1362007,Vo!.28,No.05食品科學※工藝技術(shù)茯苓多糖提取工藝的優(yōu)化陳莉,郁建平(貴州大學生命科學學院貴州貴陽摘要:本實驗比較了茯苓多糖的幾種提取工藝。結(jié)果表明,利用酶解熱水浸提法提取茯苓多糖,能顯著提高茯苓多糖的浸岀率,是熱水浸提法的2.32倍,并且具有浸提時間縮短,提取祭件溫和,所得茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)不易被破壞、生物活性髙等優(yōu)點。同時還確定了酶解十熱水浸提法提取茯苓多糖的最佳工藝條件關(guān)鍵詞:茯苓;多糖;植物復(fù)合酶;提取工藝Qtinizati on of Ful i ng( Pori a coccus)Pol ysacchari des Extracti on Technol ogyCHEN Li, YU Ji an- pi ng*Co l ege of Life Sci ence, Gi zhou Uhi versi ty, Gi yang 550025, Chi na)bstract: This paper conpared several Fu ing( Pori a coccus) extracti ng techni ques. The resul ts shoved that the Fu ingpol ysacchari des extractingtechnol ogy that conbi nes enzymol ysi s w thhot wat er extracti oncani nprovethe extracti grat e ofFu i ngpdl sacchari dessi gri fi carly, ar 2 32ti nes of that of hot wat er extraction Aditi onal l y, thecorbi nedextractingt echa ogyhastheadvart ages: shorter ngextracti ngperi od ml dext racti ngcad ti onsfar st ab estereoscapi cstructureandhi ghbi ol og calactivi ty of extract ed Ful i ng pol sacchari des. The paper al so det erm nes the opt i umprocessi ng condi ti ons for Fu i ngpd sacchari des extracti onwiththeconbi nedext racti ngt echo ogyKey wor ds por i a coccus pol sacchari des veget abl e conpound enzynes extract i ng technol ogy中圖分類號R842文獻標識碼A文章編號1002-663200705013604茯苓( Por i a coccus wol f)為多孔菌科真菌茯苓的干燥塊狀茯苓(經(jīng)鑒定為茯苓)貴陽市花果園農(nóng)貿(mào)市菌核。是常用的傳統(tǒng)中藥,具有滲濕、健脾、利尿場;植物精提復(fù)合酹(主要成分為纖維素酶、果膠酶、等功能。茯苓多糖( pachyman)具有抑制腫瘤生長,調(diào)節(jié)中性蛋白酶等)寧夏夏盛植物精提復(fù)合酶事業(yè)部;蒽機體免疫等功能。酮上?；瘜W試劑公司3,5-二硝基水楊酸上?；瘜W近年來茯岺多糖的提取一般用熱水浸提法、堿液浸試劑公司。提法、酸液浸提法等先得到茯苓多糖的粗品再通過純化1.2儀器工藝得到茯苓多糖的精品。紫外分光光度計北京普析通用儀器有限公司高本實驗將通過對茯苓粗多糖提取工藝的的比較研速離心機北京醫(yī)用離心機廠。究,以探求最佳的提取工藝。熱水漫提法時間長且多13方法糖提取率低,而酸堿液漫提法漫提程序較繁瑣,浸提1.31茯苓多糖含量測定方法的確定條件較劇烈,極易破壞多糖的立體結(jié)構(gòu),使其生物活吸收光譜的確定:分別取葡萄糖標準溶液和茯苓多性受到限制。有關(guān)酶法提取茯苓多糖的具體方法很少見糖提取液1.0m,置10m帶塞試管中,快速加入0.2%蔥報道。本實驗采用復(fù)合酶十熱水浸提法提取茯苓多糖,酮試劑4.0m,水浴10mn,以蒸餾水為空白參比,在使提取時間縮短,多糖提取率提高,同時能保持茯苓200~700m)長范圍內(nèi)用紫外分光光度計進行掃描。實多糖的生物活性,適合于茯苓多糖在醫(yī)藥和保健品方面驗結(jié)果表明,茯苓多糖和葡萄糖的最大吸收峰均在的開發(fā)研究620nm處。經(jīng)過重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、回收率試驗,確定1材料與方法選用蒽酮一濃硫酸法作為茯苓多糖含量的測定方法。標準曲線的回歸方中國煤化工R=0.994211材料、試劑1.32還原糖CNMHG收稿日期20061130通訊作者作者簡介:陳莉(1975-),女,碩士研究生,主要從事營養(yǎng)生化與檢測技術(shù)研究?！に嚰夹g(shù)食品科學2007,Vol.28,NO.05137采用DNS法測還原糖含量斷上升,當達到90mn時浸出率已接近最大值。再延長133酶解+熱水浸提法工藝流程酶解時間,提取率變化不大,而且酶解時間過長會導(dǎo)致茯苓粉碎加水漫泡30mn(復(fù)合酶加水在40℃活化多糖降解、雜質(zhì)大量溶出。所以酶解時間定為90mn10mn)→加入復(fù)合酶在48℃(p}5)浸提90mn→中和后加213酶解溫度的影響水再升溫至80℃繼續(xù)浸提90mn→乙醇醇沉→無水乙醇、丙酮、乙醚分別洗滌→茯苓多糖粗品→去蛋白質(zhì)大孔樹脂吸附純化→洗脫液濃縮后透析→透析液濃縮后冷凍干燥→純化茯苓多糖2結(jié)果與分析21影響酶解過程的因素影響酶法提取茯苓多糖的因素主要有:酶加入量、酶解液pH值、酶解溫度、酶解時間、固液比等。本04244464850525456酶解溫度(℃實驗就酶解過程中不同因素對茯苓多糖提取率的影響分圖3酶解溫度的影響別作了比較。Fig 3 Effects of enzymol ysi s tenper ure211酶加入量的影響從圖3中可以看出,48℃是最佳酶解溫度,有利于酶效的充分發(fā)揮。0.6214酶解液pH值的影響0.5030200204060811.21.41.6酶加入量(%海加入量的影響FiEffects of aunt of enzyne added4464.85052545658從圖1中可以看出,隨著酶加入量的增大,多糖的浸出率也在上升,當酶加量達到1%時,浸出率達到圖4酶解液pH值的影響最大值。酶加量過大,會導(dǎo)致提出多糖的降解,反而Fi g. 4 Effects of enzymol ysi s l i qui d pH val ue使多糖浸岀率降低。所以確定最佳酶加量為1%。從圖4中可以看出,酶解液最佳pH值為5.0,此212酶解時間的影響時酶解可以達到最佳效果。215酶解液中固液比的影響0.706003米0.55}◆020053045607590105120135酶解時間(mn圖2酶解時間的影響g 2 Effects of enzymol ysi s tine中國煤化工從圖2中看出,隨酶解時間的增長多糖的浸岀率不CNMHGtio1382007,Vo.28,No.05食品科學※工藝技術(shù)從圖5中可以看出,當固液比達到1:10時,多糖浸出率的上升趨于平緩,為了減少后繼濃縮過程的工作量,在不明顯影響多糖浸出率的情況下,浸出液體積越少越好,所以確定酶解過程的固液比為1:10坐0.2522影響熱水浸提過程的因素酶解+熱水浸提法全過程為:酶解反應(yīng)和80℃熱水浸提兩個階段。兩個階段都很重要。酶解后再用熱水浸提的過程中,主要討論了浸提時01020304間、溫度、固液比對茯苓多糖浸出率的影響。加水倍數(shù)221酶解后熱水浸提溫度的影響圖8酶解后熱水浸提加水量的影響Fi g 8 Effects of the anount of hot water added afte0.45enzym增加,當固液比達到1:40時浸出率上升趨于平緩,考慮到濃縮過程的工作量,在不明顯影響多糖浸出率的情0.20況下,浸岀液體積越少越好,所以確定酶解后熱水浸提時的固液比為1:40。0.05224茯苓粗多糖各提取方法效果比較0.00為比較不同提取方法對茯苓多糖得率的影響,由實05060708090100驗可知:酶解+熱水浸提法提取茯苓多糖,浸提時間縮短近一半,提取率是熱水浸提法的2.32倍。另外,酶圖6酶解后熱水浸提溫度的影響Fig 6 Effects of water tenpret ure after enzymol ysis解+熱水浸提法全過程為酶解反應(yīng)和80℃熱水浸提兩個階段。第一階段主要作用是酶解細胞表面結(jié)構(gòu)及胞間連從圖6中可以看岀,多糖浸岀率隨溫度的上升而增接物,并伴有部分糖類物質(zhì)溶出。第二階段通過提高加,80℃時浸出率上升趨于平緩,考慮到溫度過高易溫度后,既具有滅酶作用,同時使溶于熱水的胞內(nèi)多造成多糖的降解,故酶解后熱水浸提溫度確定為80℃。糖浸岀率增加,兩個階段都很重要。222酶解后熱水浸提時間的影響表1粗多糖得率的比較0.45Tabl e 1 Conpari son of extracti ng rat es of crude Fu i ng粗多糖得率(%0.35熱水浸提法酶解法酶解十熱水浸提法0.103結(jié)論0.0531茯苓中除了含有多糖外,還含有蛋白質(zhì)、纖維素和果膠等物質(zhì),實驗中所用植物復(fù)合酶是主要由纖維素浸提時間(h酶、中性蛋白酶、果膠酶等組成的混合酶系。纖維素酶解后熱水浸提時間的影響Fig 7 Effects of ext racti ng ti ne af ter erzyml ysis酶能降解茯苓的細胞壁,從而加速茯苓多糖的浸岀;蛋白酶可降解茯苓中所含蛋白質(zhì),同時降低了它們與原料從圖7中可以看出,當熱水浸提時間達到90mn時,的結(jié)合力,有利于多糖的浸出;果膠酶能水解果膠促進多糖浸岀率不隨時間的延長而顯著增加,考慮到提取過多糖溶岀到浸提液中。使用酶解法可以在較低的溫度下程溫度較高,時間太長會影響所提多糖的活性和增加多提高多糖的提取率。由于酶作用的專一性,不會破壞糖中雜質(zhì)的溶岀,所以確定酶解后熱水浸提時間為茯苓多糖的結(jié)構(gòu)。90m ne32酶解+熱水浸提法提取茯苓多糖的優(yōu)點:(1)茯苓223酶解后熱水浸提過程中加水量的影響多糖的漫出率H中國煤化工雜質(zhì)含量低、從圖8中可以看岀多糖浸出率隨加水倍數(shù)的上升而提取液粘度低CNMH°吉構(gòu)不易被破※工藝技術(shù)食品科學2007,Vol.28,NO.05139五味子葉中總黃酮最佳提取工藝研究鄭春英,李宏濤,陸欣媛,周東坡*(黑龍江大學生命科學學院,微生物黑龍江省高校重點實驗室,黑龍江哈爾濱150080)摘要:用單因素試驗和正交試驗考察了料液比、提取時間、提取溫度及乙醇濃度對五味子葉總黃酮含量的影響。結(jié)果表明:料液比為1:35,75%乙醇在85℃超聲提取60mn,為最佳條件;此條件下,7月份和8月份五味子葉的總黃酮平均含量分別為6.0285m/g和8.0714g/g關(guān)鍵詞:五味子葉;總黃酮;最佳提取工藝St udy on Qti noumExtracti ng Process of Tot al Fl avones fromSchi sandra chi nensis( Turcz. )Bai I I LeavesZHENG Chun-yi ng, LI Hong-tao, LU Xi n-yuan, ZHOU Dong-po(Hei l ong i ang Provi nce ui versi ty Key Labor at ory of Mcrobi d ogy, Col l ege of Life Sci ence,Hei longj i ang ui versi ty, Harbin 150080, Chi na)Abstract: The opt i nmmext racti ng cond ti ons of fl avanes i n Schi sandra chi nensis (Turcz. )Bai l l l eaves werei westi gat ed bysing ef act ar test withtheorthogonal test desi gn thera nf act ors af fecti ngthecartert of total fl avanes extract edfraSchi sancahi nesis(TurCz. )Bai ll l eaves veretherat eri al-li qu drat i a theextracti ont enper at ure, theextracti onti ne andthe al cohdconcertrati on The resu ts showedthat the opti mondi ti ons were: &5C, 60mn 75%al cohd and nat eri al-li qi drati o 1: 35.uder thecad ti ons, thecorterts of total fl avones i nSchi sandrachi nesis(Turcz. )Bai l l l eaves cd l ectedi nboth]u yandAgst6. 0285ng and8, 0714ng/g respecti vel yKey wor ds Schi sandr a chi nensis (Turcz. )Bai ll l eaves tot al fi avones opt i nomextracti ng process中圖分類號TS255.1文獻標識碼A文章編號1002-6630(200)05013904五味子 Schi sandr a chi nensis(Tuz.)Bi,習稱北前,關(guān)于五味子葉中總黃酮提取工藝及含量測定等方面五味子”η,木蘭科植物,是藥食同源功能性保健食的研究未見報道。為更好地開發(fā)利用五味子葉中的黃酮品。我國黑龍江地區(qū),五味子葉常以山野菜的形式在市類物質(zhì),本實驗進行了提取工藝的研究,以期篩選岀較場岀售;在歐洲,五味子葉則被制成各種營養(yǎng)食品用于好的提取工藝,為五味子葉的合理利用提供科學依據(jù)。運動員的營養(yǎng)保健或是用于預(yù)防心血管疾病。五味子葉中主要活性成分是槲皮素、山奈酚等黃酮類成分2。目1材料與方法收稿日期2006-0920通訊作者基金項目:黑龍江省教育廳科學技術(shù)研究項目(11511289);黑龍江大學杰出基金項目;黑龍江大學博士啟動基金項目作者簡介:鄭春英(1968-),女,副教授,博士,主要從事食品、藥品有效成分分析。壞、生物活性高,適合與藥品及保健品的開發(fā)研制∏徐保梁.食用菌多糖提取方法研究[.食用菌,199611:64)生產(chǎn)能耗降低,生產(chǎn)周期縮短,更加經(jīng)濟;綜上彐潘琦,賈向皮提取茯苓多糖實驗方法研究[可知:酶解+熱水浸提法是適合于提取茯苓多糖的理云南中醫(yī)學院學報197,20(3):13164孫文基。天然藥物成分提取分離與制備[M.北京:中國醫(yī)藥科技出想方法。版社,1999288參考文獻孫向軍.螺旋藻多糖提取新工藝的研究].食品科學,20002:32「η林宇野,楊虹.酶法提取多糖的研究].食品與發(fā)酵工業(yè),195(1):沈愛英中國煤化工糖的研究1,食用1317菌,200(3HCNMHG