檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床2011年5月第8卷第9期 Lab med clin,May2011,Vol.8,No.91031論著全自動(dòng)酶法測(cè)定乙醇水平對(duì)急性乙醇中毒的診斷價(jià)值張德文,宋善勤,王修全(四川省自貢市第三人民醫(yī)院643020)摘要】目的探討全自動(dòng)酶法檢測(cè)血清中乙醇水平對(duì)急性乙醇中毒的診斷價(jià)值。方法采用乙醇酶法在美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特DXC800全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)40例健康對(duì)照者、20例急性乙醇中毒患者和40例醉灑駕駛司杋的血清♂醇水平。結(jié)果急性醇中毒患者及醉酒駕駛司機(jī)血清♂醇水平顯著高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論全自動(dòng)酶法能特異檢測(cè)血清中乙醇水平,對(duì)急性乙醇中毒的診斷和治療具有重要價(jià)值,并可用于司法鑒定,為判斷是否屬于“醉駕”提供了有力的法律依據(jù)【關(guān)鍵詞】酶法;乙醇;急性乙醇中毒DOI:10.3969j.issn.1672-9455.201.09.004文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1672-9455(2011)09-1031-02Diagnosis value of the detection of ethanol level on acute alcoholism by full-automatic enzymatic method ZHANG Dwen, SONG Shan-qin, WANG Xiu-quan(The 3rd people's Hospital of Zigong, Zigong, Sichuan 643020. China(Abstract] Objective To investigate the diagnosis value of the detection of ethanol level on acute alcoholismby full-automatic enzymatic method. Methods We used ethanol enzymatic method to test the serum ethanol level of40 health people, 20 patients with acute alcoholism and 40 drunken drivers on DXC800 automatic biochemistry analyzer. Results The serum ethanol levels of patients with acute alcoholism and drunken drivers were higher than theethanol level of the health control one, and the differences were statistically significant(P<0. 01). Conclusion TheH-automatic enzymatic method is a specific way to detect the serum ethanol level, and has the important value in di-agnosis and treatment of acute alcoholism, which can be used to determine the drunk driving in judicial expertise.[Key words] enzymatic method ethanol: acute alcoholism乙醇對(duì)飲用者可造成身體上多臟器的傷害,引起酒精性肝1.5校準(zhǔn)物采用原裝二水平校準(zhǔn)物,由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特病(ALD)、乙醇性糖尿病、乙醇性精神障礙等多種疾病,尤其公司提供是過量飲酒導(dǎo)致的急性乙醇中毒危害較大,最嚴(yán)重的急性乙醇1.6測(cè)定原理乙醇試劑用于以一種酶反應(yīng)速率法測(cè)定乙醇中毒可導(dǎo)致患者猝死。目前國(guó)際上乙醇濃度的檢測(cè)方法有化濃度。在此反應(yīng)中,乙醇脫氫酶(ADH)催化將乙醇氧化為學(xué)法、氣相色譜法和乙醇酶法,我國(guó)多采用氣相色譜法,酶法極乙醛,同時(shí)將煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原成NADH少有報(bào)道。本院從2009年4月開始引進(jìn)酶法檢測(cè)血清中乙醇系統(tǒng)監(jiān)測(cè)340mm的光吸收變化速率,由NADH引起的光吸收水平,現(xiàn)報(bào)道如下。變化速率與樣品中的乙醇濃度成正比,系統(tǒng)依此并根據(jù)一條兩1資料與方法點(diǎn)校正曲線計(jì)算并給出乙醇濃度?；瘜W(xué)反應(yīng)方程式:乙醇+1.1一般資料本研究分為3組:(1)健康對(duì)照組(40例),男NAD⊥ADH乙醛+NADH+H+性,身體健康,無嗜酒愛好,年齡27~48歲。(2)急性乙醇中毒1.7操作方法試劑裝載后進(jìn)行校正,血清樣品和質(zhì)控物裝組(20例),男性,年齡23~52歲,來自2009年4月至2010年載上機(jī)后按照系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作8月本院急診科的急診患者,包括飲酒嚴(yán)重過量導(dǎo)致乙醇中毒者和不明原因昏迷患者(經(jīng)搶救成功后證明屬飲酒嚴(yán)重過量導(dǎo)1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,采用t檢驗(yàn)致的昏迷)。(3)醉酒駕駛組(40例),男性,年齡20~50歲,來自自貢交警巡查或交通事故疑為醉酒駕駛司機(jī),經(jīng)簡(jiǎn)易吹氣法測(cè)定乙醇超標(biāo)健康對(duì)照組、急性乙醇中毒組和醉酒駕駛組血清乙醇水平1.2標(biāo)本采集使用非乙醇?xì)⒕翰潦渺o脈穿刺部位,用真見表1,急性乙醇中毒組乙醇水平顯著升高,與健康對(duì)照組比空分離膠管及配套采血針采集靜脈血2管(一管用于檢測(cè),另較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);醉酒駕駛組血清乙醇水平與健康對(duì)照組比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)一管用于貯存),采血后立即顛倒混勻8次,并直立放置,標(biāo)記表13組血清乙醇水平比較(mmol/L)好被采集者姓名,醉駕組標(biāo)本當(dāng)場(chǎng)貼封條封管,由自貢市聯(lián)立引法中心專人送檢。標(biāo)本置于4~8℃加鎖冰箱貯存。組別血清乙醇水平3試劑與儀器試劑盒為原裝進(jìn)口,由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特健康對(duì)照組0.94±0.5公司提供;儀器為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特 Unicell DXC800全自動(dòng)急性乙醇中毒組73.97±15.79生化分析儀。醉酒駕駛組34.19±19,751.↓質(zhì)控物質(zhì)控物由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司提供,雙水平注:與健康對(duì)照組比較,P<0.01液體質(zhì)控血清即中值11批號(hào)為465993,高值L2批號(hào)為465996。質(zhì)控物開瓶后,在2~8℃冰箱貯存可以保持穩(wěn)定303討論d,用于監(jiān)控乙醇檢測(cè)系統(tǒng)的可靠性和總體性能乙醇的分析是醫(yī)院急救室經(jīng)常需要的,在大多數(shù)情況下分1032檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床2011年5月第8卷第9期 Lab med clin,May201l,vol.8.No.9析必須迅速,全自動(dòng)酶法檢測(cè)血清中乙醇水平速度快,從采集(P<0.01),該組乙醇最高值達(dá)93.16mmol/L。20例急性乙標(biāo)本到出報(bào)告僅需15~30min;準(zhǔn)確性好,用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾醇中毒患者經(jīng)及時(shí)對(duì)癥搶救治療,全部治愈。由此可見,全自特 Unicel@ DXC800全自動(dòng)生化分析儀酶法測(cè)定血清中乙醇動(dòng)酶法能特異檢測(cè)血清中乙醇水平,對(duì)急性乙醇中毒的診斷和水平,其檢測(cè)系統(tǒng)(儀器、配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品)2004年獲治療具有重要價(jià)值美國(guó)食品和藥物管理局認(rèn)證,2005年獲歐洲質(zhì)量認(rèn)證,并通過乙醇水平檢測(cè)在涉及毒品或?yàn)E用化學(xué)品的醫(yī)療與法律案了ISO2000901質(zhì)量認(rèn)證,2007年在中國(guó)注冊(cè)。文獻(xiàn)報(bào)道酶件中較普遍,乙醇本身即可致命,而且還可以引起各種事故法檢測(cè)血清中乙醇水平是完全特異的。有研究報(bào)道,酶法檢40例醉酒駕駛司機(jī)血清乙醇水平與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)測(cè)乙醇水平精確度高,重復(fù)性好。計(jì)學(xué)意義(P<0.01),該組乙醇最高值達(dá)83.76mmol/L。據(jù)乙醇屬揮發(fā)性物質(zhì),標(biāo)本采集、檢測(cè)要求較高,標(biāo)本采集應(yīng)新聞媒體報(bào)道2010年8月15日至9月15日僅一個(gè)月時(shí)間中用真空采血法,分離血清后要求迅速測(cè)定,取校準(zhǔn)物和質(zhì)控液國(guó)因酒后駕駛發(fā)生的交通事故320起,造成118人死亡,醉酒時(shí)為避免反復(fù)開蓋導(dǎo)致乙醇揮發(fā),最好采用注射器抽取少量液駕駛對(duì)社會(huì)造成嚴(yán)重危害,引起國(guó)家高度重視,2010年9月2體注入樣品杯中進(jìn)行校標(biāo)和室內(nèi)質(zhì)控。本研究發(fā)現(xiàn),標(biāo)本離心日,我國(guó)醉酒駕駛獲罪已寫入刑法修正案。全自動(dòng)酶法能準(zhǔn)確后置于4~8℃冰箱貯存25d不開蓋檢測(cè)結(jié)果不受影響,開蓋地測(cè)定醉酒駕駛司機(jī)血清中乙醇水平,為司法部門處罰“醉駕后10min血清中乙醇水平下降8.47%。因此,用生化分析儀提供了有效證據(jù)。測(cè)定血清中乙醇水平時(shí)不能同時(shí)測(cè)定其他生化項(xiàng)目,只能用專門的時(shí)間(如早上保養(yǎng)儀器后)立即測(cè)定乙醇樣品同時(shí)測(cè)定高參考文獻(xiàn)值和低值質(zhì)控血清。急診測(cè)定血清中乙醇水平時(shí),可用Uni[1] Peacher wa. The Evaluation of a stabilized Liquid Chen-ce1DXC800生化儀的急診功能優(yōu)先測(cè)定istry control[J]. Clin Chem, 1979, 25: 1119-1129急性乙醇過量的癥狀是從機(jī)體反射時(shí)間減慢導(dǎo)致的中樞2]張秀明,李健齋,魏明竟,等.現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)[M].神經(jīng)系統(tǒng)阻抑,嚴(yán)重過量可進(jìn)一步發(fā)展為昏迷和死亡。血清中北京:人民軍醫(yī)出版社,2001:1165乙醇水平達(dá)1000μg/L(21.7mmol/L)為中毒水平,當(dāng)達(dá)到3]林其燧,文慶成,高崇玄,等.臨床化學(xué)診斷方法大全3000μg/L(65.1mmol/L)時(shí)常伴有昏迷發(fā)生,當(dāng)達(dá)到87M].北京:北京大學(xué)出版社,1990:276-278mmol/L,患者可出現(xiàn)呼吸、循環(huán)麻痹而危及生命。臨床醫(yī)生[4]陸再英,鐘南山,謝毅,等.內(nèi)科學(xué)[M].7版.北京:人民衛(wèi)可根據(jù)急性乙醇中毒患者檢測(cè)的乙醇水平結(jié)果有針對(duì)性地使生出版社,2009:950-951用藥物進(jìn)行輸液治療,對(duì)最嚴(yán)重的急性乙醇中毒患者可以采用5]劉建,吳二兵,徐海波.以頭暈為主訴的慢性乙醇中毒20血液透析治療以減少乙醇的負(fù)載。本研究用全自動(dòng)酶法檢例臨床分析[J].交通醫(yī)學(xué),2009,23(4):380-382測(cè)20例急性乙醇中毒患者血清乙醇水平,結(jié)果為(73.79士15.79)mmol/L,顯著高于健康對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(收稿日期:2010-12-09)(上接第1030頁(yè))值,對(duì)于反應(yīng)機(jī)體的高凝狀態(tài),避免血栓形成,準(zhǔn)確測(cè)定血漿成;(2)加速動(dòng)脈硬化的發(fā)生;(3)通過血壓和血黏度減慢血流Fib含量非常重要。通過本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,在日常工作中,應(yīng)速度[2用全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)口服華法令患者血凝時(shí),當(dāng)用 PT-der法目前全自動(dòng)血凝儀測(cè)定Fib方法主要有兩種,第一種是測(cè)得Fib值在2~4g/1時(shí),可以直接報(bào)告;當(dāng)Fib不在此范圍lauss法,原理是將血漿用稀釋液稀釋后,加入足量的牛凝血時(shí),需要用 Clauss法檢測(cè)。這樣既能做到滿足臨床需要,又能酶,使Fb轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝固,儀器通過測(cè)定散射光的變化,節(jié)省時(shí)間,提高工作效率確定凝固時(shí)間,通過定標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,計(jì)算出Fib含量,其凝固時(shí)間和Fb含量呈負(fù)相關(guān),當(dāng)Fib過高和過低時(shí)要求改變參考文獻(xiàn)血漿稀釋倍數(shù)。此法檢測(cè)的是Fib的凝血功能,受黃疸、溶血[1]楊寶峰,蘇定馮.藥理學(xué)[M.6版.北京:人民衛(wèi)生出版等因素的影響較小,結(jié)果較可靠,是美國(guó)國(guó)家臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)推薦的參考方法,但是異常Fib血癥由于存在大量無功能2]楊莉.纖維蛋白原與血栓性疾病[].中華血液學(xué)雜志,的Fib,用 Clauss法測(cè)定可使結(jié)果明顯偏低。纖維蛋白原降解1999,20(3):163-165產(chǎn)物中碎片X(X)和碎片Y(Y)存在以及存在肝素等抗凝血也[3]郭惠,王忠誠(chéng),蔣麗莉.三種方法測(cè)定血漿纖維蛋白原的影響 Clauss法的測(cè)定結(jié)果3。 PT-der法測(cè)定Fib其原理是結(jié)果比對(duì)[J.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,28(3):193-195當(dāng)PT測(cè)定完成時(shí),Fib均變成纖維蛋白,其形成的濁度與Fib[4]彭黎明,曾著黎.血漿纖維蛋白原測(cè)定方法[J].檢驗(yàn)醫(yī)含量成正比,因此無需任何試劑即可由產(chǎn)生的濁度,通過標(biāo)準(zhǔn)學(xué),2004.19(3):163品定標(biāo),用終點(diǎn)法或速率法算出Fib含量。 PT-der法經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便、快速; Clauss法試劑較貴、費(fèi)時(shí)(收稿日期:2010-12-30)總之,口服華法令抗凝患者除了測(cè)定PT及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比