中國法醫(yī)學來志 CHIN FORENSIC MED2014年第29卷第6期經(jīng)驗交流乙二醇中毒死亡檢驗1例高慶剛,李占成,艾紹安,常靖2,王磊3(1.榆林市公安局,陜西榆林719000;2公安部物證鑒定中心,北京100038;3.喀什市公安局,新疆喀什84000)【關鍵詞】法醫(yī)毒物分析;乙二醇;中毒【中圖分類號】DF795.4【文獻標識碼】B【文章編號1001-5728(2014)06-0572-02doi:10.16i01-520.0.011案例資料儀器條件:島津Q2010型G/M,I源。DB624彈性毛細管柱(30m0.25mm0.25m)。進樣口溫:張某,男。2013年4月某日,在服用他人提供的250℃;程序升溫:50℃保留1min,以10℃/min升至摻有防凍液的美汁源飲料后死亡提取死者心血、肝120℃后以30℃/min升至260℃,保持10min。離子源組織、胃內(nèi)容物,提取現(xiàn)場喝剩的美汁源飲料及防凍溫:200℃;接口溫:230℃;載氣He,分流比10:1,溶劑液進行毒物檢驗。切割時間5.0min,掃描時間5.0min~19min,掃描范1.1毒物分析檢驗圍10~100amu,掃描方式Scan取死者心血2mL、肝組織2g(勻漿)、胃內(nèi)容物1.2檢驗結果2mL、美之源飲料1mL、防凍液1mL,分別加入1g氯化從死者心血、肝組織、胃內(nèi)容物、美之源飲料、防鈉后加入4mL乙酸乙酯提取,振蕩離心,提取有機相凍液中均檢出乙二醇(圖1、2)。濃縮至約0.1mL供GC/MS分析。1002.52.252.02.001.75151.50101.251.000.50.750.06.07.08.09.010.011.012.013.014.015.016.017.018.06.07.08.09.010.011.0120.04.015.160.018圖1GC/MS分析乙二醇標準溶液圖2GC/MS分析肝組織中乙二醇和甲酸,草酸易很快與鈣結合形成草酸鈣而沉積。2討論本案例張某在誤服2h后出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐、2.1乙二醇中毒周身無力、胡言亂語、嗜睡狀態(tài),血壓138/82mmHg;乙二醇俗稱甘醇,是防凍液的主要原料。乙二醇15h后,處于昏睡,呼之不應,血壓216/135mmHg;24h屬低毒類,人類致死劑量約為1.6g/kg。誤服乙二醇后,心率減慢,深度昏迷,抽搐,嚴重的代謝性酸中毒在30min~12h內(nèi)發(fā)作,主要癥狀表現(xiàn)為意識模糊步并血鈣低;30h后死亡,醫(yī)院診斷呼吸衰竭、腎衰竭、態(tài)不穩(wěn)、口齒不清;12h~24h后,高血壓,心跳加速和循環(huán)衰竭、代謝性酸中毒及高鉀血癥。張某的臨床表充血性心臟衰竭;24h~72h后,腰疼、結晶尿,至無尿現(xiàn)和毒物檢驗結果符合乙二醇中毒的典型特征。而腎衰竭;代謝性酸中毒和低血鈣是乙二醇中毒的典2.2乙二醇檢驗型特征12。因為乙二醇在體內(nèi)代謝產(chǎn)物主要是草酸色譜柱選擇乙二醇具有兩個羥基,其極性較【作者簡介】高慶剛,男,助理工程師,本科,從事毒物檢驗鑒定大本例筆者試用了二種方法(1)采用 Agilent PLOT工作。e-mail:274670722@qq.comQ色譜柱檢測,但檢測靈敏度低,為1mg/mL;(2)采572中國法醫(yī)學親志 CHIN FORENSIC MED2014年第29卷第6期用DB624色譜柱,檢測靈敏度可達到0.1μg/mL。故采用液液萃取法,有機溶劑濃縮是關鍵,當提取本采用DB624色譜柱在飲料、胃內(nèi)容物肝組織、血液濃縮至干時檢測不出乙二醇。雖然乙二醇沸點較液中均檢出乙二醇;而采用 Agilent PLOT只在飲料高,但在有機溶劑濃縮過程中也揮發(fā)。因此,生物樣中檢出乙二醇。品中乙二醇檢驗,有機溶劑提取液不可濃縮至干。由于生物樣品中極性脂肪酸及醇含量高,采用DB-624色譜柱檢測,質譜燈絲易飽和,因此選擇在參考文獻5min后質譜采集以防止燈絲飽和。[1]李潤萍,鄭昊,張聿,等.急性乙二醇中毒3例報告及文樣本前處理乙二醇是有甜味的無色黏稠液體,獻回顧[J].藥物不良反應雜志,2008,10(1):4146.分子量低(62.08g/mol),性質與乙醇相似,采用頂空[2]黃偉.急性乙二醇中毒的研究[D].法醫(yī)學碩士論文氣相色譜質譜法檢測的效果不理想,分析其主要原因重慶醫(yī)科大學2010是乙二醇沸點較高,192℃。(收稿日期:2013-11-26)經(jīng)驗交流移液器使用不當導致DNA分型 Ladder污染原因初探王玉健,朱巍,楊智,匡金枝(天津市公安局物證鑒定中心,天津300384)【關鍵詞】法醫(yī)物證學;法醫(yī)DNA實驗室;蓄積污染; ladder樣圖譜;溯源檢驗【中圖分類號DF795.2【文獻標識碼】B【文章編號】1001-528(2014)06-0573-02doi:10.1368 issn.1001-5728.2014.06.020在法醫(yī)DNA分型檢驗中,如出現(xiàn)與等位基因標1uL上樣,在AB-3130XL型遺傳分析儀上進行毛細準對照物( Ladder)一樣的等位基因,應注意 Ladder管電泳,電泳結果采用 GeneMapperID--X分析軟件污染。本文對由于移液器使用不當,造成其頭部或進行STR分型。管道內(nèi)壁DNA蓄積而導致 Ladder污染原因進行分析,希望為相關檢驗提供借鑒。2結果與討論1材料與方法8份樣本經(jīng)采用上述方法進行擴增和STR分型檢驗,結果2μL、20μL移液器清洗液及PP18D試劑1.1樣本盒擴增混合物、引物4份樣本檢出似 Ladder樣的污收集本實驗室擴增區(qū)生物安全柜內(nèi)5支日常使染圖譜(圖4),200L、00L1pL(圖5)移液器用的移液器(量程分別為200L、100L、20L、10L清洗液及擴增用超純水(圖6)4份樣本未檢見Ladder和2μL),分別用超純水清洗,取其清洗液為樣本(共污染。5份),取用日常使用的移液器分裝的PowerPlex18D本文檢驗結果顯示,大量移液時所使用的大量程 System試劑盒(簡稱PP18)內(nèi)的擴增混合物、引物(200a試劑盒內(nèi)擴增試劑純水未和試劑盒內(nèi)擴增用超純水為樣本(共3份),以上共被污染,而進行全量擴增時經(jīng)常交叉使用的小量程移計8份樣本為待測DNA模板。液器(20μL、2μL)及PP18D試劑盒內(nèi)擴增混合物、引1.2擴增及分型檢驗物均檢出了污染DNA。使用備用擴增室及 AmpFISTR Sinofiler試劑盒,造成移液器污染的原因分析主要是交叉使用中分別取上述8份模板各2μL,擴增反應體系為10μL,的NA積蓄所致。日常檢驗使用的普通移液器吸頭循環(huán)參數(shù)參照試劑盒說明書。各樣本擴增產(chǎn)物取不含防回吸濾芯,使用時有可能造成樣本留滯,移液器在經(jīng)常性交叉使用時可使不同分型的DNA樣品蓄【作者簡介】王玉健,男副主任法醫(yī)師,學士,主要從事法醫(yī)積在移液器的頭部或管道內(nèi)壁,如果移液器的清洗與DNA檢驗鑒定及研究。E-mail: bhdnawyj@126.com使用頻率不匹配或移液器操作不當,更可能使交叉污573