將上述濃度濃縮1倍，在120C下滅菌起質(zhì)壁分離，PEG6000 引起塌陷，PEG4000 既20min后，再分別與濃縮1倍的不含激素的MH引起質(zhì)壁分離又導(dǎo)致塌陷。所以，高分子量的.(Mueller-Hinton)培養(yǎng)基等體積混合，配制時(shí)先將PEG是模擬土壤干旱理想的水勢(shì)調(diào)節(jié)物質(zhì)。PEG 溶液倒入到培養(yǎng)基中，然后再使培養(yǎng)基凝Rashmi和Agaral"l在實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，用水勢(shì)為固。但應(yīng)該注意的是，PEG經(jīng)過(guò)高溫滅菌后，水-1.7和-2.1 MPa的PEG6000(0.27和0.3 gg水)和勢(shì)會(huì)發(fā)生變化，因此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)考慮到這種變甘露醇(0.3和0.6 mol:L')處理水稻幼苗時(shí)，脅迫化的影響。van der Weele等建立了一種簡(jiǎn)便的誘導(dǎo)的脯氨酸含量增加，前者明顯大于后者。方法，即將經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾的PEG溶液倒在已經(jīng)凝固有人用PEG產(chǎn)生滲透脅迫處理玉米1213]、水的瓊脂培養(yǎng)基上，平衡一夜后倒掉PEG溶液，再稻14)的幼苗時(shí)發(fā)現(xiàn)，各種植物表現(xiàn)出相同的特接種植物材料。此法不僅能夠滿足實(shí)驗(yàn)對(duì)于水勢(shì)征:丙二醛含量增加，葉中相對(duì)含水量(RWC)下的要求，而且對(duì)植物沒(méi)有毒害作用。降，膜透性增高。此外，隨著植物抗性生理研3 PEG在研究鹽脅迫中水分脅迫的作用究向細(xì)胞水平的深入，需要以離體的器官、組織雖然鹽脅迫的一-個(gè)主要效應(yīng)是對(duì)植物產(chǎn)生滲和細(xì)胞為試材進(jìn)行研究。范建民和惠玉琴15以不透脅迫，其對(duì)植物的傷害與土壤干旱有共同的機(jī)同苗齡的小麥離體葉片為材料，研究PEG對(duì)其衰制，但是鹽脅迫還會(huì)產(chǎn)生離子毒害等其它效應(yīng)。老的影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)PEG加速小麥衰老。同樣，在無(wú)機(jī)鹽離子分子量小，不僅能透過(guò)細(xì)胞壁，而且細(xì)胞水平的研究中，PEG也是- -種很好的水勢(shì)調(diào)可被細(xì)胞所吸收，在細(xì)胞內(nèi)積累將會(huì)影響酶和其節(jié)物質(zhì)。例如，Bajji 和Chaumontl!6)就曾采用離它蛋白的穩(wěn)定性。因此，在研究鹽脅迫機(jī)理時(shí)應(yīng)體組織研究滲透脅迫對(duì)細(xì)胞膜離子通道、水孔蛋將鹽脅迫的滲透脅迫效應(yīng)與其它效應(yīng)區(qū)分開(kāi)。白和其它轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響。許多學(xué)者用PEG進(jìn)行研究時(shí)，發(fā)現(xiàn)植物體在近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，PEG 滲透遭遇鹽脅迫和滲透脅迫時(shí)，在許多反應(yīng)上有差脅迫也用來(lái)研究基因的表達(dá)和調(diào)節(jié)7”問(wèn)題。在許異。Skrecky22)用-1.0 MPa的非透過(guò)性溶質(zhì)多植物中，蔗糖合成酶基因的表達(dá)受蔗糖所制PEG8000和透過(guò)性溶質(zhì)氯化鈉處理假單胞菌約。Dejardin 等[181研究表明，擬南芥的蔗糖合成(Pseudomonas putda)后置于透射電鏡下觀察，發(fā)酶基因(Sus1)表達(dá)由蔗糖所誘導(dǎo)外，還可以由透過(guò)現(xiàn)經(jīng)PEG處理的細(xì)胞外膜出現(xiàn)斷裂或皺褶，而用性溶質(zhì)(山梨醇、甘露醇)和非透過(guò)性溶質(zhì)氯化鈉處理和未經(jīng)處理的細(xì)胞中則沒(méi)有。Bajji 和PEG8000所誘導(dǎo)。因而推斷Sus1基因可能受滲透Chaumont!l用29% PEG6000和300 mmolL'氯化勢(shì)調(diào)節(jié)，而不是受蔗糖代謝物的調(diào)節(jié)。鈉(約-1.5 MPa)脅迫玉米幼苗時(shí)發(fā)現(xiàn)幼苗鮮重顯2.2 PEG固體培養(yǎng)的特點(diǎn)及應(yīng)用在某些植物滲透著降低，PEG處理的降低程度大于氯化鈉處理脅迫研究中需要在瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)幼苗或離體組的，而且PEG處理的葉中相對(duì)含水量降低，幼苗織，并進(jìn)行滲透脅迫處理。通常的方法是在培養(yǎng)中國(guó)煤化工相對(duì)含水量恢復(fù)正基中加入小分子的糖類(lèi)、醇類(lèi)物質(zhì)或無(wú)機(jī)鹽，如YHCN MH G水量不降低，但在蔗糖、甘露醇、山梨醇等進(jìn)行滲透脅迫。但這轉(zhuǎn)矽到止吊水勞浴液中后，相對(duì)含水量則降低。植物生理學(xué)通訊第40卷 第3期，2004年6月363假單胞菌的反式不飽和脂肪酸與順式不飽和脂肪酸中不遵循van' t Hoff定律，對(duì)于給定的PEG水的比值對(duì)PEG8000、PEG200和氯化鈉滲透脅迫勢(shì)與摩爾濃度有關(guān)，但不成線性關(guān)系。在相同摩呈不同的反應(yīng):在-0.25 MPa水勢(shì)下，PEG200爾濃度下，水勢(shì)隨著分子量的增大而降低。PEG和氯化鈉處理的反式不飽和脂肪酸與順式不飽和脂的水勢(shì)可能主要受乙醇亞單位的襯質(zhì)勢(shì)控制。肪酸的比值高于PEG8000處理的;水勢(shì)進(jìn)-步下雖然PEG溶液的水勢(shì)與摩爾濃度不呈線性關(guān)降時(shí)，PEG8000才誘導(dǎo)產(chǎn)生大量的反式飽和脂肪 系。但Michel和Kaufmannl281發(fā)現(xiàn)在一 定范圍內(nèi)，酸，導(dǎo)致其與順式不飽和脂肪酸的比值上升122]。PEG 溶液水勢(shì)隨濃度和溫度的變化，可用方程馬煥成和王沙生23用等滲透勢(shì)的氯化鈉和PEG溶4=aq[PEG]2 T+b(PEG] +c[PEG]T+d([PEG]描述，式液處理胡楊時(shí)發(fā)現(xiàn)，胡楊對(duì)滲透脅迫和鹽脅迫有中a、b、c、d為常數(shù)。Michel 等1291983年又不同的響應(yīng):處理1 d后，受-0.24 MPa的氯化推導(dǎo)出如下經(jīng)驗(yàn)公式，對(duì)PEG溶液的水勢(shì)進(jìn)行計(jì)鈉脅迫的胡楊根中ABA含量比未經(jīng)氯化鈉脅迫的算或預(yù)測(cè): YpEo=1.29[PEG]' T- 140[PEG]2-處理增加2.7倍;而用相同水勢(shì)的PEG處理沒(méi)有4[PEG]。式中，YpEG 為PEG溶液的水勢(shì)，單位影響。李海云等1241研究鹽生植物濱藜(Atriplex為 bar; [PEG]為PEG濃度，單位為g:g'(水); T為isatidea)、堿蓬(Suaeda salsa)、海蓬子(Salicomia溫度(攝氏度)。此公式在PEG濃度0~0.8 g:g"'(水)、eucopca)、 補(bǔ)血草(Limonium bicolor)種子萌發(fā)的抑溫度5~40C的范圍內(nèi)可得到很好的預(yù)測(cè)結(jié)果，誤制因子時(shí)發(fā)現(xiàn)，雖然氯化鈉和等水勢(shì)的PEG6000差在5%以內(nèi);但在預(yù)測(cè)高濃度PEG溶液的水勢(shì)都對(duì)種子萌發(fā)有抑制作用，但PEG6000的抑制作時(shí)，誤差增大。用大于氯化鈉。這都說(shuō)明非透過(guò)性的PEG脅迫和甘露糖和葡聚糖的水勢(shì)計(jì)算可參見(jiàn)文獻(xiàn)29。鹽脅迫有不同的機(jī)制。應(yīng)該注意的是，PEG 與低分子量溶質(zhì)混合時(shí)總之，用PEG產(chǎn)生滲透脅迫是鹽脅迫生理研對(duì)水勢(shì)的影響具有加成效應(yīng)。例如將PEG與究中的一個(gè)重要手段。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，可以針對(duì)K2SO、NaCl、 甘露醇混合時(shí)，實(shí)測(cè)水勢(shì)低于預(yù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，用不同分子量的PEG,產(chǎn)生不測(cè)水勢(shì)(比預(yù)測(cè)水勢(shì)更負(fù)， 表1).這為培養(yǎng)液水同性質(zhì)的滲透脅迫來(lái)研究細(xì)胞壁外脫水和細(xì)胞膜外勢(shì)預(yù)測(cè)帶來(lái)了困難。但這個(gè)公式可應(yīng)用在對(duì)水勢(shì)脫水效應(yīng)。精確度要求不高的實(shí)驗(yàn)中，也可以在此基礎(chǔ)上對(duì)4 PEG溶液水勢(shì)的測(cè)定和計(jì)算水勢(shì)進(jìn)行進(jìn)一步 的精確調(diào)節(jié)。PEG溶液水勢(shì)可以用冰點(diǎn)下降法(freezing-5結(jié)束語(yǔ)point depression)和水蒸氣壓虧缺法(vapor- pressure雖然PEG廣泛應(yīng)用于植物滲透脅迫的溶液培養(yǎng)deficit)測(cè)定[326。但這兩種測(cè)定方法的結(jié)果有較中，但還存在著-一些問(wèn)題。首先，氧氣供應(yīng)不大的差異。Williams 和Shaykewich7發(fā)現(xiàn)PEG在足，以致植物缺氧。這與一般溶液培養(yǎng)一樣118]。低濃度[ 50~150 g(1 000 g)"(水)]下，冰點(diǎn)下降法在純水中氧氣的傳遞能力比空氣中低10^倍1,而的測(cè)定結(jié)果比水蒸氣壓虧缺法高(負(fù)的少)26% ~且在進(jìn)行溶液培養(yǎng)時(shí)根系表面還存在著影響氧氣擴(kuò)44%;高濃度[300~400 g*:(1 000 g) "(水)]下比水散的界面層2，層面層的厚度與攪拌程度和溶液蒸氣壓虧缺法低(更負(fù))14%~20%。PEG在水溶液的粘度有關(guān)。溶液的粘度愈大，愈不利于氧氣的表1鹽和甘露醇對(duì)PEG溶液水勢(shì)的影響0PBC/gg'(水)溶質(zhì)濃度/mol.L:1.20.3實(shí)測(cè)水勢(shì)Mpa加成效應(yīng)Mpa 實(shí)測(cè)水勢(shì)Mpa 加成效應(yīng)Mpa 實(shí)測(cè)水勢(shì)Mpa 加成效應(yīng)Mpa中國(guó)煤化工-K,SO,0.355-2.00NaCl0.410-1.99YHCNMHG0.62甘露醇0.731-1.95-2.760.50-3.370.75364植物生理學(xué)通訊第40卷 第3期，2004年6月擴(kuò)散。PEG溶液的粘度較大，對(duì)根系的氧氣供應(yīng)Biochem, 2002, 110 (5); B1-B42有較大的不利影響，從而增大了根系缺氧的可能17 Stasolla C, van Zyl L, Egersdotter U et al. The efets of poly-ethylene glycol on gene expression of developing white spruce性。其次，對(duì)培養(yǎng)植物產(chǎn)生傷害。在培養(yǎng)過(guò)程somatic embryos. Plant Physiol, 2003, 131(1): 49-60中，PEG有時(shí)會(huì)進(jìn)入組織內(nèi)部，對(duì)植物尤其是植18 Dejardin A, Sokolov LN, Kleczkowski LA. An Arabidopsis物的根系產(chǎn)生不同程度的傷害1331。此外，如果stress-responsive sucrose synthase gene is up-regulated by lowPEG本身純度較低，其所含有的雜質(zhì)也會(huì)對(duì)植物osmotic potential. Abstract Number769. abstracts.aspb.org/aspb1998/48/0373.shtml產(chǎn)生一定的傷害作用1341。這些都是我們?cè)趹?yīng)用19 Verslues PE, Ober ES, Sharp RE. Root growth and oxygen rela-PEG的實(shí)驗(yàn)中需要加以注意的。tion at low water potentials impact of oxygen availability in poly-ethylene glycol solution. Plant Physiol, 1998. 116: 1403-1412參考文獻(xiàn)20 Linossier L, Veisseive P, Cailloux F et al. Effect of abscisic acid1 Couper A. Eley D. Surface tension of polyethylene glycoland high concentaions of PEG on Hevea brasiliensis somaticsolutions. J Polymer Sci, 1948.3:354~349embryos development. Plant Sci, 1997, 124: 183-1912 McClendom JH, Blinks Lr. Use of high molecular weight sol-21 van der Wecle CM, Spollen wG, Sharp RE et al. Growth ofutes in the study of isolated intracellular structure. Nature, 1952,Arabidopsis thaliana seedlings under water deficit studied by170:577-578control of water potential in nutient- agar media. J Exp Bot, 2000,Termaat CR, Hanson AD. Use of concentated macroutrient51: 155~1562solution to separate osmotic from NaCl-specific effects on plant2 Skrecky D. Difrenial efects ogrowth. Aust J Plant Physiol, 1988,13: 509-522solues on the fatty acid composition of Pseudomonas putda.4 Thill DC, Schirman RD, Appleby AP. Osmotic sabiliy of man-Appl Environ Microbiol, 2000, 66(6): 2414-2421nitol and polyethylene glycol 20 000 solution used as seed ger-23馬煥成 王沙生.胡楊對(duì)滲透脅迫和鹽分脅迫的不同響應(yīng).西北mination media. Agron J, 1979,71:105~108林學(xué)院學(xué)報(bào), 1998, 18(1): 1~7Berkat O, Briske DD. Water potential evaluation of three germi-4李海云，趙可夫,王秀峰.鹽對(duì)鹽生植物萌發(fā)的抑制作用.山東農(nóng)nation substates uilizing polyethylene glyol. Agron J, 1982,業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版) 2002, 33(2): 170-17374: 518-~52125 Roders JA, Tam T. Solution bchavior of polyethylene glycols in; 沈又佳.陳靠山,周變等. NdCl,對(duì)脅迫下小麥種子萌發(fā)的影響.water using vapor pressure osmometry. Can J Pbarm Sci, 977,干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，1995,13(1):90-9367: 64-67Greenway H. Effts of slowly permeating osmotica on metabo-26 Steuter AA, Amozafar JR. Good in water potential of aqueouslism of vacuolated and nonvacuolated tssues. Plant Phyiol, 1970,polyethylene glycol. Plant Physiol, 1981, 67: 64-6746:254-2588 Hobl M, Schopfer P. Water rlations of growing maize cleptile27 Wlliams J, Shaykewich CF. An evaluation of polyethylene gly~-col (P.E.G) 6000 and P.E.G 200000 in the osmotic control of soilComparison between mannitol and polyethylene glycol 6000 aswater matric potential. Can J Soil, 1969, 49:397-401extemnal osmotica for adjusting turgor pressure. Plant Physiol,28 Michel BE, Kaufmann MR. The osmotic potential of1991, 95:716-722polyethylethylene glycol 6000.0 Plant Physiol, 51: 914~916Jackson WT. Use of cartbowaxes (polythylene glycoD) as osmotic29 Micbel BE, Wiggins OK, Outlaw Jr WH. A guide to establisbhagents. Plant Physiol, 1962,39:513~519ing water potential of aqucous two pbase solutions (plyethyene10 Carpita NC, Sabularse D, Montezinos D et al. Determination ofplus dexran) by amendmeat with mannitol. Plant Physiol, 1983,the pore size of cell walls of living plant clls. Science, 1979,72: 60~-65205: 144-114730 Michel BE. Evaluation of the water potenials of polyetbyleneglycol 8000 both in the presence and absence of other solutes.line contents and nitrate reductase activity in rice under lightand dark condions. Physiol Mol Biol Plants, 1998, 4:53~57Plant Physiol, 1983, 72: 66-~722李雙順,林植芳.抗氧化劑和6-BA對(duì)根系脅迫的玉米葉片光合31 Nye PH, Tinker PB. Solute movemeot in the silroot system.膜特性的影響.植物學(xué)報(bào), 1994, 36(11): 871-877In: Jandeson D, Greig-Smith P, Pitelda A(eds). Studies in13 韓建民,史吉平,商振清.穆透脅迫對(duì)玉米幼苗不同葉片、葉Ecology. Berkeley, CA: Unversity of California Press, 1977.片水分狀況及SOD. POD活性的影響.玉米科學(xué), 1995, 38~13(1): 71-7432 Drew MC. Sensing soil oxygen. Plant Cell Environ, 1990, 13:'14 肖用森王正直,郭紹川.滲透脅迫下稻苗中游離脯氨酸累積與681-693膜脂過(guò)氧化的關(guān)系.武漢植物學(xué)研究, 1996, 14(4): 334 -34033 Lawlor DW. Absorption of polyethylene glycols by plants and5范建民,惠玉琴.光.滲透脅迫和激素對(duì)離體小麥葉片衰老的their efects on plant Rrowth. New Phytol, 1970, 69: 501-~513影響.青海師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2002, (1): 60~62中國(guó)煤化工ue to overcome plyetbylh16 Baii M, Chaumont F. Monitoring aquaporin gene expessisnfYCNMHG. Plant Physiol, 1985, 79:in Zea mays L. under osmotic stress conditions. Arch Physiol