112寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 ingxia Med,feb.2005,va27n.2文章編號(hào):1001-5949(2005)02-0112-03·實(shí)驗(yàn)研究乙醇提取苦瓜皂甙的工藝研究孫磊【摘要]目的采用乙醇提取苦瓜皂甙,確定最佳工藝。方法采用單因素和正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取苦瓜皂甙的最佳工藝,建立合理可靠的提取條件。結(jié)果最佳提取溫度70℃、溶劑用量為苦瓜的9倍量,提取時(shí)間3小時(shí)、乙醇濃度60%。結(jié)論工藝可行、合理。關(guān)鍵詞]苦瓜皂;乙醇;提取中圖分類號(hào)R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A Study for technology of extracting balsamper glycoside with ethanol SUN Lei.(College of phamacy Harbin Uhiversity of commerce) [Abstract] Objective Adopr ethanol as the solevent to extract balsamper glycoside, and established the optimum process. Methods Single-factor and orthogonal design were used to choose the optimum extraction Process. So as to ensure the reasonable and reliable extracting condition. Results The optimum temperature is 70, the solvent is 9 times of the balsamper the extracting time is 3 hours, the concentration of the ethanol is 60%. Conclusion The process is available and reliable. [Key words] Balsamper slycoside; Ethanol Ertraction苦瓜系葫蘆科苦瓜屬植物的果實(shí),又名涼瓜癩0.10、0.15、0.20、0.25、0.30ml分別置于具塞試管中,瓜含有苦瓜素甙F1、1、G、胡蘿卜甾醇等活性成水浴揮去溶劑,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶分,含苦瓜甙(為B-谷甾醇--D-葡萄糖甙和5、液0.2ml,高氯酸0.8ml。在60℃水浴中加熱15分25、-豆二稀醇-3-葡萄糖甙的等分子混合物)、鐘,流水冷卻,加冰乙酸5ml,搖勻,在15min內(nèi)于波長(zhǎng)苦瓜蛋白、5-羥基色胺、多種氨基酸、果膠類胰島548m處分別測(cè)吸光度,結(jié)果見(jiàn)表1另取無(wú)水乙醇素或稱植物胰島素(Plant insuliu)等?？喙闲晕犊嚯S行空白對(duì)照(取0.35ml于具塞試管中,水浴揮去溶寒,具有消暑滌熱、明目解毒之功效。藥理研究表劑)。以吸光度(A)為縱坐標(biāo),人參皂甙Rg1濃度(C)明苦瓜具有降血糖、抗生育抗突變、抗菌、免疫調(diào)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理,得線形回歸節(jié)和抗HV等作用+5。關(guān)于苦瓜皂甙的藥理作用方程為:Y=0.0022x+0.0135,r=0.9974的研究已取得了很大進(jìn)展,但苦瓜皂甙提取工藝的表1人參皂甙Rg1標(biāo)準(zhǔn)品濃度與吸光度研究尚少見(jiàn)報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)研究了用乙醇提取苦瓜皂體積(ml)0.000.050.100.150.200.250.30甙,并確定了最佳提取條件。濃度(m)02550751001251501材料與方法吸光度00.0740.1320.1830.2260.2790.3371.1一般資料:苦瓜(購(gòu)自哈爾濱第一百貨商場(chǎng)),人參皂甙Rg1標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)。2.2苦瓜皂甙的測(cè)定:將苦瓜洗凈、去籽、切片、烘1.2方法采用單因素和正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取苦瓜干、粉碎、脫脂、烘干,用乙醇回流提取。將提取液抽皂甙的最佳工藝。儀器為721分光光度計(jì)(上海第三濾、過(guò)濾,在60℃水浴中濃縮,然后用無(wú)水乙醇定容分析儀器廠),系列原裝 PRECISA天平(瑞士公至10ml,過(guò)濾,取1ml濾液于具塞試管中,用無(wú)水乙司)。醇再定容至10ml,取0.2ml于具塞試管中,在60℃水1.3統(tǒng)計(jì)方法:通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)表做方差分析得到結(jié)浴中揮去溶劑,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶論。液0.2ml,高氯酸0.8ml。在60℃水浴中加熱15分2結(jié)果鐘,流水冷卻,加冰乙酸5ml,搖勻,在15分鐘內(nèi)于波2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密稱取人參皂甙Rg1的標(biāo)長(zhǎng)548mm處測(cè)吸光度A(取無(wú)水乙醇0.35ml作空白準(zhǔn)品2mg,加無(wú)水乙醇溶解定容至4ml,搖勻,作為對(duì)對(duì)照)。照品溶液。精密吸取上述對(duì)照品溶液0.05、2.3單因素的確定寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 Ningxia Med Feb.2005,vol2.n.2113瓜粉末于4個(gè)提取瓶中,然后向其中分別加入料液用量、提取時(shí)間、誤差為4因素,選取3個(gè)水平進(jìn)行實(shí)比為1:7、1:8、1:9、1:10的80%的乙醇,在80℃水浴驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表6,正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。中回流提取3小時(shí)。測(cè)吸光度(見(jiàn)表2)。表6因素水平表2不同乙醇用量提取苦瓜皂甙的結(jié)果因素用量產(chǎn)量(g)得率%吸光度水平提取溫度(℃)料液比(wv)提取時(shí)間(h)1:70.01030.520.240601:81:8230.01080.540.252123701:91:90.01230.620.285801:101:100.00950.480.223表71(3)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果2.3.2不同乙醇濃度提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦序號(hào)序號(hào)AB因素皂甙含量 C E (mg)瓜粉末于4個(gè)提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的1110.5640%、60%、80%、95%的乙醇,在80℃的水浴中回流21214.746提取3小時(shí),測(cè)吸光度(見(jiàn)表3)。342231231230123231312133313.485312.379表3不同乙醇濃度提取苦瓜皂甙的結(jié)果5223114.594濃度%產(chǎn)量(g)得率%吸光度62213.700.00850.430.20273211.19700890.00960.480.22483313.9190.00900.460.21393114.3510.00800.400.190K138.79534.14038.18439.51040.67443.26041.47539.64539.4681.53839.27639.782.3.3不同提取時(shí)間提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦k12.9321.38012.7283.170瓜粉末于4個(gè)提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的k213.55814.42013.82513.215.60%的乙醇,在80℃的水浴中分別回流提取2h、3h、k313.15613.84613.09213.261極差R0.6263.0401.0970.0914h、5h,吸光度結(jié)果見(jiàn)表4。優(yōu)水平A2B2C2表4不同提取時(shí)間提取苦瓜皂甙的結(jié)果時(shí)間()產(chǎn)量(g)得率%吸光度將上述結(jié)果做方差分析,結(jié)果見(jiàn)表80.01260.630.290表8方差分析0.01270.640.29240.01230.620.285誤差來(lái)源偏差平方和自由度50.01170.560.270方差比臨界值顯著性貢獻(xiàn) F%0.604246.46219.0003.315.64921203.76919.000862.3.4不同溫度提取苦瓜皂甙:分別稱取2g苦瓜ABT1.8742144.15419.00010粉末于4個(gè)提取瓶中,然后分別向其中加入9倍的誤差Eo0.01020.005T18.137860%的乙醇,分別在50℃、60℃、70℃、80℃的水浴中回流提取3小時(shí),測(cè)吸光度(見(jiàn)表5)°結(jié)果顯示,乙醇的濃度對(duì)苦瓜皂甙吸光度的影表5不同溫度提取苦瓜皂甙的結(jié)果響最小,可以視為誤差列。其他3個(gè)因素,通過(guò)方差溫度℃產(chǎn)量(g)得率%吸光度500.01140.570.265分析,對(duì)苦瓜皂甙含量均有非常顯著的影響,并確定600.01170.590.270最佳提取工藝條件為:A2、B2、C2。700.01440.720.3303討論800.01290.650.298本實(shí)驗(yàn)對(duì)苦瓜總皂甙的提取工藝進(jìn)行了研究,通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳提取工藝的條件2.4正交實(shí)驗(yàn):根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇影響苦為:提取溫度70℃,乙醇用量為苦瓜的9倍量,提取瓜皂甙類化合物提取效果各因素中有意義的水平做時(shí)間為3小時(shí),乙醇濃度為60%。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正交實(shí)驗(yàn),對(duì)結(jié)果進(jìn)行極差和方差分析,以確定最佳的分析確定了影響因素的主次:料液比→提取時(shí)間114寧夏醫(yī)學(xué)雜志2005年2月第27卷第2期 Nirgxia Med,eb.200,v7.2醇作為提取溶劑,而不用甲醇,是考慮到它的安全1995.237-238.性,同時(shí)乙醇價(jià)廉,可以用于工業(yè)上大量的生產(chǎn)提3】江蘇新醫(yī)學(xué)院中藥大辭典(上冊(cè))[M]上海:上?？萍汲霭嫔?986,1281.取。4]孫寶瑩.苦瓜皂鼠的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究[J].河南中醫(yī)藥學(xué)刊參考文獻(xiàn)]1994,9(6):19.[]姜毅.苦瓜皂降糖作用的臨床觀察[J]實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志,[5]張旭忠苦瓜抗菌作用的研究中草藥1995,26(10):5561996,9(3):179.[收稿日期]2004-11-15[責(zé)任編輯]楊自革[2]陳慶全實(shí)用臨床草藥[M].第2版.福建:暨南大學(xué)出版社,文章編號(hào):1001-5949(2005)02-0114-01子宮體血管外皮肉瘤1例沈華關(guān)鍵詞】子宮體;皮肉瘤【中圖分類號(hào)】R713.42【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B1病例資料廣泛子宮全切術(shù),術(shù)后剖開(kāi)子宮,肌層呈均勻性增厚,切面呈患者女,38歲,孕6產(chǎn)4主因月經(jīng)周期縮短,月經(jīng)量增多灰白色海綿狀改變,宮腔未見(jiàn)異常剖開(kāi)后壁凸出腫物及左側(cè)5年,加重20天,于2002年9月13日急診入院。包裹卵巢及輸卵管,內(nèi)見(jiàn)腦漿樣組織流出,剖開(kāi)左側(cè)骨盆漏斗患者既往月經(jīng)周期規(guī)律,經(jīng)量正常,痛經(jīng)(-)。5年前無(wú)韌帶,內(nèi)有瘤栓形成。常規(guī)送病檢,術(shù)后2天,術(shù)前病檢結(jié)果明顯誘因出現(xiàn)月經(jīng)周期縮短,經(jīng)期延長(zhǎng),經(jīng)量較前明顯增多。送檢組織中血管彌漫增生,血管間充血,血管周?chē)?xì)胞緊密排經(jīng)期伴下腹墜痛及腰骶部脹痛,曾在院外多次診治,效果不列,整個(gè)組織呈息肉狀,外皮有柱狀或立方上皮被覆?？紤]子佳。末次月經(jīng)2002年8月23日,陰道流血至入院,量多未見(jiàn)宮血管外皮瘤。術(shù)后病理診斷:①子宮體血管外皮肉瘤,有壞爛肉樣組織及水泡狀物排出,近3天出現(xiàn)頭暈眼花陰道大死,卵巢、輸卵管、韌帶及另送組織中均見(jiàn)侵犯轉(zhuǎn)移,肌間淋巴量流血故急診入院。既往體健無(wú)手術(shù)及外傷史無(wú)咳嗽咳管中有瘤栓;②宮頸黏膜慢性炎。痰,無(wú)明顯消瘦及體重減輕,大小便正常。2討論查體:B80/50mmHg,發(fā)育正常,營(yíng)養(yǎng)中。重度貧血貌。血管外皮瘤是一種起源于血管外皮細(xì)胞的腫瘤,它的生婦科檢查:外陰發(fā)育正常,婚產(chǎn)型。陰道內(nèi)有暗紅色血液,量物學(xué)行為可有良性,惡性之分,但其組織形態(tài)目前尚無(wú)定論多。宮頸肥大、光滑、質(zhì)硬。宮體約孕3個(gè)月妊娠大小,凸凹本瘤較為少見(jiàn),本瘤可發(fā)生于任何年齡組患者,男女性別的分不平,質(zhì)硬,活動(dòng)欠佳,觸痛明顯。于左側(cè)附件區(qū)可觸及約布無(wú)明顯差異。本瘤可發(fā)生于身體的任何部位,但以下肢、腹4cm×3cm大小腫物囊性感,與子宮關(guān)系密切,右附件區(qū)未觸膜后和頭頸部為最常見(jiàn)。多見(jiàn)于深部肌肉深筋膜甚至累及及明顯異常。骨膜,發(fā)生于子宮者罕見(jiàn),臨床未見(jiàn)報(bào)道過(guò)。該瘤的病程長(zhǎng)短輔助檢查:①B超:宮體前位,體積增大,輪廓不規(guī)則,宮不一,從數(shù)年至數(shù)十年,生長(zhǎng)緩慢,臨床上早期多表現(xiàn)為無(wú)痛壁回聲不均勻。在后壁可見(jiàn)大小約5.2cm×3.3m實(shí)性包塊,性腫塊,隨著病變的發(fā)展,周?chē)K器可因腫瘤體積的增大而產(chǎn)邊界欠清,內(nèi)回聲不均勻可見(jiàn)片狀液區(qū)回聲。另在前壁近宮生壓迫或浸潤(rùn)的癥狀;子宮肉瘤罕見(jiàn),是一種惡性程度極高的頸處見(jiàn)2.4cm×2.2cm低回聲包塊,邊界欠清。超聲診斷:子女性生殖器官腫瘤,子宮肉瘤是來(lái)源于子宮肌層或肌層內(nèi)的宮多發(fā)性實(shí)性包塊(考慮子宮肌瘤);②血常規(guī):GB79g/L其結(jié)締組織或子宮內(nèi)膜的結(jié)締組織約占子宮惡性腫瘤的2%余各項(xiàng)值正常;③胸部X線片:未見(jiàn)異常。4%,好發(fā)于絕經(jīng)后的婦女,子宮肉瘤最主要的突出癥狀,陰入院診治:①子宮多發(fā)肌瘤;②失血性休克;③失血性貧道不規(guī)則流血,量或多或少,下腹部包塊迅速增大,晚期肉瘤一血。入院后積極治療休克,2小時(shí)后患者血壓10070mmHg向周?chē)M織浸潤(rùn),并壓迫周?chē)M織或臟器,即引起下腹痛及腰一般情況好轉(zhuǎn),急行清宮術(shù),術(shù)中探宮腔13cm感宮腔內(nèi)平滑痛等,當(dāng)壓迫直腸、膀胱時(shí)即出現(xiàn)相關(guān)臟器被壓迫的癥狀,癌刮出少許內(nèi)膜組織送病檢(本院無(wú)快速冰凍切片)。于入院第轉(zhuǎn)移至腹膜或大網(wǎng)膜時(shí)可出現(xiàn)血性腹水,疾病后期,患者往往2天,患者陰道流血量又劇增,故急行全子宮切除術(shù),術(shù)中見(jiàn)有惡液質(zhì)、消瘦繼發(fā)性貧血等全身衰竭現(xiàn)象子宮增大約3個(gè)月妊娠大小,質(zhì)硬,于子宮后壁可見(jiàn)一約5cm本例患者就診時(shí)最主要的癥狀是月經(jīng)周期短,月經(jīng)量增×3cm大小腫物凸出,似漿膜下肌瘤但與宮壁界限不清,質(zhì)多和繼發(fā)性貧血,無(wú)明顯壓迫癥狀。發(fā)病年齡,臨床癥狀及體脆。左側(cè)輸卵管增粗約拇指狀變短,傘端與該側(cè)卵巢包裹形征完全與子宮肌瘤相似。該病例極少見(jiàn),致使入院時(shí)診斷有成育端,增大約5cm×4cm×3cm。左側(cè)骨盆漏斗韌帶增粗,呈誤,但術(shù)中發(fā)現(xiàn)有惡變傾向,故手術(shù)范圍選擇恰當(dāng),未延誤治黑紫色,左側(cè)主韌帶增厚,肉眼觀有惡變傾向。故行次療。該瘤易轉(zhuǎn)移至肺部,故應(yīng)常規(guī)行肺部X線攝片,術(shù)后常規(guī)化療。