學(xué)分子生物學(xué)雜志,2006,3(4):245249 J Med Mol Biol,2006,3(4):245-249院士述評(píng)治療性抗體的改造沈倍奮軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京市,100850沈倍奮,中國(guó)工程院院士,軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所研究員,博士生導(dǎo)師。中國(guó)人民解放軍分子免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任。現(xiàn)任中華醫(yī)學(xué)會(huì)副會(huì)長(zhǎng),中國(guó)發(fā)明家學(xué)會(huì)副理事長(zhǎng)。從事單克隆抗體和基因工程抗體的研究和應(yīng)用多年,近年來與不同學(xué)科的專家合作致力于基于抗原一抗體相互作用的立體結(jié)構(gòu)信息設(shè)計(jì)新功能分子的研究。在國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表論文200余篇,主編專著4部?！菊渴袌?chǎng)上已有18個(gè)被FDA批準(zhǔn)的單克隆抗體,它們用于治療如腫瘤、移植排斥、自身免疫病、病毒感染等人類疾病。治療性抗體代表了生物制藥業(yè)發(fā)展最快的領(lǐng)域之一。隨著技術(shù)的發(fā)展,各種形式的工程抗體被構(gòu)建來改善它們的特性和效能,包括:鼠抗體人源化,提高生物學(xué)活性,如親和力成熟,改進(jìn)效應(yīng)功能,改善藥代動(dòng)力學(xué)。文章評(píng)述了這一領(lǐng)域的最新進(jìn)展,同時(shí)也討論了工程抗體的免疫原性和親和力【關(guān)鍵詞】單克隆抗體;治療性抗體;基因工程抗體;抗體人源化【中圖分類號(hào)】R392.116Improvement of Therapeutic AntibodiesInstitute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing, 100850,ChinaAbstract] In the market, there are eighteen monoclonal antibodies approved by the FDA. Theyhave been used to treat human disease, such as cancer, transplant rejection, autoimmudisease..&tiviral prophylaxis and so on. The therapeutic antibodies represent one of the fastest growing areas ofthe biopharmaceutical industry. With the technology development, a diversity of engineered antibodyforms have been created to improve their characterization and efficacy, including humanization ofmurine antibodies, enhancing their biological activities such as affinity maturation, improvement ofeffector functions, and altering pharmacokinetics. This review summarized recent developments inthis field, also discussed the immunogenicity and affinity of engineered antibodiesKey words] monoclonal antibody; therapeutic antibody; engineered antibody; humanized anti-bod治療性抗體是可以用來治療疾病的抗體,因此中最重要的一大類,也是世界生物工程制藥業(yè)的支也稱它們?yōu)榭贵w藥物。截至2005年5月,美國(guó)柱產(chǎn)品之一。FDA已經(jīng)批準(zhǔn)18個(gè)抗體藥物,主要用于治療腫抗體作為治療性藥物已有上百年的歷史。當(dāng)時(shí)瘤、自身免疫性疾病、病毒感染和器官移植時(shí)的排主要用抗血清進(jìn)行治療,由于其成分太復(fù)雜、多斥反應(yīng)等。同時(shí)有100多種治療性抗體正在進(jìn)行變,而且是異源蛋白,在治療時(shí)會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重副作臨床試驗(yàn),500多種抗體處于臨床前研究。2003~用中國(guó)煤化工世,它是一種均一2004年抗體藥物銷售增長(zhǎng)48.1%,突破100億美性好CNMHG抗原決定簇的抗元。在以后幾年里,抗體藥物可能以更快的速度增體。1982年,Lewy制備了針對(duì)一個(gè)B淋巴瘤患者長(zhǎng),預(yù)計(jì)到2010年可達(dá)到300億美元2。從抗體瘤細(xì)胞的抗獨(dú)特型單克隆抗體,對(duì)該患者的治療取藥物的發(fā)展速度來看,目前它已成為生物技術(shù)藥物得很好的療效。這一結(jié)果引起了人們對(duì)單抗用于治沈倍奮.治療性抗體的改造療產(chǎn)生了極大熱情和期望,單抗被稱之為“魔維結(jié)構(gòu)確定抗體高變區(qū)中與抗原結(jié)合的關(guān)鍵氨基彈”。但事實(shí)并非如此,以后試用的一些抗腫瘤單酸,然后將這些決定特異性的關(guān)鍵氨基酸移植到相抗并沒有達(dá)到預(yù)期的效果。1986年,美國(guó)FDA批匹配的人抗體相應(yīng)位置上。另一種常用的人源化方準(zhǔn)抗CD3單抗OKT3用于抗移植排斥反應(yīng);1995法是表面重塑技術(shù),即鼠抗體框架區(qū)表面氨基酸的年,歐洲上市17-1A鼠單抗治療大腸癌。這些單抗“人源化”,通過鼠和人抗體可變區(qū)立體構(gòu)象疊的臨床應(yīng)用顯示出兩個(gè)方面的主要問題:鼠抗體雖合比對(duì),尋找合適的人抗體模板,將鼠Fv段表面然對(duì)靶抗原是非常特異的,但它不能激活相應(yīng)的人暴露的框架區(qū)殘基中與人Fv不同者改為人源的氨的效應(yīng)系統(tǒng),如抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用基酸,達(dá)到Fv的表面殘基人源化,使免疫原性降(ADCC)、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)等;此低,由于不影響Fv的整體空間構(gòu)象,所以仍保留外,鼠抗體作為外源蛋白進(jìn)入人體,會(huì)使人體免疫與抗原的結(jié)合能力。系統(tǒng)產(chǎn)生應(yīng)答,即產(chǎn)生人抗鼠抗體( human anti20世紀(jì)90年代,抗體庫(kù)技術(shù)的出現(xiàn)為抗體人mouse antibody,HAMA),而且異源蛋白在人體內(nèi)源化和人源抗體的制備開辟了新途徑41。該技很快被清除,即半壽期很短4。因此,人們利用術(shù)將PCR擴(kuò)增、抗體片段在大腸桿菌中功能性表重組DNA技術(shù)來解決上述問題561。達(dá)和噬菌體展示技術(shù)結(jié)合起來,在體外模擬體內(nèi)的抗體生成過程。具體是利用PCR方法將B細(xì)胞中1抗體人源化改造所有抗體基因釣出來,克隆到載體上,使之表達(dá)于最早出現(xiàn)的人源化抗體是人-鼠嵌合抗體,將噬菌體表面,構(gòu)建成噬菌體抗體庫(kù),然后用抗原篩鼠抗體可變區(qū)基因片段連接到人抗體恒定區(qū)基因選出表達(dá)相應(yīng)抗體的噬菌體,經(jīng)擴(kuò)增、測(cè)序獲得特上,由于IgG類型的抗體穩(wěn)定性好,易純化和保異性抗體基因。如果B細(xì)胞來源于人外周血,則存,因此嵌合抗體通常用凵gG型。人lgG有4個(gè)亞可得到人抗體。也可以通過合成抗體庫(kù)獲得人抗類,其中IgCI和lgC3亞類能結(jié)合補(bǔ)體,因此需要體。該技術(shù)基于對(duì)已有人抗體的序列信息進(jìn)行聚類CDC效應(yīng)來殺傷靶細(xì)胞的嵌合抗體采用IgCl型恒分析后,將可用的胚系基因及所有重排的序列進(jìn)行定區(qū)。一般嵌合抗體的人源化程度可達(dá)70%。分組,所有序列中95%以上可歸為14個(gè)亞組,其進(jìn)一步人源化的方法很多,最早是CDR移植,將中7個(gè)VH亞組、4個(gè)V和3個(gè)V亞組,亞組的鼠抗體的互補(bǔ)決定區(qū)( complementarity determining每個(gè)成員之間都有高度同源性。因此,可以設(shè)計(jì)、region,CDR)移植到人抗體的相應(yīng)部位,這樣人合成14個(gè)亞組各自通用的基因,作為構(gòu)建組合抗源化程度可達(dá)90%以上。但簡(jiǎn)單的CDR移植往往體庫(kù)的主干基因,然后與上述方法相似,用抗明顯降低抗原-抗體反應(yīng)的親和力,甚至喪失與抗原從合成抗體庫(kù)中篩選出相應(yīng)的抗體。原結(jié)合的能力。為了保留親本鼠抗體的親和力和特抗原表位定向選擇( epitope guided selection異性,一些支持 CDR loop構(gòu)型的鼠郾g框架區(qū)氨基的人源化方法就是利用抗體庫(kù)技術(shù)進(jìn)行鼠抗體人源酸也應(yīng)該進(jìn)行移植。隨著計(jì)算機(jī)模建技術(shù)的發(fā)展,化的又一種方法。將鼠抗體的輕鏈或重鏈文庫(kù)蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)中抗體和某些抗原晶體數(shù)據(jù)與人抗體的重鏈或輕鏈文庫(kù)配對(duì),構(gòu)建成“人的增多,在抗體人源化改造時(shí),可以根據(jù)人和鼠鼠雜合抗體庫(kù)”,篩選與抗原結(jié)合的克隆,分離獲CDRs間結(jié)構(gòu)相似性選擇人lg模板,挑選能支持移得人抗體的重鏈或輕鏈基因。再將它們與人的輕鏈植的鼠CDR與相應(yīng)抗原結(jié)合的模板進(jìn)行人源化改或重鏈文庫(kù)混合,用抗原篩選,就能得到與抗原結(jié)造。最近,也有人提出框架改組( framework合的特異性人抗體。為了獲得高親和力的抗體,往shuffling)的方法進(jìn)行抗體人源化改造,主要是往需要大容量抗體庫(kù)。噬菌體抗體庫(kù)需要通過生物將鼠抗體的6個(gè)CDR區(qū)以正確的讀框融合到人Ig體轉(zhuǎn)化。受轉(zhuǎn)化效率的影響,一般庫(kù)容不大。而核胚系框架中構(gòu)建成庫(kù),用相應(yīng)抗原篩庫(kù)。由于篩出糖體展示技術(shù)不需要通過體內(nèi)轉(zhuǎn)化。因此,構(gòu)建的的抗體框架來源于相匹配的CDR序列和結(jié)構(gòu),因抗體聲中可篩選高親和力此它保留了與抗原的最好結(jié)合,這種抗體接近于天抗體中國(guó)煤化工結(jié)構(gòu)生物學(xué)、生物然的全人抗體。如果抗原也有晶體結(jié)構(gòu),則可以采信息CNMH體人源化的方法層用特異性決定基( specificity determining residues,出不窮。SDR)移植的方法2),該方法首先需要分析待改目前人源抗體的制備主要有4種技術(shù):EB病造抗體的結(jié)合位點(diǎn),或通過抗原-抗體復(fù)合物的三毒轉(zhuǎn)化人B淋巴細(xì)胞、人x人雜交瘤技術(shù)、抗體醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志,2006,3(4):245249 J Med Mol Biol,2006,3(4):245-249247庫(kù)技術(shù)(包括噬菌體抗體庫(kù)、合成抗體庫(kù)、核糖行隨機(jī)突變,然后篩選高親和力的突變體。幾種方體展示等)和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,有關(guān)內(nèi)容已有多篇綜法結(jié)合起來可以大大提高抗體親和力22述2。據(jù) DATAMONITOR分析,抗體產(chǎn)業(yè)化發(fā)23改進(jìn)抗體的ADCC或CDC效應(yīng)展趨勢(shì)是:鼠源抗體到人-鼠嵌合抗體,到人源化在人類的效應(yīng)細(xì)胞上,存在幾種 FeaRs,它們抗體。特別是人源抗體,全人抗體的浪潮將在是FyRI(CD4)、FcyRⅡ(CD32)和FeyRⅢ2007年開始121。(CD16)。FYRⅡ和FyRⅢ還有A、B2個(gè)亞型。2如何提高抗體的效應(yīng)功能FcyRⅡA有2個(gè)天然的同種異型,FyRⅢA有3個(gè)同種異型,不同的受體和它們的亞型與IgG的親治療性抗體的作用機(jī)制有多種,主要可歸為兩和力是不同的,觸發(fā)抗體的效應(yīng)功能也是不同的個(gè)基本類型:一類是依賴于它們的抗原結(jié)合功能,FRI以高親和力結(jié)合lgG單體,而FRⅡ和例如抗體與抗原結(jié)合后阻斷或中和靶分子的生物學(xué)FcRⅢ與LgG的親和力較低,只能有效地與多聚活性、利用抗體的靶向性,將細(xì)胞毒性物質(zhì)導(dǎo)向到免疫復(fù)合物反應(yīng)。ADCC效應(yīng)是通過抗體結(jié)合到靶部位、抗體與細(xì)胞膜抗原結(jié)合后誘發(fā)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的NK、MΦ等效應(yīng)細(xì)胞表面Fc受體上,激發(fā)吞噬作改變,引起細(xì)胞凋亡等;另一類除與它們的抗原結(jié)用或靶細(xì)胞裂解。而IgG與FyRs的相互作用依賴合能力有關(guān)外,還與抗體的Fc結(jié)構(gòu)有關(guān),如激發(fā)于Fe區(qū)域的寡糖及在鉸鏈區(qū)和CH2區(qū)的某些氨基ADC和CDC效應(yīng),因此改進(jìn)抗體與FcRs結(jié)合酸殘基。最近報(bào)道從Fe的N-糖基化核上除去巖藻或與補(bǔ)體的結(jié)合,可以提高它們的治療效果。針對(duì)糖,可以大大改善與FyRs的結(jié)合,促進(jìn)ADCC活上述作用機(jī)制,對(duì)治療性抗體進(jìn)行改造2。性。低巖藻糖化的lgC顯示增加與FcyRⅢA的1改變抗體分子大小結(jié)合,ADCC活性也提高。2001年, Shields等完整抗體的分子量在150ku左右,很難穿透對(duì)人 IgGI Fc與FyRs及各亞型的結(jié)合部位進(jìn)行了血管進(jìn)入實(shí)體瘤,而且從體內(nèi)清除也慢,一些抗體突變分析,確定了在S298AE333AK334A3個(gè)位片段如Fab、單鏈抗體(ScFv)、 Dibody、 Minibody置上都突變的突變體與FcYRⅢA的結(jié)合增加,相由于去除了抗體的恒定區(qū)或Fe,因此在體內(nèi)較快應(yīng)的ADC活性也增加。該突變體去巖藻糖后被清除,有較好的腫瘤/血液比( tumor// blood rati-ADCC活性進(jìn)一步增加,但這些均為體外實(shí)驗(yàn)結(jié)o),它們適合于放射免疫顯像或放射治療3。為果,尚未被體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)。了增加抗體片段的穩(wěn)定性,往往在輕、重鏈間引人CDC效應(yīng)是依賴于補(bǔ)體成分Clqs與抗體鉸鏈連接肽( linker)或二硫鍵。連接肽的長(zhǎng)度和組成、區(qū)和CH2的結(jié)合,激發(fā)細(xì)胞的補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)二硫鍵的位置需要通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)確定,以減殺死靶細(xì)胞。lgG恒定區(qū)的定點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)換少對(duì)抗體特異性、親和力和表達(dá)量的影響。最近,研究結(jié)果表明:CH2結(jié)構(gòu)域?qū)DC的功能是非常ablynx公司提出納米抗體( Nanobody)的概念,重要的。據(jù)此, Indusogie等03用丙氨酸掃描突這是以駱駝抗體重鏈可變區(qū)為框架的抗體。它是人變技術(shù)研究了美羅華( Rituxan)的CDC功能,找gG分子的十分之一,穩(wěn)定性好,制備容易。目前到CH2結(jié)構(gòu)域中與Cq結(jié)合的位點(diǎn)Asp20,Lys2,已有3種納米抗體正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)23它們?cè)诳臻g結(jié)構(gòu)上非常接近,進(jìn)2.2增加抗體親和力步又確定Clq結(jié)合區(qū)邊緣的二個(gè)氨基酸Lys和對(duì)于治療性抗體來說,抗體親和力的提高有助Gu3,經(jīng)改造可以增加與Clq的結(jié)合和CDC效于降低用量和毒副作用,此外也降低治療費(fèi)用。抗應(yīng)。人Igl亞類在ADCC和CDC反應(yīng)中是最有效體親和力成熟常利用噬菌體展示( phage display)的,因此適合構(gòu)建針對(duì)病原體和腫癬細(xì)胞的治療性或酵母展示( yeast display)技術(shù),基本上可以分抗體。而人IgG4不能激活A(yù)DCC和CDC,適用于為兩大類:一類是通過構(gòu)建CDR或可變區(qū)隨機(jī)突顯像診斷和阻斷分子間相互作用。變的大容量庫(kù),然后篩選出高親和力的突變體。也2.4改變抗體的藥代動(dòng)力學(xué)可以通過DNA改組( DNa shuffling)、鏈改組中國(guó)煤化工它與FeRn的結(jié)合( chain shuffling)).錯(cuò)配PCR等方法提高抗體親和般CNMHG.4(血漿pH)時(shí)力;另一類是模擬體內(nèi)親和力成熟,構(gòu)建集中突變不結(jié)合。通過對(duì)兩者結(jié)合位點(diǎn)的研究,改造lgG上或熱點(diǎn)突變的小容量庫(kù),也可以在6個(gè)CDR每個(gè)與FcRn結(jié)合的部位,使之在pH6.0時(shí)結(jié)合增加位置上進(jìn)行單點(diǎn)突變,或在可變區(qū)的某些位置上進(jìn)而不是在pH7.4。此外,Dl' Acqua等發(fā)現(xiàn)在Fe248沈倍奮.治療性抗體的改造FcRn結(jié)合界面上252,254,256,433,434和436增加抗腫瘤效應(yīng)。為了增強(qiáng)抗腫瘤作用,最近報(bào)道位引入突變能改善結(jié)合。Hnon等也發(fā)現(xiàn)TQ同時(shí)用2個(gè)不同的細(xì)胞因子,如I2和I-12,或和ML2個(gè)突變體分別使與FRn的結(jié)合增加3I4和GM-CSF,它們可以串聯(lián)在抗體重鏈的C和7倍。同時(shí)突變2個(gè)地方,則結(jié)合增加28倍。端,或一個(gè)細(xì)胞因子融合在抗體重鏈或輕鏈的C在恒河猴體內(nèi),ML或TQML突變體顯示血端,另一個(gè)融合在N端。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜕巷@示漿半壽期增加2倍。改變抗體藥代動(dòng)力學(xué)的另一種出增加了抗腫瘤效果,但這么大的分子在體內(nèi)能否方法是PEG修飾,它可以降低免疫原性、增加抗進(jìn)人實(shí)體瘤還需要評(píng)價(jià)。最近報(bào)道細(xì)胞因子-抗體在體內(nèi)的半壽期、提高穩(wěn)定性、改變抗體的分布HER2融合蛋白在體內(nèi)可以提高HER2胞外段蛋白(如:從血漿進(jìn)入間質(zhì))組成的疫苗的反應(yīng),提示融合蛋白的一種新用2.5引入新的效應(yīng)功能途裸抗體的效應(yīng)功能是有限的,而且有些個(gè)體由于FyRs的多態(tài)性,對(duì)ADCC效應(yīng)不敏感,因此需3抗體改造中幾個(gè)有爭(zhēng)議的問題要考慮通過交聯(lián)或融合引人細(xì)胞毒性物質(zhì),例如:31鼠抗體人源化放射性同位素、藥物、毒素、細(xì)胞因子等。已被治療性抗體的免疫原性是影響它廣泛應(yīng)用和重FDA批準(zhǔn)的 Mylotarg就是抗CD33抗體與 caliche-復(fù)應(yīng)用的主要問題,但人源化程度達(dá)到多少算可mycin的交聯(lián)物,用于白血病治療,這種情況下抗以?全人抗體一定優(yōu)于人源化抗體或嵌合抗體嗎?體分子僅起靶向作用對(duì)此有不同的看法。 Clark等3對(duì)一些人源化抗體2.6雙特異性抗體和全人抗體的序列進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)兩者沒有明顯差雙功能抗體可以結(jié)合2個(gè)不同的抗原表位,大異,而對(duì)人體的免疫原性是受很多因素影響的。除多數(shù)情況下是2個(gè)不同的抗原。早期的雙功能抗體了可變區(qū)序列、I類型、抗體的糖基化情況外,抗原結(jié)合部位是針對(duì)腫瘤相關(guān)抗原,另一個(gè)是還有一些因素,如給藥方式(靜脈、皮下、肌肉靶向T細(xì)胞上的CD3分子或FcYR,促使免疫系統(tǒng)注射)、給藥次數(shù)、給藥劑量、患者狀態(tài)、抗體特的效應(yīng)細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞,例如:抗CD30×抗異性和靶抗原的性質(zhì)等。這些影響抗體免疫原性的FeyRⅢ、抗CD30×抗FyRI雙功能抗體治療非因素要比Ⅴ區(qū)序列更重要。 Clark等同時(shí)指出,何杰金氏淋巴瘤,抗HER2×抗FyRI雙功能抗身免疫病的存在說明人體免疫系統(tǒng)能對(duì)自身蛋白體治療乳腺癌。最近又有一些新的雙功能抗體出產(chǎn)生免疫反應(yīng),所以全人抗體完全不會(huì)產(chǎn)生免疫反現(xiàn),它們一個(gè)結(jié)合部位是針對(duì)高親和力的IgA應(yīng)的推斷是不正確的。 Hwang等收集了44個(gè)鼠FcaRⅠ,CD89),體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:靶向抗體、15個(gè)嵌合抗體、22個(gè)人源化抗體和3個(gè)全FcRI不僅抗腫瘤的效果與FyRI雙功能抗體一人抗體在人體上的免疫反應(yīng),以小于2%的人有反樣好,而且對(duì)某些效應(yīng)細(xì)胞(如粒細(xì)胞),FcRI應(yīng)為可忽略( negligible)的免疫原性,以2%-15雙功能抗體更有效3。%有反應(yīng)為可耐受( tolerable)的免疫原性,大于2.7抗體-細(xì)胞因子融合蛋白15%有反應(yīng)為顯著( marked)免疫原性。接受鼠細(xì)胞因子能有效激活免疫細(xì)胞,如:單核細(xì)抗體的44人中84%有顯著HAMA反應(yīng),7%的人胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、T細(xì)出現(xiàn)可耐受的免疫反應(yīng),9%的人不出現(xiàn)免疫反胞和B細(xì)胞。但同樣會(huì)引起嚴(yán)重的副作用。如果應(yīng)。在接受嵌合抗體治療的15名患者中,有顯著能將它們集聚在靶部位,就可以降低細(xì)胞因子治療免疫反應(yīng)是40%,可耐受的免疫反應(yīng)是27%,33時(shí)的系統(tǒng)性毒副作用。抗體-細(xì)胞因子融合蛋白就%的患者沒有免疫反應(yīng)。在接受人源化抗體治療的是利用抗體的靶向性達(dá)到上述目的的。各種細(xì)胞因22名患者中,9%有顯著免疫反應(yīng),36%有可耐子可以連接到完整抗體或單鏈抗體的N端或C端。受的免疫反應(yīng),55%沒有免疫反應(yīng)。目前上市的抗體-Ⅱ2融合蛋白在小鼠模型上顯示出抗各種腫全人抗體只有1個(gè).但已經(jīng)觀察到有免疫反應(yīng)出瘤的效果,不僅腫瘤縮小,而且能降低腫瘤轉(zhuǎn)現(xiàn)中國(guó)煤化工非完全沒有免疫原移。它們的抗腫瘤效應(yīng)可能來自于浸潤(rùn)的效應(yīng)性,CNMH例減少細(xì)胞的激活,如果存在 IgG Fc,則有可能通過細(xì)胞3.2抗體親和力因子受體和FcYR,這樣不僅細(xì)胞因子激活免疫細(xì)抗體親和力是抗體的特性參數(shù),從應(yīng)用角度人胞,而且可同時(shí)提供FYR引起的ADCC,進(jìn)一步們更關(guān)注抗體的親合力( avidity)。親合力很大程醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志,2006,3(4):245249 J Med Mol Biol,2006,3(4):245-249249度與靶組織上抗原的性質(zhì)、密度有關(guān),也與抗體治hol,2001,12[19 HANES J, JERMUTUS L, WEBER-BORNHAUSER S, et al. Ri-療作用的機(jī)制有關(guān),因此,對(duì)抗體親和力的要求,bosome display efficiently selects and evolves high-affinity antibo要根據(jù)抗體的作用機(jī)理和藥代動(dòng)力學(xué)等具體情況而es in vitro from immune libraries[J]. Proe Natl Acad Sci USA1998.95:14130-14135定,不是親和力越高越好。20] LITTLE M, KIPRIYANOV S M, GALL F L, et al. Of mice an3.3抗體結(jié)構(gòu)改造hybridoma and recombinant antibodies[ J)]. Immunology To-day,2000,21(8):364-369抗體除了CDR區(qū)外,是一個(gè)非常保守的分子,[21] BRUGGEMANN M, TAUSSIG M J. Production of human antibody因此,對(duì)它的任何改造,有可能增加免疫原性,降pertoires in transgenic mice[ J]. Curr Opin Biotechnol, 1997,8:455458低親和力,喪失生物功能。所以,對(duì)改造后的抗體221 PRESTA L. Antibody engineering for therapeutics[. Curr OpinStruct Biol,2003,13:519525必須在體內(nèi)外進(jìn)行功能驗(yàn)證,以確保其原有的治療[23] TODOROVSKA A, ROOVERS RC, DOLEZAl.o, et al. design作用。and application of diabodies, triabodies and tetrabodies for cancertargeting[J]. 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