※基礎(chǔ)研究息品科字2010.WL.31,No.l5蘆筍皮乙醇提取物的抑菌活性研究馮翠萍,張培宜,張帥,李泠鸰(山西農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院,山西太谷030801)摘要:研究蘆筍皮乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌和青霉毛霉、黑曲霉的抑制作用,采用牛津杯法對不同質(zhì)量濃度的蘆筍皮乙醇提取物進行抑菌實驗。結(jié)果表明:蘆筍皮乙醇提取物對細菌和霉菡均有抑制作用,抑制細菌的能力明顯強于霉菌;對金黃色葡萄球菌最低抑制質(zhì)量濃度為lg^0OmL其氽4種細菌均為5g/00mL,且隨著質(zhì)量濃度的增大抑菌作用增強;對青霉、毛霉、黑曲霉的最低抑制質(zhì)量濃度分別為10、30、40g/100mL。關(guān)鍵詞:蘆筍皮厶醇提取物;牛津杯法;抑菌活性Anti-microbial Activity of Ethanol Extract from Asparagus officinalis PeelFENG Cui-Ping, ZHANG Pei-yi, ZHANG Shuai, LI Ling-lingCollege of Food Science and Engineering, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China)Abstract:Oxford cup method was used to measure the anti-microbial activities of ethanol extract from Asparagus offipeel against Staphylococcu saureus, Eschrichia coli, Bacillus subtilis, Shigella, salmonella and Penicillium, Mucor and Aspergillusniger. The results indicated that all these microorganisms were effectively inhibited by the extract and the antibacterial activitywas much better than the anti-mold activity. The minimum inhibition concentration(MiC) was 1 g/100 mL for Staphylococcuaureus and 5 g100 mL for other 4 bacterial species. The antibacterial effect was in a concentration-dependent manner. TbeMICs were 10, 30 g/100 mL and 40 g/100 mL for Penicillium, Mucor, and Aspergillus niger, respectivelyKey words: ethanol extract from Asparagus officinalis peel: Oxford cup method; anti-microbial activity中圖分類號:S6446:Q935獻標識碼:A文章編號:1002-6630(2010)15007303蘆筍( Asparagus officinalis L.),又名石刁柏,天醇提取物的抑菌作用明顯強于水提取物9。本實驗對蘆門冬屬百合科宿根性多華生草本植物,是一種藥食同源筍皮厶醇提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草的蔬菜。我國《神農(nóng)本草經(jīng)》將蘆筍列為“上品之芽孢桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌、青霉、毛霉、黑上”。蘆筍中含有許多活性成分,如黃酮類物質(zhì)、天曲霉的抑制作用進行研究,旨在為天然抗菌劑提供原門冬酰胺、天門冬氨酸、葉酸、核酸、果糖、低聚料,并為提高蘆筍的綜合利用價值提供參考。糖等?，F(xiàn)代醫(yī)學研究證明,蘆筍具有抗腫瘤、降血脂、抗衰老、抗疲勞、抗突變、抗蔭及防癌抗癌功效111材料與方法據(jù)統(tǒng)計,蘆筍在加工過程中,占原料質(zhì)量15%~25%的11材料與試劑蘆筍皮被去掉2,這不僅造成了資源浪費,還增加了企蘆筍皮山西省聞喜縣綠色食品廠。業(yè)處理廢棄料的成本。研究表明蘆筍皮中的營養(yǎng)成分與金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、志蘆筍相似,有些營養(yǎng)成分含量其至超過蘆筍。本課題賀氏菌、沙門氏菌、青霉菌、毛霉、黑曲霉由山西組對蘆筍皮進行了一系列的研究,結(jié)果表明蘆筍皮中含農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院微生物教研室提供有豐富的黃酮類物質(zhì)和高活性的膊食纖維,具有抗疲聲宀、營養(yǎng)瓊脂、葡萄勞、降血脂功能,并對蘆筍皮的水提物及乙醇提取糖等物抑制空氣中常見細菌的作用進行了研究,結(jié)果表明乙12CNMHG收稿日期:2010-01-11基金項目:山西省青年科技基金研究項目(20021039)作翥兩靄翠190-),支文,副教投,博土,研究方向為食品營養(yǎng)與衛(wèi)生,Bm!ad65m742010,wo3l,No.15自品科字※基礎(chǔ)研究YXQ-SG46-280手提式壓力蒸汽滅菌器上海博迅濃度的蘆筍皮乙醇提取物溶液加入牛津杯中至滿,置37℃實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;F2102植物粉碎機天津市或28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24h,然后取出,觀察杯泰斯特儀器有限公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋江蘇省金壇市周圍細菌或霉菌的生長情況,測其抑蘭圈直徑。江南儀器廠;HPP9272電熱恒溫培養(yǎng)箱北京市東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司:DHG9243BSⅢ電熱恒溫鼓風干2結(jié)果與分析燥箱上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司:HQC空氣浴21蘆筍皮乙醇提取物對細菌的抑制作用振蕩器哈爾濱市醫(yī)療儀器廠;SZX-2P超凈工作臺上海市整新電子設(shè)備廠;BS224s電子天平北京賽多利斯20「金黃色葡萄球菌“志賀儀器系統(tǒng)有限公司;JDG0.2型真空凍干試驗機蘭州投上芽桿菌氏面科近真空凍干技術(shù)有限公司。13方法131液體培養(yǎng)基的制備1細菌液體培養(yǎng)基的制備:稱取牛肉膏5g、蛋白胨10質(zhì)量濃度ge/10OmL)l0g、NaCl5g溶解于10mnL蒸餾水中,調(diào)pH7,2,12lt圖1蘆筍皮乙醇提物的抑菌作用滅菌20min,待用,Fig-1 Antibacterial activity of ethanol extract from霉蔭PDA液體培養(yǎng)基的制備:去皮馬鈴薯200gofficinalis peel切成小塊,加1000mL蒸餾水煮沸30min,雙層紗布過由圖1可見,蘆筍皮乙醇提取物對金黃色葡萄球濾,濾液中加入2g/100mL葡萄糖,121℃滅菌20min,待用。菌、大腸桿菌、枯草芽他桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌均有抑制作用,且隨著溶液質(zhì)量濃度的增加抑制作用132固體培養(yǎng)基的制備增強。同一質(zhì)量濃度的醇提物溶液對這5種菌的抑制能細菌固體培養(yǎng)基的制備:稱取9g營養(yǎng)瓊脂溶解力由強到弱依次為:金黃色葡萄球、志賀氏菌、枯于裝有200mL蒸餾水的錐形瓶中,12℃滅菌20mim,草芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌。金黃色葡萄球待用。菌實驗最低抑菌質(zhì)量濃度為1g/100mL,其余4種細菌霉菌PDA固體培養(yǎng)基的制備:去皮馬鈴薯200g,均為5g/100mL切成小塊,加1000mL蒸餾水煮沸30min,雙層紗布過22蘆筍皮乙醇提取物對霉菌的抑制作用濾,濾液中加入2g/l0omL葡萄糖和2g0onL瓊脂,12l℃滅菌20min,待用133菌種的活化口毛霉將原試管菌種接種于試管斜面培養(yǎng)基上,細菌在37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,霉菌在28℃培養(yǎng)24hs如}·黑曲看134菌懸液的制備將活化好的菌種接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),于空氣浴振蕩器內(nèi)培養(yǎng)24h。質(zhì)量濃度(g/10omL35蘆筍皮乙醇提取物的制備圖2蘆筍皮乙醇提物對莓菌的抑制作用Fig. 2 Anti-mold activity of ethanol extract from Asparagus oficinalis稱取200g蘆筍皮浸泡于5L80%的乙醇中,65℃浸泡2h,過濾取濾液,于45℃使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮,然后用真空冷凍干燥機干燥,配制成1、5、10、15、由圖2可見,蘆筍皮乙醇提取物對3種莓菌的抑制20、30、40g/100mL的提取物水溶液,備用。作用不同,質(zhì)量濃度10~40g/100mL對青霉均有抑制作136雙蝶的制備用,而且質(zhì)量濃度越高抑制作用越強;30g/100mL和取已校正好底部水平的平皿,加15mL培養(yǎng)基作為40g100m的乙醇提取物對毛霉有抑制作用;質(zhì)量濃度底層,平皿加0.mL菌懸液,并均勻涂布在底層上作為為40菌層,置水平臺上冷卻備用中國煤化工莓有抑制作用137抑菌實驗CNMHG在制備好的平皿中放置不銹鋼牛津杯,將不同質(zhì)量蘆筍皮乙醇提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、基礎(chǔ)研究良品利字2010,Wo.3l,No.15枯草芽孢桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌和青霉、毛霉、參考文獻黑曲霉均有一定的抑制作用,而且對細菌的作用強于霉孫春艷趙伯濤,郁志芳等.蘆筍的化學成分及藥理作用的研究進菌。其抑菌作用可能與蘆筍皮乙醇提取物中黃酮類化合物展門中國野生柏物資源,2004,23(5):15有關(guān),研究表明黃酮類化合物具有很強的抑菌作用2133,顧振新,張建惠.蘆筍棄料的營養(yǎng)價值和開發(fā)利用研究南京農(nóng)業(yè)人學學報,1994,17(2)11113但也不排除蘆筍皮乙醇提物中其他物質(zhì)對抑菌實驗起了顧振新呂鳳霞,汪志君,等蘆筍皮的營養(yǎng)價值及其原汁在加工和輔助作用。因為實驗采用的蘆筍皮乙醇提取物為粗提貯存中的變化叮]江蘇農(nóng)業(yè)研究,2001,2(2:68-71.14]馮翠萍,程紅艷劉文喜,等.蘆筍皮對小鼠抗疲勞作用的實驗研究物,成分較多,除了黃酮類化合物(126mg/g)外,還有營養(yǎng)學報,2003,25(3:30-332多糖(193mg/g)等物質(zhì),多糖也有一定的抑菌作用,有15]馮翠萍,常茂,盧耀環(huán),等.蘆筍皮對實驗性高脂癥大鼠血脂水平的影響叮]山兩農(nóng)業(yè)大學學報,2001,21(3):265-267些多糖的抑菌性不具備廣譜性,多糖的抑繭活性一般也間o馮翠萍,常明呂,盧罐環(huán)蘆筍皮對人鼠脂質(zhì)過氧化作用的實驗研比較單一、針對性較強。有報道指出猴頭繭多糖對口究Cy中國農(nóng)學會中國青年農(nóng)業(yè)科學學術(shù)年報2002:415418腔類細菌有抑制作用山4,羥甲基大豆多糖對枯草桿菌和m馮翠萍,龐侯英常明呂,等.酶法提取蘆筍皮中高活性膳食纖維的研究[門農(nóng)業(yè)工程學報,2004,203)188191臘樣芽孢桿菌有抑制作用,魚腥草的水溶性多糖和爬山圖馮嗶萍,龐侯英,土曉聞,等.蘆筍皮中黃酮類化合物的提取、純虎多糖{1被證實也有不同程度的抑菌作用。因此關(guān)于蘆化廠藝的研究[Cy中國農(nóng)學會中國青年農(nóng)業(yè)科學學術(shù)年報,2004417420筍皮乙醇提取物抑菌的機理還有待于進一步研究。馮翠萍,王亞琴蘆筍皮抑菌作用的研究門食品科學,200,2812)105-109結(jié)論[0郝林.食品微生物學實驗技術(shù)M]北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:5;蘆筍皮乙醇提取物對金黃色葡萄球蘭、大腸桿菌、Ⅲ]劉冬梅李理楊曉泉,等用牛津杯法測定益生菌的抑菌活加食品研究與開發(fā),2006,27(3):11011枯草芽孢桿菌、志賀氏菌、沙門氏蔭和青霉、毛莓、黑[12】翟愛華韓艷慧,楊健麥胚英酮抑菌作用研究口黑龍江八一農(nóng)墾曲霉均有抑制作用,但抑制細菌的能力明顯強于霉菌人學學報,2005,17(5):69-72[3]李學堅.銀合歡葉總黃酮抑菌、利尿的實驗研究門廣西中醫(yī)學院金黃色葡萄球菌實驗最低抑制質(zhì)量濃度為』g/10mL,其學報,2005,8(3):13-14余4種細繭均為5g/100mL,且隨著提取物溶液質(zhì)量濃度14張庭紅,潘彈紅,朱升學餐頭制備物的抑菌活性研究門安激師范大學學報:自然科學版203,26(2)159-160的增大抑菌作用增強,抑制青霉、毛霉、黑曲霉的最1董愛文,陳建華周輝,等爬山虎多糖的提取及抑菌作用U,廣州低質(zhì)量濃度分別為10、30、40g/100mL食品工業(yè)科技,2003,193)15-17中國煤化工CNMHG