《廣州食品工業(yè)科技》Guangzhou Food Science and TechnologyVol.20 No.2(總80)中圖分類號(hào): TS202.3; 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A;文章篇號(hào): 1007- 2764( 2004) 02- 0081- 032抗疲勞復(fù)方添加劑方劑設(shè)計(jì)及其功效梁俊榮張西臣*柳增善劉慶雙(軍需大學(xué)軍事獸醫(yī)系，長春130062)摘要: 本實(shí)驗(yàn)以螺旋藻、維生素E、L- 肉堿、二十八醇、?；撬釣樵?，采用正交試驗(yàn)方法進(jìn)行了抗疲勞復(fù)方添加劑方劑設(shè)計(jì)，得到四個(gè)較優(yōu)配方;通過游泳耐力和生化指標(biāo)的測(cè)定研究了四個(gè)較優(yōu)配方的抗疲勞效果。結(jié)果表明，四個(gè)較優(yōu)配方均能顯著延長小鼠游泳時(shí)間，降低血尿素氮和血乳酸含量，具有明顯的抗疲勞效果。關(guān)鍵詞:功能性食品;抗疲勞;添加劑;螺旋藻現(xiàn)代社會(huì)中疲勞人群的比例不斷擴(kuò)大,抗疲勞功能性食品添加劑的設(shè)計(jì)研究具有重要意義。螺旋藻被1.4 多因素正交試驗(yàn)12)世界糧農(nóng)組織譽(yù)為“超級(jí)營養(yǎng)食品”不僅富含多種維設(shè)定五個(gè)因素、兩個(gè)水平(見表1),按L16 (215)生素及微量元素，而且含有藻藍(lán)蛋白和螺旋藻多糖等正交表(見表2)進(jìn)行正交試驗(yàn)，每- -處理組合做6活性成分，具有良好的抗疲勞功能"。本研究以螺旋個(gè)重復(fù)。以游泳耐力為觀察指標(biāo)，確定螺旋藻、維生藻、L肉堿、二十八醇、牛磺酸、維生素E為原料，素E、L-_肉堿、 ?；撬帷⒍舜嘉鍌€(gè)因素的主效應(yīng)采用正交試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)配方，并通過游泳耐力和生化及其交互作用。通過正交試驗(yàn)結(jié)果分析，設(shè)計(jì)抗疲勞指標(biāo)的測(cè)定對(duì)所設(shè)計(jì)的配方進(jìn)行抗疲勞效果研究,以復(fù)方添加劑配方。.期獲得較為理想的抗疲勞功能性食品添加劑方劑。各因素的劑量水平設(shè)計(jì)依據(jù)如下:我國GB2760-1996 (1997 增補(bǔ)品種)規(guī)定肉堿的成人推薦用量為1材料與方法300mg/天，維生素E為30mg/天，牛磺酸在食品中的1.1供試藥品強(qiáng)化量-般為0.2%-0.4%。成人體重以60kg計(jì)，小鼠螺旋藻為江蘇賜百年?duì)I養(yǎng)食品有限公司生產(chǎn)的食食量以200g/kg 天計(jì)，小鼠的兩個(gè)劑量分別設(shè)定為人用級(jí)鈍頂螺旋藻原粉，二十八醇(純度為90%和L-的5倍、10 倍,據(jù)此推算出1kg飼料中所需的添加劑肉堿(純度高于999購自北京恒天易德化工有限公量。司，維生素E (純度70%購自江蘇春之谷生物制品有螺旋藻的兩個(gè)劑量水平分別為0g/kg 飼料、限公司，?；撬?純度高于999購自湖北富馳化工25g/kg飼料,二十八醇的兩個(gè)劑量水平分別為8mg/kg醫(yī)藥股份有限公司。飼料、20mg/kg 飼料。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素水平見1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及給藥方式表118-22g昆明種雄性小白鼠，軍需大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中1.5 配方的抗疲勞功能試驗(yàn)心提供。在22士1°C溫度下飼養(yǎng)，自由采食飲水，每正交試驗(yàn)僅以游泳耐力為指標(biāo)，只能對(duì)配方的天光照8h。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。將藥品混入飼料中，抗疲勞效果進(jìn)行初步觀察。故對(duì)所設(shè)計(jì)的配方通過游以飼喂法給藥兩周，測(cè)定各有關(guān)指標(biāo)。泳耐力、血乳酸、血尿素氮(BUN)的測(cè)定進(jìn)一步進(jìn)行1.3 游泳耐力的測(cè)定抗疲勞功能試驗(yàn)以精選配方，確定最優(yōu)配方。將小鼠放入25士1C的水中，水深為30cm水面試驗(yàn)設(shè)1個(gè)對(duì)照組和若干個(gè)試驗(yàn)組，每組30只面積為100cm*50cm以小鼠自游泳開始至沉入水底無小鼠。給藥兩周后，每組各取10只測(cè)游泳耐力;另取力上浮的時(shí)間作為游泳時(shí)間。游泳時(shí)的室溫控制在10只置于水溫30土1C水中游泳90nin,游泳后休息本課題為，總后軍需部資助項(xiàng)目60nin拔眼球采血，用二乙酰-肟法測(cè)BUN剩余的收稿日期: 2004 02- 2510只小鼠在尾根部負(fù)荷5%體重鉛皮,同樣條件下游泳作者簡介: 1964+, 女河北北方學(xué)院副教授，在讀碩土，主要從事動(dòng)物生10ni n,游泳后中國煤化工生物工程技術(shù)物化學(xué)及功能性食品研究。開發(fā)中心生產(chǎn)YHCNMHG1乳酸。8.《廣州食品工業(yè)科技》Guangzhou Food Science and TechnologyVol.20 No.2(總80)表1正交試驗(yàn)的因子 與水平結(jié)果可知，螺旋藻、二十八醇、L-肉堿是影響游泳耐力Table 1 Factors and levels of the orthogonal test的關(guān)鍵因素，且均以水平2為優(yōu);其它試驗(yàn)因子及各螺旋藻維生素E L_肉堿?；撬?二十八醇因子之間的交互作用對(duì)游泳耐力的影響均未達(dá)到顯著(A)(B)(C)D)(性水平，取水平1或水平2均可。因此水平選優(yōu)的結(jié)水平10825400果為: ABGDE2、 ABGDE2、 AB:CDE2 與ABGDE2o水平2508002(四個(gè)較優(yōu)配方中，ABGD.Ez (2號(hào))和ABCDE2 (3注:螺旋藻為g/kg，其它為ng/kg號(hào))分別是正交表中12號(hào)和15號(hào)處理組合，且其游泳時(shí)間在16 種處理組合中分居第一、第二位，配方2結(jié)果ABCDE、(1號(hào))與ABGDEz (4號(hào))在正交表中沒2. 1正交試驗(yàn)結(jié)果及分析有出現(xiàn)。見表2、表3、表4。從方差分析結(jié)果和直觀分析表2游泳耐力正交 試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Results of the orthogonal test實(shí)驗(yàn)69+101112131415x號(hào)B AxBAxC BxC DxE)AxDBxDCxECxDBxEAxEE264302340300295285293523543424163240516371表3游泳耐力正交試驗(yàn)結(jié)果直觀分析表4游泳耐力正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析Table 3 Direct analysis on results of the orthogonal testTable 4Variance analysis on results of the orthogonal test列號(hào)T2XX2_R變異來源df SSMSFo.cs F.o11(A)14568 17478 303.5 364. 160.6A88209 88209 22.85** 3.95 6.932(B)15924 16122 331.8 335.94.29610 29610 7.67*3.95 6.933(AxB) 16026 16020 333.8 333.80.06435 6435 1.67 3.95 6.934(C)15180 16866 316.3351.435.1CxE413407 3.95 6.935(AxC) 16050 15996 334.4333.3-1B39609 39609 10.26** 3.95 6.936 (BxC) 16074 15972 334.9 332.8實(shí)驗(yàn)誤差90 347523 38617 (DxE)15900 16146 3313336.45.總變異95 5136608D)15630 16416 325.6 342.0 16.4注: **表示 P<0. 019 (AxD)16116 .15930 335.8-3.2.2 配方的抗疲勞試驗(yàn)結(jié)果10(BxD)16032 16014 334.0333.6 -0.4四個(gè)較優(yōu)配方的抗疲勞試驗(yàn)結(jié)果見表5。其中1.11(CxE) 16338 15708 340.4 327.3 -13.1組為對(duì)照組，2、 3. 4 5組分別為四個(gè)配方組。與對(duì)12(CxD) 16032 16014 334.0 333.6-0.4照組相比，四個(gè)配方均能顯著延長小鼠游泳時(shí)間，明13(BxE) 15978 16068 332.9 334.81.顯降低小鼠游泳后巾乳酸和血尿素氣含量。根據(jù)《保14(AxE) 16098 15948 335.4332.3-3.1健食品功能學(xué)中國煤化工關(guān)規(guī)定，可以15(E)15048 16998 313.5 354. 140.6認(rèn)為四個(gè)較優(yōu)MHCNMH用.四個(gè)配方.《廣州食品工業(yè)科技》Guangzhou Food Science and TechnologyVol.20 No.2(總80)組間各觀察指標(biāo)差異均不顯著,且測(cè)定結(jié)果非常相近，藻多糖和藻藍(lán)蛋白均為免疫促進(jìn)劑，具有提高脾臟指與23、4號(hào)配方相比，1號(hào)配方由于?；撬岷途S生數(shù)、刺激脾淋巴細(xì)胞增殖、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力、素E用量較少，成本較低。因此，綜合考慮抗疲勞效促進(jìn)抗體產(chǎn)生等作用。L肉堿是線粒體膜.上脂肪酸的果與成本，認(rèn)為1號(hào)方劑為最佳方劑。唯一載體，可促進(jìn)脂肪酸氧化供能。長時(shí)間運(yùn)動(dòng)時(shí)，表5較優(yōu)配方 抗疲勞功能試驗(yàn)結(jié)果脂肪酸分解加快，對(duì)肉堿的需要量增加，外源補(bǔ)充肉Table 5 Results of antifatigue function of the four optimized formulas堿可減少運(yùn)動(dòng)中糖的消耗，有利于較長時(shí)間維持血糖組別n方劑組成游泳時(shí)間血乳酸 血尿素 氮恒定，提高機(jī)體耐力6。二十八醇可提高糖原蓄積能(min)mg/d)(mg/d)力、強(qiáng)化心臟機(jī)能、增加運(yùn)動(dòng)中氧的供應(yīng)。由此可知，1 10219+77.1 62.5+15.4 43.7+ 5.61方劑中的幾種成分能通過增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能和抗氧化2 10 A_BIC2D1E2 400+80.0*39.4+17.132.8+7.18”能力、促進(jìn)脂肪酸氧化供能、提高糖原儲(chǔ)備等途徑增10 AxBrC:D2E2 390+63.2*42.0+13.8* 33.51+6.02*強(qiáng)機(jī)體的抗疲勞能力。4 10 A_B2C2D.E2 403+73.9* 44.0+15.0* 31.6+7.50*4結(jié)論10 A2B2C2D2E2 399+85.4**41.7+16.5* 32.0+7.16*注: **表示P<0.01四個(gè)較優(yōu)配方均有良好的抗疲勞功能,其中1號(hào)最佳。.3討論參考文獻(xiàn)長時(shí)間運(yùn)動(dòng)及強(qiáng)體力活動(dòng)中，由于生物氧化加快,自由基生成增多，使線粒體結(jié)構(gòu)和功能受損。增強(qiáng)機(jī)侯建設(shè)，薛風(fēng)照，莫文貴.螺旋藻的主要生理調(diào)節(jié)功能[].體抗氧化能力可以推遲疲勞的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)方劑設(shè)計(jì)食品研究與開發(fā)，2001, 22 (1): 31-34中所選用的原料螺旋藻、維生素E、?；撬峋性鰪?qiáng)2李春喜，王文林主編生物統(tǒng)計(jì)學(xué)(M.北京:科學(xué)出版社，抗氧化能力的作用。螺旋藻多糖能增強(qiáng)谷胱甘肽過氧1997. 198-204化物酶(GSH-Px) 和超氧化物歧化酶(SOD)活性，左紹遠(yuǎn)云南產(chǎn)螺旋藻抗氧化抗疲勞作用實(shí)驗(yàn)研究[].中降低組織細(xì)胞內(nèi)丙二醛(MDA)含量l3。已知抗氧化國生化藥物雜志，1995， 16 (6): 255-257劑的抗氧化性取決于它們捕捉自由基時(shí)所產(chǎn)生的抗氧4 Estetbauer H, Stiegl G, Puhl H, et al. Continuous monitoring化源性自由基的穩(wěn)定性4), Ve自由基比較穩(wěn)定且不易o(hù)f oxidation of human LDL in vivo[J]. Free Radic Res與其他物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，可有效清除自由基，阻斷其對(duì)Commun, 1989,6:67-76線粒體的破壞作用。牛磺酸是- 種條件性必須氨基酸Chesney RW, Helms RA, Christensen M, et al. The role of[5)，可維持大鼠力竭運(yùn)動(dòng)后心肌線粒體谷胱甘肽taurine in infant nutition[]. Adv Exp Med Biol,(GSH)含量，增強(qiáng)SOD活性，降低MDA含量。免1998.442:463-476疫系統(tǒng)的協(xié)調(diào)平衡被打破是疲勞發(fā)生的重要原因之6曹勁松;王曉琴. 食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑[M]北京:中國輕工業(yè)出- -，增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能是抗拒疲勞的重要途徑。螺旋版社，2002. 154-155Study on the Design and Effect of Antifatigue Functional Food CompoundAdditive FormulasLiang Junrong, Zhang Xichen, Liu Zengshan, Liu Qingsong(Department of Veterinary Medicine, Quartermaster University of PLA, Changchun 130062)Abstract: Antifatigue functional food compound additive formulas composed of spirulina, vitamin E, L-carnitine, taurine andoctocosanol were designed by using orthogonal design method. Four optimized formulas were obtained by analysis of results of the orthogonaltest. The antifatigue effect of the four optimized formulas was studied by swimming test and detection of biochemical indexes. The resultsshowed that all of them could improve the swimming performance of mice, decrease the content of blood urea nitrogen (BUN) and blood lacticacid. It can be concluded that all of the four formulas can greatly enhance antifatigue fun中國煤化工xd nles.Key words: Functional food; Antifatigue; Compound additive; SpirulinaYHCNM HG8.