利用聚乙二醇提取山核桃外殼單寧的研究口方苗利【內(nèi)容摘要】單寧是一類應(yīng)用廣泛的醫(yī)藥中間體。山核桃外殼是山區(qū)的一種可再生資源。為了有效地使山核桃外殼變廢為寶本文研究了利用聚乙二醇400從山核桃外殼中提取單寧的方法。討論了不同的溫度,不同的提取時(shí)間,不同質(zhì)劑比對(duì)單寧提取率的影響,并采用正交實(shí)驗(yàn),鋅離子絡(luò)合滴定法測定提取液中的單寧含量,得到了最佳浸提條件:提取劑為25%聚乙二醇400,時(shí)間為8小時(shí),溫度為80℃,溶劑與溶質(zhì)比為6:1【關(guān)鍵詞】山核桃外殼;單寧提取;聚乙二醇【基金項(xiàng)目】本文為浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生一般研究計(jì)劃(編號(hào):2012KYA055)項(xiàng)目成果【作者簡介】方苗利(1966~),女,浙江諸暨人;浙江醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校高級(jí)實(shí)驗(yàn)師;研究方向:化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、衛(wèi)生檢驗(yàn)技術(shù)單寧是一類廣泛存在于植物葉、果實(shí)、根及樹皮等部位醋酸鋅為絡(luò)合沉淀劑加到植物多酚溶液內(nèi),在pH=10,溫度的多元酚化合物。多元酚結(jié)構(gòu)賦予單寧一系列獨(dú)特的化學(xué)35℃下反應(yīng)30分鐘,溶劑內(nèi)多余的Zn2以乙二胺四乙酸二性質(zhì),能與蛋白質(zhì)、生物堿和多糖結(jié)合,在物理和化學(xué)行為鈉滴定。lmL(lmol/L)醋酸鋅消耗0.1556g上發(fā)生變化,能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或產(chǎn)生靜電作用植物多酚含量W%=0.1556×V/G×100%具有還原性、捕捉自由基的活性、以及兩親結(jié)構(gòu)和諸多衍生其中:0.1556為實(shí)驗(yàn)常數(shù);Ⅴ為1M醋酸鋅標(biāo)準(zhǔn)液的絡(luò)合化反應(yīng)活性等。因此,單寧在醫(yī)藥、食品、化工、農(nóng)業(yè)、材料等沉淀消耗量;G為樣品重量。領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在生理活性方面用于止血、抑制微生物、抗具體步驟:取分析溶液倒入500mL燒杯中,加水至約過敏、抗突變、抗癌、抗腫瘤和抗衰老等活性也在近年來逐漸300mL。置(35±2)℃水浴中預(yù)熱。精確量取20 mL Imol/L被人們所認(rèn)識(shí)和關(guān)注醋酸鋅溶液于500mL容量瓶中,加14mL氨水,搖勻使白色山核桃是福建、浙江、安徽等南方山區(qū)盛產(chǎn)的特優(yōu)產(chǎn)品,沉淀溶解,緩慢定量移入預(yù)熱溶液,邊移人邊振蕩,移畢繼續(xù)每年的產(chǎn)量幾十萬噸,產(chǎn)生大量的山核桃外殼,污染環(huán)境、危振搖1分鐘,置水浴保溫30分鐘,間歇振搖數(shù)次。待反應(yīng)完害動(dòng)植物的生存。而山核桃外殼含有酚類化合物、鞣質(zhì)、有畢,冷水冷卻至水槽(20±1)℃,定容,搖勻。取反應(yīng)溶液離機(jī)酸、生物堿、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、糖、多糖、配糖(甙)、皂甙、心5分鐘,取上清液精確量取20mlL,加300mL水、25mL氯甾體、黃酮體、香豆素、萜類內(nèi)脂化合物和蒽醌類九大類化合化銨-氨水緩沖液(pH=10)和mL鉻黑T,以0.05mo/物。如果將這些廢棄的山核桃外殼進(jìn)行綜合利用,既保護(hù)了EDA·2Na滴定至溶液由酒紅色變成暗藍(lán)色,并用空白校人們生存的生態(tài)環(huán)境,也為地方經(jīng)濟(jì)創(chuàng)造了良好的經(jīng)濟(jì)效正益。聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)式為CHOH-(CH2CH20)表1單寧提取的因素水平CH0H,是一種易溶于水、生物相容性好、無毒副作用且價(jià)格水平溶劑時(shí)間溫度質(zhì)劑比低廉的高分子聚合物。PEG自身及其衍生物可以廣泛應(yīng)用25%聚乙二醇400在修飾蛋白、包裹藥物等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。因此,本文通過利50%聚乙二醇400用聚乙二醇作為提取劑對(duì)山核桃外殼提取單寧進(jìn)行研究,并通過正交實(shí)驗(yàn)確定最佳的工藝條件。實(shí)驗(yàn)部分表2單寧提取的正交方案(-)僅器試劑和原料。試劑:乙二胺四乙酸二鈉,乙水平溶劑時(shí)間溫度質(zhì)劑比醇,氨水,氯化銨,醋酸鋅,鉻黑T,聚乙二醇400;儀器:SSW125%聚乙二醇型電熱恒溫水槽、PHSJ-3F型實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)、電熱恒溫鼓風(fēng)25%聚乙二醇干燥箱、TDL-40B離心機(jī)、BYY-300藥品冷菌箱。試劑均二醇為市購化學(xué)純50%聚二醇二)單寧的提取。將30℃烘干除雜質(zhì)的核桃外殼10g345650%聚乙二醇40002802100粉碎,裝入25mL的錐形瓶中,在不同溫度、不同時(shí)間和不同%聚乙體積的提取劑中,攪拌浸提后,趁熱過濾,洗滌,用絡(luò)合滴定789中國煤化工法測定單寧含量(三)單寧含量的測定。本文采用絡(luò)合滴定法測定CNMHG2含量。Zn2有較好的選擇性,只與植物多酚絡(luò)合。以過量的四)正交實(shí)驗(yàn)方案。確定了對(duì)提取率有較大影響的溶03劑(A);浸提時(shí)間(B);浸提溫度(C);溶質(zhì)與溶劑比(D)4個(gè)因素。每個(gè)因素選擇3個(gè)水平,按正交設(shè)計(jì)[L2(42)]法尋找最佳工藝條件。因素水平表和正交方案設(shè)計(jì)表分別見表1和表2。二、結(jié)果與討論y98表3單寧提取條件的正交實(shí)驗(yàn)方案及其結(jié)果因素試驗(yàn)號(hào)單寧單寧編號(hào)溶劑時(shí)間溫度固液含量率/%提取時(shí)間h25%聚乙二醇8501:58.460.10331.033圖2時(shí)間-提取率效應(yīng)曲線25%聚乙二醇10801:68.330.107210.72三)提取溫度對(duì)單寧提取率的影響。結(jié)果表明,當(dāng)溫325%聚乙二醇121001:78.50.060.06度為80℃時(shí)提取率高于其他水平但是隨著溫度升高單寧的450%聚乙二醇8801:78.620.097987提取率又會(huì)出現(xiàn)降低,因此選擇浸提溫度為80℃為宜50%聚乙二醇101001:58830.09179.17650%聚乙二醇12501:68.770.09369.367聚乙二醇4081001:68.770.09369.368聚乙二醇40010501:78.720.09569.569聚乙二醇40012801:58.880.08978.97總和K因子水平1水平2水平3溶劑31.128.4027.84506取盈A00時(shí)間圖3溫度-提取率效應(yīng)曲線溫度(四)質(zhì)劑比對(duì)單寧提取率的影響。從結(jié)果分析,液料質(zhì)劑比2847294429,49配比為1:7時(shí)單寧的提取率仍有上升趨勢,但是從上升的趨均值k因子水平1水平2水平3勢來看不是很明顯,而且從成本考慮不實(shí)用,因此,質(zhì)劑比選溶劑10.37947930擇1:6較為合適時(shí)間9859.8294630.0溫度9759.859.53質(zhì)劑比9,49.819.8329.5因子極小值極大值差值R調(diào)整R溶劑9.3010.371.070.97時(shí)間9.469.850.390.35哥285溫度質(zhì)劑比949.830.340.30(一)提取溶劑對(duì)單寧提取率的影響。結(jié)果表明溶劑對(duì)提取率的影響程度次序?yàn)?1(25%聚乙二醇400)>2(50%聚圖4質(zhì)劑比一提取率效應(yīng)曲線乙二醇400水溶液)>3(聚乙二醇400),從效應(yīng)曲線可以看結(jié)論出,25%聚乙二醇400是提取單寧得率最高的溶劑。通過以上正交實(shí)驗(yàn)研究可知,從山核桃外殼中提取單寧的最佳工藝條件為:提取溶劑為25%聚乙二醇400,浸提時(shí)間為8h,溫度為80℃,溶劑與溶質(zhì)比為6:1。該方法簡單易行提取率高,特別是利用聚乙二醇做提取劑,是一條安全無毒適合工業(yè)化生產(chǎn)的綠色提取方法?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1.張建,李寶坤,毛曉英.超聲波提取葡萄梗中單寧的硏究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008提取劑2.胡永祥,牛津梁,張文博.聚乙二醇修飾藥物技術(shù)的研究進(jìn)圖1溶劑-提取率效應(yīng)曲線展[J].中國生化藥物雜志,2004(二)提取時(shí)間對(duì)單寧提取率的影響。結(jié)果表明,隨著時(shí)3.曹中國煤化工工藝條件研究[]江西林間的增加,提取率呈現(xiàn)下降的趨勢,當(dāng)浸提時(shí)間為8h時(shí)提取業(yè)科THCNMHG率最高,時(shí)間增加單寧的提取率反而下降