第18卷第9期中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志Vol 18, No 92012年5月Chinese Journal of Experimental Traditional Medical FormulaeMay,2012祁木香提取工藝優(yōu)選王剛,侯志飛,相會(huì)欣,谷菲菲,張雪榮(河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院,石家莊050026)摘要]目的確定祁木香的最佳提取工藝。方法:采用正交試驗(yàn)對祁木香提取工藝進(jìn)行優(yōu)選,以土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯含量為指標(biāo),考察乙醇體積分?jǐn)?shù)、溶劑用量提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素的影響,采用HPLC進(jìn)行含量測定。結(jié)果:最佳提取工藝為15倍量85%乙醇提取3次,每次Ih。結(jié)論;該優(yōu)選提取工藝穩(wěn)定可行、提取率高,為祁木香的提取提供科學(xué)依據(jù)關(guān)鍵詞]祁木香;提取T藝;正交試驗(yàn);土木香內(nèi)酯;異土木香內(nèi)酯【中圖分類號]R283.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號]1005-9903(2012)09002603Optimization of Extraction Technology for Inula heleniumWANG Gang, HOU Zhi-fei, XIANG Hui-xin, GU Fei-fei, ZHANG XHebei Chemical and Pharmaceutical College, Shijiazhuang 050026Abstract] Objective: To determine optimum extraction technology of inulaOrthogonal test was used to optimize extraction technology of I. helenium with the content of alantolactone andisoalantolactone as indexes. Effect of the concentration of ethanol. the amount of solvent extraction time andextraction times were investigated, the content of index components were determined by HPLC. Result: Optimumextraction technology was as follows: refluxing extraeted 3 times with 15 times the amount of 85% ethanol, 1 heach time. Conclusion: This optimized extraction technalogy was stable and feasible with high extraction ratio, itcould provide scientifie basis for extraction of I. heleniumKey words] Inula helenium; extraction process; orthogonal design; alantolactone: isoalantolactone祁木香在2010年版《中國藥典》中以土木香名木香內(nèi)酯含量為指標(biāo),采用回流提取法,采用正交試收載,為菊科植物的干燥根,為安國八大祁藥之一,驗(yàn)優(yōu)選祁木香的提取工藝。辛、苦,溫,歸肝、脾經(jīng),具有健脾和胃、行氣止痛、安1材料胎的作用,用于胸脅、脘腹脹痛、嘔吐瀉瘌、胸脅挫SSI PC2000型高效液相色譜儀(美國SSI分析傷、岔氣作痛、胎動(dòng)不安等癥3。祁木香的提取工儀器有限公司),JD104型電子天平(沈陽龍騰電藝研究對其產(chǎn)業(yè)開發(fā)、藥理研究及擴(kuò)大藥源具有重子有限公司),祁木香藥材購自河北省安國市藥材要意義。目前只有采用CO2超臨界萃取法和乙醇市場經(jīng)河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院李洪教授鑒定回流提取后經(jīng)柱色譜法制備土木香提取物的專利報(bào)為菊科植物 Inula helenium l.的干燥根,取干燥的祁道“,未見其他文獻(xiàn),所能購到的市售土木香提取木香粉碎,過篩備用。土木香內(nèi)酯(批號110760物均為土木香水提物。本研究以土木香內(nèi)酯和異土200507)、異土木香內(nèi)酯(批號076120002)對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供,甲醇、乙腈為色譜純,其余試劑均為分析純。收稿日期]20110825(015)[金項(xiàng)目】河北省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(10276431)2方法與結(jié)果一】王剛土碳從事中研究Mm:21忙中國煤忙含量測定851o165,E-mhil:we697@163.cm譜柱(4.6mmx[通訊作者]·張雪榮碩士,教授從事藥物分離與純化研究,250CNMHG5%碳酸水溶液T:03185116, E-mai: ZHXR62e163.cm(60:40),流速1.0mL·min,檢測波長194mm,柱王剛,等:祁木香提取工藝優(yōu)選溫30℃,進(jìn)樣量20μL40mL,定量轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中,加乙醇至刻度,搖2.1.2對照品溶液制備精密稱取干燥至恒重的勻,濾過精密量取濾液25mL,濃縮至近干,殘?jiān)赢愅聊鞠銉?nèi)酯和土木香內(nèi)酯對照品適量,加甲醇分甲醇溶解轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中,甲醇稀釋至刻度別配制成475,380mg·L"的對照品溶液。精密吸搖勻,濾過,取續(xù)濾液1mL,甲醇稀釋至10mL,搖取對照品儲(chǔ)備液2m,甲醇定容至10mL,播勻,得勻,濾過,取續(xù)濾液按21,1色譜條件進(jìn)行測定,分質(zhì)量濃度分別為95,76mgL的混合對照品液。別吸取對照品溶液、供試品溶液各20μL,進(jìn)樣,記2.L.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密吸取對照品儲(chǔ)備液5錄色譜圖見圖1。正交試驗(yàn)結(jié)果見表2,方差分析見mL,采用倍比稀釋法制得系列混合對照品溶液,分表3別進(jìn)樣20μ,測定其峰面積,得異土木香內(nèi)酯和土木香內(nèi)酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y=82464X-10°(r=0.9992),在0.475~475叫線性關(guān)系良好;Y=110438X-859049(r=0.9993),在0.38-3.8gg線性關(guān)系良好2.2提取工藝正交試驗(yàn)根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,以乙醇體積分?jǐn)?shù)溶劑用量提取時(shí)間和提取次數(shù)為考察因素每個(gè)因素設(shè)計(jì)3個(gè)水平,按L(3)正交表設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)(表1)分別取祁木香藥材4g,按正交因素表中各因素水平進(jìn)行回流提取,濾過,合并濾液,減壓濃縮至約豪1祁木香提取工藝正交試驗(yàn)因素水平乙醇體積分?jǐn)?shù)/%溶劑用量/倍提取時(shí)間/h提取次數(shù)A.對照品;B.供試品;1.異土木香內(nèi)酯;2.土木香內(nèi)酯1祁木香HPLC衰2祁木香提取工芝正交試膾安排異土木香內(nèi)酯土木香內(nèi)酯】12223332.718異土木香內(nèi)酯0.6023.2383.ll4土木香內(nèi)釃2.1192.0792.9110.1000.039YH中國煤化工CNMHG第18卷第9期中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志Vol 18. No 92012年5月Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae囊3祁木香提取工藝正交試驗(yàn)方差分析1.628%,1.691%,1.656%。說明確定的最佳工藝方差來源ssf是合理的。異土木香A32.050210213.68c0.013討論<0.05市售土木香提取物均為土木香水提物,經(jīng)測定C(誤差)0.0032異土木香內(nèi)酯和土木香內(nèi)酯含量極低。分別取異土0.13422.77<0.05木香內(nèi)酯和土木香內(nèi)酯對照品溶液,在190-400土木香內(nèi)A6625852.81<0.01am掃描,均在193-195mm有最大吸收,故檢測波長定為194mm。C(誤差)0.003預(yù)試驗(yàn)中分別以水、50%乙醇、60%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無水乙醇等為注:Fa5(2,2)=19.00,50(2,2)=99.00提取溶劑進(jìn)行提取。由于異土木香內(nèi)酯和土木香內(nèi)酯易溶于乙醇、三氯甲烷、苯、乙醚,幾乎不溶于水,以異土木香內(nèi)酯含量為評價(jià)指標(biāo),各因素對提若選用低體積分?jǐn)?shù)乙醇則不利于有效成分提取完取工藝影響為A>D>B>C,以極差最小的C因素全,故正交試驗(yàn)中選擇體積分?jǐn)?shù)分別為75%,85%,為誤差項(xiàng)進(jìn)行方差分析,A因素有極其顯著性影響,95%的乙醇進(jìn)行考察結(jié)果表明85%乙醇提取率較B,D因素有顯著性影響。結(jié)合直觀分析結(jié)果,確定高,與預(yù)實(shí)驗(yàn)中單因素試驗(yàn)結(jié)果一致。最佳提取工藝為A2B2C3D3,即加15倍85%乙醇提取3次,每次1.5h。[參考文獻(xiàn)]以土木香內(nèi)酯含量為評價(jià)指標(biāo),各因素對提取[1」中國藥典一部[S].2010:1工藝的影響與異土木香內(nèi)酯一致,以極差最小的C[2」王緒穎,賈曉斌陳彥木香類藥材的研究進(jìn)展[因素為誤差項(xiàng)進(jìn)行方差分析,其中A因素有極其顯中藥材,2010,33(1):153蓍性影響。結(jié)合直觀分析結(jié)果,確定最佳提取工藝[3]李雪蓮樸嘉善土木香的化學(xué)成分及藥理作用研究為A2B2C2D3,即加15倍85%乙醇提取3次,每次進(jìn)展.中國現(xiàn)代中藥,2007,9(6):28[4]李曉波霍炎,史海明等,用于促進(jìn)胃動(dòng)力的士木香綜合考慮提取效率和成本等,確定最佳提取工提取物的提取方法:中國,l01380348[P].2009藝為A2B2C2D3,即加15倍85%乙酶提取3次,每次[5]侯志飛,張勉之,李洪,等高效液相色譜法測定祁木23驗(yàn)證試驗(yàn)按優(yōu)選的最佳工藝制備供試品溶香藥材中異土木香內(nèi)酯和土木內(nèi)酯[J]中草藥2011,42(5):916.液,進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn)。結(jié)果提取率分別為異土木[責(zé)任編輯仝燕]香內(nèi)酯2.511%,2.703%,2.611%;土木香內(nèi)酯中國煤化工CNMHG