2010年6月第12卷第3期湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)June 2010, Vol 12. No. 3Journal of Hubei University of Chinese Medicine29吡硫醇聚乙二醇前體藥物含量測定蔡波濤',王紅2,薛大權(quán)2,張圍字2(1.湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院20級碩士研究生湖北武漢430065;2.湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院湖北武漢430065摘要:目的摸索吡硫醇聚乙二醇前藥中吡硫醇的含量測定方法。方法以吡硫醇為對照品,用紫外分光光度計(jì)對其含量進(jìn)行了初步測定,測定波長為314m。結(jié)果吡硫醇濃度在288-23.02w/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為0.999;含量測定回收率為99.49%,RSD為115%(n=9)。結(jié)論采用紫外分光光度法測定吡硫醇聚乙二醇前藥中吡硫醇含量的方法簡便可行。關(guān)鍵詞:吡硫醇;單甲氧基聚乙二醇;前藥;紫外分光光度法;含量測定中圖分類號:R944.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1008-987X(2010)03-0029-02Determination of Pyritinol in Pyritinol PEG ProdrugsCAl Botao, WANG Hong, XUE Daquan, ZHANG WeiyuCollege of Pharmacy, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China)Abstract: Objective To explore the content determination of pyritinol in pyritinol PEG prodrugs. Methods Determined the pyritinolin pyritinol PEG prodrug by UV-spectrophotometry using pyritinol as comparison sample. Wavelength: 314nm. Results The content of thepyritinol solution showed a better linear relationship with the absorbance in the range of 2. 88-23 02 uy/mL, Correlation coefficient was0. 9999: The recovery rate was 99. 49% and the relative standard deviation was 1. 15%(n=9). Conclusion The method of determination isKeyword: Pyritinol; Methoxy polyethyleneglycol; Prodrugs; Ultraviolet spectrophotometry: Content determination吡硫醇主要用于治療阿爾茲海默病、腦血管疾患性癡呆腦震蕩或腦外傷后遺癥、腦炎及腦膜炎后遺癥等伴隨的頭暈脹痛、失眠、記憶力減退、注意力不集中、情緒變化等癥狀。臨床主要用其鹽酸鹽,分子式為C1H2N2O4S2·2HQ·H2O。但該藥對血管黏膜有刺激作用,易發(fā)生注射部位血管腫脹、疼痛、呈青紫色樹枝狀及注射部位乃至整個(gè)上肢皮膚水腫發(fā)硬、癢痛等不良反應(yīng)。該藥在臨床應(yīng)用過程中因其半衰期(t2)短口服給藥1天3次,很不方便,而其靜脈滴注時(shí),對血管有很強(qiáng)圖1吡硫醇聚乙二醇前藥結(jié)構(gòu)式的刺激作用產(chǎn)生疼痛病人難以耐受。筆者采用單甲氧基聚乙1材料二醇與吡硫醇合成前體藥物1。通過對目標(biāo)化合物的體外降11僅器解試驗(yàn)和刺激性試驗(yàn)的初步研究,顯示出一定的緩釋效果和島津紫外可見分光光度計(jì)Uv-1700; METTLER TOLEDO對注射部位及血管的刺激性有顯著減小的作用。筆者在參照電子天平(m00d-01mg):KQ-250B型超聲波清洗器(昆文獻(xiàn)"的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn),采用紫外分光光度法對吡硫醇山市超聲儀器有限公司)聚乙二醇合成的前體藥物(見圖1)含量測定進(jìn)行了方法學(xué)考1.2試藥單甲氧基聚乙二醇前藥(本實(shí)驗(yàn)室自制,批號:20080701,基金項(xiàng)目:湖北省自然科學(xué)基金資助課題(2007ABA213)。作者簡介蔡波濤(1980-),男湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院200級硬士研究生,E-mal; caibaotao163.cm通訊作者:王紅,女教授研究方向:新藥研究電話:13607160931,E一mnl:wanghonghbs2@yaho.com.cn湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2010年第12卷第3期20080702,20080703);吡硫醇對照品(含量:985%,水分:由于吡硫醇結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)醇羥基和兩個(gè)酚羥基(見圖1),不0.17%,批號:080519,上海新云化工有限公司提供);氫氧化鈉、可能是某一單一的化合物而是以吡硫醇一端醇羥基修飾為主鹽酸、磷酸二氫鉀均為分析純的一類前藥他們的共同特點(diǎn)都是在吡硫醇的結(jié)構(gòu)中以酯鍵的2方法與結(jié)果形式引入了mPEG,紫外最大吸收波長幾乎在同一位置。另外,2.1對照品溶液的制備考慮到吡硫醇分子的紫外吸收來源于其分子中的共軛結(jié)構(gòu),吡精密稱取吡硫醇對照品(批號:080519)14.63mg(折算成硫醇聚乙二醇前藥結(jié)構(gòu)中的其他結(jié)構(gòu)如mPEG在測定范圍內(nèi)不含吡硫醇14.39mg),置100mL容量瓶中,加0.1mo/ L NaOH溶會(huì)產(chǎn)生紫外吸收所以吡硫醇聚乙二醇前藥在該波長下的吸收解,稀釋至刻度可認(rèn)為僅僅是由其中的吡硫醇共軛結(jié)構(gòu)引起,吸收度大小與吡2.2供試品溶液的制備硫醇含量成正比。精密稱取吡硫醇聚乙二醇前藥適量置50mL容量瓶中,加3.2溶劑的選擇0.1mo/ L NaOH稀釋至刻度,得吡硫醇聚乙二醇前藥樣品溶液經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn)的篩選,選取01moL的鹽酸、0. Imol/L的2.3線性關(guān)系考察NaOH0.1m/L的pH72的磷酸鹽緩沖液作為溶劑進(jìn)行試驗(yàn),按照21項(xiàng)下方法,制備吡硫醇對照品溶液,分別精密取其中以Q.1mlL/L的鹽酸和0.1molL、pH7.2的磷酸鹽緩沖液作05、1.0、2.0、3.04.0m至25m容量瓶中,用0.1 mol/L NaOH為溶劑,吡硫醇和吡硫醇聚乙二醇前藥在200mm-400mm均有最稀釋至刻度,分別用紫外分光光度計(jì)在314mm波長處測定吸收大吸收,且吡硫醇聚乙二醇前藥的最大吸收波長相對于吡硫醇發(fā)度以吸收度對吡硫醇濃度線性回歸,得回歸方程為:A=生了紅移。而以0.1mo/L的NaOH作為溶劑,吡硫醇和吡硫醇0.0419c+0.0057,r=0.99結(jié)果表明,吡硫醇測定濃度在聚乙二醇前藥在同一波長處有最大吸收并且該溶劑也不會(huì)影響2.88-23.02μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。吡硫醇的基本結(jié)構(gòu),所以選取0.1m/ L NaOH作為溶劑。2.4精密度試驗(yàn)3.3波長的選擇將23項(xiàng)下“線性關(guān)系的考察”中的中間濃度溶液連續(xù)測稱取吡硫醇和吡硫醇聚乙二醇前藥用0.1moL的NaC定5次,記錄吸收度(A),相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為024%,結(jié)果配成一定濃度的溶液,于200m-400mm紫外掃描,吡硫醇和吡表明該儀器的精密度良好。硫醇聚乙二醇前藥均在313.6nm波長處有最大吸收,因此選取2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)檢測波長為314nm按22項(xiàng)下方法制備供試品溶液(批號:20080702),室溫保3.4結(jié)論存每隔2h測定1次吸收度,RSD為056%。結(jié)果表明:室溫采用紫外分光光度法測定吡硫醇聚乙二醇前藥中吡硫醇條件下,樣品溶液在&h內(nèi)保持穩(wěn)定含量的方法簡便可行2.6重現(xiàn)性試驗(yàn)參考文獻(xiàn)取同一批樣品(批號:20080702)5份,按22項(xiàng)下方法制備[1]李新芳古麗巴新,靜脈滴注鹽酸吡硫醇氯化鈉注射液引起的靜供試品溶液測定吸收度,計(jì)算含量,RSD為0.83%,表明本方脈炎[J]中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志,2006,23(2):173法重現(xiàn)性良好[2]孟繁娜唐星PH值對鹽酸吡硫醇水溶液穩(wěn)定性的影響[J].中2.7加樣回收率試驗(yàn)國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2007,27(3):400-402271對照品溶液的制備精密稱取10.18m吡硫醇對照品,折【3】張健,鹽酸吡硫摩藥理作用與臨床應(yīng)用[].中國熱帶醫(yī)學(xué),算成含吡硫醇10.01mg,置100mL容量瓶中,用0.lmo/ L NaOH2005,5(2):394-395溶解后稀釋至刻度,得0.1001mg/mL的吡硫醇對照品溶液[4]馬琪林,吡硫醇的藥理和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[].國外醫(yī)學(xué)藥學(xué)2.7.2回收率試驗(yàn):精密稱取吡硫醇聚乙二醇前藥置50mL容分冊,1992,19(5):278-280[5]王俊裴元英.用聚乙二醇修飾大分子藥物的研究進(jìn)展[J].中國量瓶中,分別加入對照品溶液2550、75mL,加0.1m/ L NaOH醫(yī)藥工業(yè)雜志,200435(11):696-701稀釋至刻度按紫外分光光度法測定吸收度。計(jì)算吡硫醇的含(6]陳濤,王進(jìn)佛江游,等,聚乙二醇前體藥物[.世界最新醫(yī)學(xué)信量得出回收率。結(jié)果:平均回收率為949%,RSD為1.15%。息文摘,2003,2(5):806-8102.8樣品含量測定[7] Doucet J, Cao ZH, MacLaren LA, et al Modifecation of xenoantigen on按22項(xiàng)下方法制備供試品溶液(批號:20080701porcine erythrocytes for zenotransfrion[J]. Surgery, 2004, 135(2):20080702、20080703),進(jìn)行測定,3批樣品含量結(jié)果分別為178-186.489%4.52%、4.50%。[8]張劍鋒魏東芝周雄等甲氨蝶呤-聚乙二醇偶聯(lián)物的合成及3討論其體外抗腫瘤活性[門]藥學(xué)學(xué)報(bào),2007,42(6):607-6103.1方法的選擇[9]中國藥典二部[S]2005吡硫醇藥物中具有大量共軛結(jié)構(gòu)體系,在紫外區(qū)有強(qiáng)吸收稿日期:200-09-10編輯:鄭曉屏收我們采用單甲氧基聚乙二醇(mPEG)修飾吡硫醇后得前藥