第25卷第6期北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)Vol.25, No.62003年11月JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITYNow.. 2003循環(huán)水根系分泌物收集技術(shù)的研究及應(yīng)用*賈黎明馮菊芬文學(xué)軍孫焱(北京林業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院) (山東 省淄博市國(guó)林管理處)摘要該文作者于2000年設(shè)計(jì)并應(yīng)用循環(huán)水根系分泌物收集裝置,結(jié)合D061型樹脂柱收集了純裁和混栽條件下楊樹與刺槐氨基酸類N索根系分泌物,并對(duì)其物質(zhì)形態(tài)進(jìn)行了初步研究.結(jié)果表明:循環(huán)水根系分泌物收集裝置能夠正常運(yùn)轉(zhuǎn),真正實(shí)現(xiàn)了在現(xiàn)實(shí)裁培條件下無(wú)損根系,實(shí)時(shí)、連續(xù)、富樂(lè)定量、準(zhǔn)確收集和研究根系分泌物.僅僅7d時(shí)間即可收集到根系分泌物中的多種氨基酸.并達(dá)到可檢出的量精氨酸和甘氨酸是純裁刺槐根系分泌物中的主要氨基酸，占游離氨基酸總量的43.2%;而精氨酸和賴氨酸是純裁楊樹以及混裁苗木根系分必物中的主要氨基酸.循環(huán)水根系分泌物收集技術(shù)為根系分泌物的深入研究提供了方法上的保障.關(guān)鍵詞根系分泌物,收集裝置,楊樹,刺槐,混交林,種間關(guān)系中圖分類號(hào)S718.43Jia Liming; Feng Jufen; Wen Xuejun; Sun Yan. Cycling water collection technique on root exudates andits application. Jourmal of Beijing Forestry University (2003)25(6)6-10 [Ch,9 ref.] School of Resourcesand Environment, Beijing For. Univ., 10083, P. R. China. .Amino acids in nitrogen root exudates of pure and mixed planted black locust and poplar seedlings werecollected and identified by the designed cycling water olleetion device of moot exudates and D061 ion-ex-change rsin in this paper. It shows thal: the ecycling- water cllection device of root exudates could be operatednormally. The certain amounts of root exudates are enriched in the device that makes the materials collectionsccessful without damaging the roots in time and continuously as well. Only by seven days, many kinds ofamino acids in nitrogen root exudates were collected and detected quantitatively. Anginine and glycin were themain kinds of amino acids in root exudates of pure planted black locust seedlings and reached 43.2% in disso-ciative amino acids. Anginine and lysine were the main kinds of amino acids in root exudates of pure plantedpoplar seedlings and mixed planted poplar and black locust seedlings. It is concluded that the ecycling- watercollection technique is much better than other methods to conduct the study on root exudates。Key words root exudates，clletion device, poplar, black locust, mixed forest, interspecific relationship我國(guó)對(duì)混交群落樹種間關(guān)系的研究經(jīng)歷了約主導(dǎo)作用的是養(yǎng)分關(guān)系,這種關(guān)系不僅表現(xiàn)為對(duì)土50年,從對(duì)樹種聞關(guān)系現(xiàn)象的簡(jiǎn)單描述逐步上升到壤的改良,而且也表現(xiàn)為樹種間N、P養(yǎng)分的互補(bǔ)轉(zhuǎn)對(duì)樹種間關(guān)系機(jī)理的深入研究上，取得了一大批研移,即通過(guò)根際微區(qū)楊樹可以轉(zhuǎn)移磷給刺槐,而刺槐究成果.尤其是進(jìn)入20世紀(jì)90年代,在國(guó)家自然科可將固定的氮轉(zhuǎn)移給楊樹12-4),這種轉(zhuǎn)移主要通過(guò)根學(xué)基金的多次重點(diǎn)資助下,對(duì)樹種間相互作用機(jī)制系的相互接觸來(lái)完成5).本文則欲通過(guò)研究?jī)蓸浞N的了解越來(lái)越深人,在化感作用、以養(yǎng)分關(guān)系為主的的根系分泌物組成,進(jìn)--步探索兩樹種養(yǎng)分轉(zhuǎn)移的生理生態(tài)相互作用機(jī)制等多方面都取得了重要突物質(zhì)形態(tài),從而為揭示樹種間養(yǎng)分轉(zhuǎn)移的生態(tài)學(xué)意破" .這一時(shí)期,北京林業(yè)大學(xué)“混交林及樹種間相義奠定基礎(chǔ),并為今后的研究進(jìn)行方法上的探索.互作用機(jī)制”課題組以楊樹、刺槐混交林為模式群落對(duì)根系分泌物的研究是植物營(yíng)養(yǎng)、化感作用、根對(duì)樹種間相互作用機(jī)制進(jìn)行了深人研究.前期研究際微生態(tài)研究的重要內(nèi)容,受到國(guó)內(nèi)外的普遍重視.發(fā)現(xiàn)，在楊樹刺槐混交林樹種間復(fù)雜相互關(guān)系中起因?yàn)橹参锔置谖锊粌H是根-土界面的潤(rùn)濕劑、微2003-04-16 收精htp://ww . wanfangdata. com.cn●國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(39230280)和國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(39870643)共同資助，第一作者:賈繁明,男,1968年生,博士,副教授.主姜研究方向:森林培育、城市林業(yè)。電話:010-62338194 E mljim@bjfu.edu.cn地址:100083北京林業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院.第6期賈絮明等:循環(huán)水根系分泌物收類技術(shù)的研究及應(yīng)用生物的能源物質(zhì),更重要的是植物營(yíng)養(yǎng)效率基因型定期噴灑福爾馬林溶液滅菌;配制好的Hoagland全差異的標(biāo)記物及植物間相互作用的紐帶.根系分泌背養(yǎng)液高溫高壓滅菌(溫度1219C,壓力0.1 MPa條物的收集、分離和鑒定是一個(gè)國(guó)際性的難題,尤其是件下,滅菌1個(gè)b);培養(yǎng)基質(zhì)處理和滅菌:將粗沙、如何能夠收集到足夠量不受微生物污染的根系原始鵝卵石、玻璃棉放在稀釋濃度為0.1% ~ 0.2%的鹽分泌物更為困難.目前,根系分泌物的收集方法主要酸中浸泡一晝夜,第2天用自來(lái)水沖洗至pH值為有出土根系淋洗法、營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)法、沙培法、瓊脂固7,然后將它們高溫高壓滅菌(條件同上).自然冷卻定定位培養(yǎng)收集法等(68] .根系淋洗法不可取，因是后作為栽培基質(zhì);將盆栽容器、乳膠管、玻璃器皿浸泡將根系挖出后淋洗,根系已受損傷,收集的根系分泌于稀釋濃度為0.15%福爾馬林溶液中1晝夜滅菌.物中更多的是根系本身的內(nèi)含物和傷流液;營(yíng)養(yǎng)液1.4 收集根系分泌物中氨基酸類N素物質(zhì)樹脂和培養(yǎng)法則使根系基本處于一個(gè)厭氧環(huán)境，收集的根系分泌物不能代表正常生長(zhǎng)狀態(tài)的情況;如解決了樹脂:購(gòu)自南開大學(xué)樹脂廠的D061大孔強(qiáng)酸性微生物的影響，沙培法和瓊脂固定定位培養(yǎng)法是當(dāng)苯乙烯系陽(yáng)離子交換樹脂.前效果較好的根系分泌物收集法,因其基本上能代樹脂的預(yù)處理:樹脂從廠家購(gòu)入時(shí)含有雜質(zhì),且表植物的自然生長(zhǎng)狀態(tài).本文通過(guò)總結(jié)前人的經(jīng)驗(yàn),全部為鈉型,需將樹脂轉(zhuǎn)化為氫型,以便與氨基酸進(jìn)在借鑒國(guó)外研究[9的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)并應(yīng)用循環(huán)水根行離子交換.處理方案如下:樹脂先用去離子水浸泡系分泌物收集裝置,配合離子交換樹脂,對(duì)刺槐1~2d,除去雜質(zhì);用2倍于樹脂體積的2 mol/L HCI( Robinia pseudoacacia)、群眾楊(小美旱)( Populus[ P.常溫下不斷攪拌30min,然后用去離子水洗至中性,simoni x ( P . pramidalis + Salix matsudana)])根系分再用2倍于樹脂體積的2mol/LNaOH常溫下攪拌泌物中氨基酸類N素物質(zhì)進(jìn)行了實(shí)時(shí)收集,并進(jìn)行30 min,然后再用去離子水洗至中性.將上一步驟再了分離鑒定.重復(fù)-遍,然后用2 mol/L HCl攪拌30 min, 用去離1試驗(yàn)材料和方 法子水洗至中性,待用.樹脂柱的制備:采用濕法裝柱.層析柱中先加入1.1 試驗(yàn)設(shè)置時(shí)間、地點(diǎn):2000年6月,盆栽試驗(yàn)設(shè)在北京林少量去離子水,取適量處理好的樹脂用去離子水浸濕后,裝入層析柱，注意裝柱時(shí)勿使柱內(nèi)有氣泡,最業(yè)大學(xué)苗圃生物中心溫室.植物材料:群眾楊(小美旱)當(dāng)年扦插苗,刺槐1后使液面與柱內(nèi)樹脂面相切,使樹脂保持濕潤(rùn).接人支置.年生實(shí)生苗.盆栽容器:去底5 L的方形塑料桶(規(guī)格15 cm.5 根系分泌物收集緩苗期過(guò)后(約20 d),用蒸餾水將系統(tǒng)中殘存x I5cmx 32 em),倒置.配置方式:3處理3重復(fù),3處理為純裁刺槐(每的營(yíng)養(yǎng)液和根系分泌物噴淋沖洗,直到?jīng)]有茚三酮盆3株);純?cè)詶顦?每盆2株);混栽(每盆2株刺槐顯色反應(yīng)為止,目的是去除緩苗期間的根系分泌物.將選擇的最佳樹脂柱接人循環(huán)水根系分泌物收集裝1株楊樹).栽植:選擇根系較發(fā)達(dá)的1年生刺槐苗(根系有置,采用去離子水循環(huán)接柱連續(xù)收集7 d后,用洗脫根瘤),根系進(jìn)行適當(dāng)修剪后用0.15%的富爾馬林液洗脫樹脂柱.洗脫分兩步進(jìn)行:第一步用pH=6.6溶液表面滅菌,栽植于容器中;早期在無(wú)菌土上扦插的0.38mol/L檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖溶液洗脫堿性氦基酸;第二步用pH= 8的0.2 mol/L Na, HPO,一的楊樹苗木移人容器.栽培基質(zhì):粗沙、鵝卵石、玻璃棉;以Hoagland全0.1mol/L檸檬酸緩沖溶液洗脫中性和酸性氨基酸.營(yíng)養(yǎng)液為培養(yǎng)液.然后用“旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器”對(duì)洗脫下來(lái)的根系分必物進(jìn)行1.2 循環(huán)水根系分泌物收集裝所需材料濃縮.將濃縮后的根系分泌物樣品送中國(guó)林業(yè)科學(xué)容器:去底5 L的方形塑料桶(規(guī)格15 cmx 15院森林生態(tài)環(huán)境研究所有機(jī)分析室,利用氨基酸自cmx 32 cm),倒置;小型空氣壓縮機(jī):功率35W;橡動(dòng)分析儀進(jìn)行樣品分析.皮塞:大小以可塞嚴(yán)容器口為準(zhǔn),且橡皮塞中部打孔2結(jié)果與分析塞入玻璃管;乳膠管;直玻璃管若干;“T"型管;“Y"型管;小漏斗;特制帶方孔木桌;樹脂柱:層析柱,規(guī)2.1循環(huán)水根 系分泌物收集裝置運(yùn)行格為10mmx200mm.在前人對(duì)楊樹、刺槐根系分泌物收集研究的基1.3滅菌處理礎(chǔ)上”,為了能真正實(shí)現(xiàn)在現(xiàn)實(shí)栽培條件下無(wú)損根培養(yǎng)室為封閉玻璃小溫室,內(nèi)設(shè)紫外燈消毒,并系、實(shí)時(shí)連續(xù)、高集、定量、準(zhǔn)確收集和研究根系分8北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)第25卷泌物,專門設(shè)計(jì)并制作了“循環(huán)水根系分泌物收集裝棉,然后鋪一層鵝卵石,起到密封的作用，可阻止或置(圖1)".減少空氣中微生物向循環(huán)系統(tǒng)中侵人.(3)空氣壓縮機(jī)進(jìn)氣口連接一小漏斗,小漏斗中塞人經(jīng)滅菌處理的玻璃棉,防止空氣中的灰塵進(jìn)人機(jī)體,延長(zhǎng)空氣壓縮機(jī)的工作壽命,同時(shí)也阻止或減少空氣中的細(xì)菌進(jìn)人循環(huán)裝置.(4)循環(huán)裝置中“T型玻璃接口的導(dǎo)氣口應(yīng)調(diào)整在回水口的下方,氣流才能順利使下水口流出的循環(huán)液回流到栽培容器中;同時(shí)氣流在“T”型玻璃接口下水口處產(chǎn)生負(fù)壓，可促使樹脂柱中的循環(huán)液下流，從而利于整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)循環(huán)液的正常流動(dòng).(5)回水管要相對(duì)較長(zhǎng),利于來(lái)回調(diào)整回流液回流于栽培容器中的位置(調(diào)整回水位置,可使回流液16|在各個(gè)方向均勻向下淋洗根系分泌物).(6)循環(huán)液(培養(yǎng)液或去離子水)要適時(shí)適量注人,注人量太少會(huì)影響循環(huán)系統(tǒng)的正常循環(huán),注人量12過(guò)多,會(huì)使苗木根系長(zhǎng)時(shí)間浸泡處于無(wú)氧呼吸狀態(tài)，可能致使苗木死亡.培養(yǎng)液的無(wú)節(jié)制加入會(huì)出現(xiàn)苗木營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩,導(dǎo)致苗木的高生長(zhǎng)過(guò)度,而影響苗木的1裁培容器; 2盆裁苗木;3幕卵石;4駿璃棉;5粗鈔子:6橡皮.徑生長(zhǎng),因此培養(yǎng)液可隔一段時(shí)間(如:1周)加1塞;7玻璃管;8下水管:9樹脂柱: 10樹脂: 11砂心; 12止水次,其它時(shí)間用滅菌去離子水.鉗;13"T"型玻璃接口; 14回水管; 15"Y"型玻璃接口; 16導(dǎo)氣管; 17小型空氣壓編機(jī): 18小豉消漏斗。(7)正式收集前，即循環(huán)裝置未安裝樹脂柱之圖1循環(huán)水根系分泌物收集裝置結(jié)構(gòu)前,循環(huán)液流速不需控制，只要保證其正常循環(huán)即FIGURE 1 The structure of the cyeling water eeleliene derice可.安裝樹脂柱之后,不但要保證循環(huán)液的正常循o roo exudate環(huán),同時(shí)需要通過(guò)止水鉗調(diào)節(jié)循環(huán)液的流速,使其保其工作原理是苗木栽植后,向容器中注人適量持在5 m/min,這樣才能使根系分泌物中的N索物培養(yǎng)液,培養(yǎng)液向下滲流的過(guò)程中將根系分必物向質(zhì)與樹脂充分進(jìn)行交換;如果循環(huán)液流速過(guò)快,交換下淋洗,小型空氣壓縮機(jī)能夠長(zhǎng)時(shí)間不間斷工作,其吸附還來(lái)不及進(jìn)行,根系分泌物又被回流到裁培容吹出的氣流通過(guò)乳膠管(導(dǎo)氣管)到達(dá)下水口時(shí),在.器中,達(dá)不到交換吸附的目的.此產(chǎn)生負(fù)壓,可使培養(yǎng)液通過(guò)乳膠管(導(dǎo)氣管和回流(8)正式進(jìn)行根系分泌物.N素物質(zhì)的收集時(shí)，管)將自栽培容器中下流的培養(yǎng)液回到栽培容器,形為了能使循環(huán)液充分淋洗栽培容器各個(gè)部位的根系成又一次下滲淋洗,循環(huán)回路形成.在培養(yǎng)液下水口分泌物N素物質(zhì),我們將回流液蓄積于小噴壺中，接入選擇性吸附樹脂柱,根系分泌物中的物質(zhì)會(huì)被達(dá)一定量時(shí)用人工向栽培容器中均勻噴酒.樹脂柱不斷富集.經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的試驗(yàn)證實(shí)這一裝置2.2收集根系氨基酸類N案分泌物的影響因素能夠正常運(yùn)轉(zhuǎn),并能在根系分泌物研究中發(fā)揮很好2.2.1 Hoagland 營(yíng)養(yǎng)液對(duì)收集根系氨基酸類N素的作用.分泌物的影響為保證循環(huán)裝置正常工作,使樹脂柱能成功富Hoagland 營(yíng)養(yǎng)液中含有大量的K' .Na* 、Ca'等集根系分泌物,我們?cè)趯?shí)踐中總結(jié)得出-些經(jīng)驗(yàn):金屬陽(yáng)離子,這些金屬陽(yáng)離子與樹脂的離子交換能(1)培養(yǎng)室、循環(huán)裝置的各組件均需滅菌處理，力遠(yuǎn)大于根系分泌物中N素有機(jī)物質(zhì)與樹脂的離使循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)部盡可能的在無(wú)菌條件下運(yùn)轉(zhuǎn),以防子交換能力.試驗(yàn)表明,用2 mL營(yíng)養(yǎng)液過(guò)柱后,其中止大量微生物的侵人使根系分泌物中的N素物質(zhì)的Ca*被樹脂100%離子交換;用營(yíng)養(yǎng)液濕法裝柱變性,致使試驗(yàn)收集的并非真正的根系分泌物.比用蒸餾水濕法裝柱最大離子交換氨基酸的量減少(2)容器最底層墊一層玻璃棉,玻璃棉 上再鋪43% ;用營(yíng)養(yǎng)液代替蒸餾水配甘氨酸+丙氨酸+賴-層鵝卵石,可阻止粗沙子被循環(huán)液淋洗進(jìn)人玻璃氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,其最大離子交換量減少74% .試驗(yàn)管、乳膠管,致使循環(huán)受阻;其上放入裁培基質(zhì)中還發(fā)現(xiàn),在采用循環(huán)水收集根系氨基酸類N素分粗河沙,將苗木裁培好后,再在粗沙上鋪一層玻璃泌物過(guò)程中,收集1h后,取過(guò)柱前的循環(huán)液比色呈第6期賈黎明等;循環(huán)水根系分泌物收集技術(shù)的研究及應(yīng)用無(wú)色,但過(guò)柱后比色卻呈微紫或淡紫色.這是因?yàn)檫^(guò)外,又在洗脫后的流出液中加10%醋酸鉛,生成白柱前循環(huán)液中的氨基酸含量較低,且濃度較小，所以色沉淀后將其過(guò)濾,此操作重復(fù)5~6次,直至不再比色時(shí)會(huì)呈無(wú)色,而循環(huán)液過(guò)柱后樹脂除了離子交產(chǎn)生白色沉淀,證明鞣酸全部除去.換營(yíng)養(yǎng)液中的金屬陽(yáng)離子外.也能離子交換氨基酸,2.3混栽楊樹、剌槐根系N素分泌物分析但由于樹脂離子交換金屬陽(yáng)離子的能力優(yōu)于氨基表1根系分泌物氨基酸含量酸，所以被富集在柱子上的氨基酸又被取代下來(lái),此TABLE I The content ofacids in root exudates時(shí)氨基酸的濃度較過(guò)柱前高,因而比色時(shí)顯紫色.可of black locust and poplar seedlings見，Hoagland營(yíng)養(yǎng)液對(duì)根系分泌物中氨基酸類N素純槐1純楊/物質(zhì)的收集有很大影響,從某種程度上講,營(yíng)養(yǎng)液具氨基酸(uB°周1 (0g周一) (rx周一)混栽/混裁理論值1有洗脫氨基酸的作用.另外,一旦培養(yǎng)液中的金屬陽(yáng)周-)離子被交換離子交換,循環(huán)液將呈酸性,以至苗木根天門冬氨酸0.1170.078蘇氨酸0.4620.0110.312系滲透勢(shì)發(fā)生了變化,苗木會(huì)表現(xiàn)出受鹽脅迫的萎絲氨酸0.5290.0240.361蔫現(xiàn)象(試驗(yàn)開始2個(gè)h左右就會(huì)有所表現(xiàn)).谷氨酸0.00 :0.002為了排除營(yíng)養(yǎng)液對(duì)收集氨基酸類N素根系分甘氨欣0.9280.0170.624丙氨酸0.3570.0130.242泌物的影響,在正式收集根系分泌物時(shí)需將營(yíng)養(yǎng)液纈氨酸0.1630.112全部推放掉,并用蒸餾水少量多次沖洗至沒有無(wú)機(jī)蛋氨酸離子.前面已經(jīng)提到，在培養(yǎng)期間為控制苗木營(yíng)養(yǎng)過(guò)異亮氨酸0.0770.029 0.0250.061甚需隔一段時(shí)間(7d 左右)加一次營(yíng)養(yǎng)液,因此在營(yíng))亮氨酸0.1650.06t0.069 .0.130酪氨酸0. 194.0.1430.0640.177養(yǎng)液培養(yǎng)-段時(shí)間后排空營(yíng)養(yǎng)液(不要超過(guò)7d)對(duì)0.11苗木生長(zhǎng)沒有什么不利影響，在此期間收集氨基酸3組氨酸0.1480,079 0.2170.12514 賴氨酸0.2990.5570.6410.385類根系分泌物為好.15 精氨酸1.0710.3860.9130.8432.2.2收集時(shí)間對(duì)根系 N素分泌物測(cè)定的影響氨基酸總量1.97在預(yù)備試驗(yàn)時(shí),利用循環(huán)水根系分泌物收集裝注:一為痕量;混裁理論值=純槐x23+純楊x1/3.置收集分泌物24h,并用兩種洗脫液以最小洗脫量分別對(duì)各種氨基酸進(jìn)行洗脫(即先用3 mL pH=6.6前期研究“中“測(cè)定了混槐及純槐根系分泌物的0.38mol/L檸橡酸-檸檬酸三鈉緩沖溶液洗脫堿中易被吸收的小分子N素物質(zhì),結(jié)果表明,刺槐根性氨基酸,再用8mLpH=8的0.2mol/LNarHPO。-系分泌物中以氨基酸態(tài)-N為最多,其次為NH: -N,0.1mol/L檸檬酸緩沖溶液洗脫中性、酸性氨基酸)，NO;-N含量較少,而酰氨態(tài)-N含量極低”,本研究將洗脫后的11mL流出液合并在一起,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)中應(yīng)用“二縮脲反應(yīng)”檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在楊樹、刺槐純裁和儀在50C~ 60下濃縮成5 mL,作為根系N素分泌混裁的條件下苗木的根系分泌物中未檢測(cè)出有多物待測(cè)液送中國(guó)林科院分析鑒定.但因一天內(nèi)其根肽、蛋白質(zhì)等N素物質(zhì),因此首先主要以含量最多系氨基酸類N素分泌量太少,用氨基酸自動(dòng)分析儀的氨基酸態(tài)-N為對(duì)象進(jìn)行楊樹、刺槐N素根系分測(cè)定時(shí),前面三種氨基酸(天門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨泌物的收集、分析.由表1可以看出,收集7 d純槐酸)出現(xiàn)--饅頭峰,無(wú)法分開.所以,再次試驗(yàn)時(shí)將時(shí)的根系N案分泌物中精氨酸和甘氨酸含量較高,占間延長(zhǎng)至7 d,并用去離子水進(jìn)行循環(huán),以收集根系游離氨基酸總量的43.2% ;純楊的根系N素分泌物分泌物,結(jié)果表明根系分泌物中氨基酸類物質(zhì)的量明中賴氨酸和精氨酸含量較高,占游離氨基酸總量的顯加大,達(dá)到了可以檢出的水平(下面將詳細(xì)討論).66.0%;混栽刺槐、楊樹根系N素分泌量中精氨酸和2.2.3根系分泌物中鞣酸對(duì)收集 N素物質(zhì)的影響賴氨酸含量較高,占游離氨基酸總量的78.8%.將.在收集根系N素分泌物時(shí)發(fā)現(xiàn)，樹脂柱上明顯每一處理的根系分泌物折算到單株上,則純?cè)源袒备患恍┌咨镔|(zhì)，而且洗脫后的流出液比色時(shí)產(chǎn)氨基酸分泌總量為1.543 u/(周.株),純?cè)詶顦浒鄙罅康陌咨恋砦镔|(zhì),用醋酸鉛鑒定是鞣酸物質(zhì)基酸分泌總量為0.715 ug/(周.株),混栽苗木氨基在起作用.為了排除其可能造成的干擾，-方面我們酸分泌相對(duì)總量為0.657 u/(周.株),純槐單株根.在接柱收集時(shí)將樹脂柱上加少許玻璃纖維,這樣既系N素分泌物中氨基酸的含量遠(yuǎn)大于純楊和混栽，可以阻擋大分子的鞣酸,也可以防止循環(huán)收集時(shí)沖分別是二者的2.2和2.3倍.混栽苗木根系N素分動(dòng)樹脂:另一方面,在洗脫前用蒸餾水多次沖洗樹脂泌物相對(duì)總量明顯低于純槐,而栽培裝置是全封閉，柱.這兩種方法均能除去大部分鞣酸和其它雜質(zhì).另那么混裁中刺槐根系分泌的氨基酸為何減少?有苗10北京林業(yè)人學(xué)學(xué)報(bào)第25卷木根系生物量不同的可能因素,更可能的是盆栽中長(zhǎng).如何解決延長(zhǎng)收集時(shí)間與為苗木補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)間的苗木根系發(fā)達(dá)導(dǎo)致混栽刺槐與楊樹的根系相互交錯(cuò)矛盾,需進(jìn)一步的分析和研究.接觸,刺槐根系分泌中大量的氨基酸通過(guò)根系接觸(4)精氨酸和甘氨酸是純?cè)源袒备捣置谖镏械耐緩街苯愚D(zhuǎn)移給楊樹.假設(shè)以純裁苗木單株分泌的主要氨基酸,而精氨酸和賴氨酸是純?cè)詶顦湟约暗拿糠N氨基酸量為標(biāo)準(zhǔn)值按株數(shù)折算出混栽苗木的混栽苗木根系分泌物中的主要氨基酸.純?cè)源袒眴卫碚摲置诹縿t可以獲得更多信息,結(jié)果表明(表1),株根系氨基酸類N素分泌物總量高出純?cè)詶顦浜突煸悦缒靖捣置谖镏写蟛糠职被岷涂偭康膶?shí)際混栽苗木的2.2倍和2.3倍.混栽刺槐單株根系氨值大大小于理論值,其中蘇氨酸、絲氨酸、甘氨酸、丙.基酸類N素分泌物含量的減少有可能是楊樹吸收氨酸纈氨酸等下降的幅度非常大,但組氨酸和賴氨的結(jié)果.以純?cè)悦缒締沃攴置诘拿糠N氨基酸量為標(biāo)酸則例外,其實(shí)際值要顯著高于理論值,說(shuō)明混栽可準(zhǔn)值，按株數(shù)折算出混裁苗木的理論分泌量,表明混刺激這兩種氨基酸的分泌,至于其生物學(xué)意義還需栽苗木根系分泌物中大部分氨基酸和總量的實(shí)際值進(jìn)一步探討.大大小于理論值.其中蘇氨酸、絲氨酸、甘氨酸、丙氨從利用循環(huán)水根系分泌物收集裝置7 d研究的酸、纈氨酸等下降的幅度非常大,但組氨酸和賴氨酸結(jié)果看,循環(huán)水根系分泌物收集裝置結(jié)合D061型樹則例外,其實(shí)際值要顯著高于理論值,說(shuō)明混裁可刺脂柱對(duì)氨基酸類N素根系分泌物的收集是確有成激這兩種氨基酸的分泌,至于其生物學(xué)意義還需進(jìn)效的:D061型樹脂對(duì)氨基酸的交換吸附具有相對(duì)廣一步探討.泛性,循環(huán)水根系分泌物收集裝置的設(shè)計(jì)應(yīng)用為長(zhǎng)(5)循環(huán)水根系分泌物收集裝置可廣泛用于各時(shí)間連續(xù)收集根系N素分泌物提供了條件,僅僅一種植物的根系分泌物收集,但收集樹脂則需根據(jù)所周時(shí)間已經(jīng)收集到多種氨基酸,并已達(dá)到可檢出的收集的根系分泌物類型不同而不同.量.但同時(shí)也可看出一-周收集的結(jié)果,各盆栽根系分泌物氨基酸的含量總的來(lái)說(shuō)是非常低的,有些氨基參考文獻(xiàn)酸含量在分析過(guò)程中呈現(xiàn)為痕量,說(shuō)明收集時(shí)間過(guò)短.如何解決延長(zhǎng)收集時(shí)間與為苗木補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)間的沈國(guó)舫,翟明普.森林培育學(xué).北京:中國(guó)林業(yè)出版社,00沈國(guó)防,賈黎明，翟明普.沙地楊樹刺槐人工混交林的改良土壤功能及養(yǎng)分互補(bǔ)關(guān)系，林業(yè)科學(xué)1998,34(5);12-203結(jié)論與建議3賈黎明,翟明普,胡廷杰，等。楊樹刺槐種間磷素營(yíng)養(yǎng)關(guān)系。見:沈國(guó)舫主編.混交林研究.北京:中國(guó)林業(yè)出版社199750-57(1)循環(huán)水根系分泌物收集裝置設(shè)計(jì)成功，能4 賈擊明,看明普,胡延杰，等.楊樹剌槐種同氨素養(yǎng)分轉(zhuǎn)移.見:夠正常運(yùn)轉(zhuǎn),真正實(shí)現(xiàn)了在現(xiàn)實(shí)栽培條件下無(wú)損根沈國(guó)舫主編.混交林研究.北京:中國(guó)林業(yè)出版社19979.41-49系、實(shí)時(shí)、連續(xù)、富集、定量、準(zhǔn)確收集和研究根系分5賀偉,賈黎明。棍栽楊樹-?；遍g磷素養(yǎng)分轉(zhuǎn)移途徑的研究.應(yīng)泌物,這為根系分必物的深人研究提供了方法上的用生態(tài)學(xué)報(bào)2003,14(4):481-4866張福鎖.環(huán)境脅迫與植物根際營(yíng)養(yǎng)。北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，保障.1998(2)循環(huán)水根系分泌物收集裝置運(yùn)轉(zhuǎn)正常和根7陳華君，金幼薯,王沙生,盆栽楊樹刺槐根系及其分泌物的生化系氨基酸類根系分泌物成功收集需要注意一些細(xì)成分，見:沈國(guó)舫主編.混交林研究北京:中國(guó)林業(yè)出版社，節(jié).其中消除Hogland營(yíng)養(yǎng)液對(duì)收集根系氨基酸類1997. 78-87N索分泌物的影響、消除根系分泌物中鞣酸對(duì)收集8張彥東,王慶成,李森友。水曲柳落葉松根系分泌物對(duì)土壤磷吸N素物質(zhì)的影響、確定恰當(dāng)?shù)氖占瘯r(shí)間等非常重要.附與解吸的影響。見:沈固舫主編.混交林研究,北京:中國(guó)林業(yè)(3)循環(huán)水根系分泌物收集裝置結(jié)合D061型出版社,155-1589 Tung C s, Young C C. Cllction end ientificatio of llopahie com樹脂柱對(duì)根系分泌物的收集確有成效，僅僅一周時(shí).pounds from the undisurbed root syte o Bjgala Limpognass ( Hemar-間已經(jīng)收集到多種氨基酸,并已達(dá)到可檢出的量.但thria alisima). PI Plysiol .1982 ,69: 155-160同時(shí)也可看出一周收集各盆裁根系分泌物氨基酸的含量總的來(lái)說(shuō)是非常低的,有些氨基酸含量在分析(責(zé)任編輯胡涌)過(guò)程中呈現(xiàn)為痕量,說(shuō)明收集時(shí)間還太短,有必要加