2010年6月第12卷第3期湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)●29●June 2010, Vol. 12, No.3Joumal of Hubei University of Chinese Medicine吡硫醇聚乙二醇前體藥物含量測(cè)定蔡波濤' ,王紅”,薛大權(quán)”,張圍宇2(1.湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院2009級(jí)碩士研究生,湖北武漢430065;2.湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，湖北武漢430065)摘要:目的摸索吡硫醇聚乙二醇前藥 中吡硫醇的含量測(cè)定方法。方法以吡硫醇為對(duì)照 品,用紫外分光光度計(jì)對(duì)其含量進(jìn)行了初步測(cè)定,測(cè)定波長(zhǎng)為314nm。結(jié)果吡巰醇濃度在2. 88-23.02 ug/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為.999;含量測(cè)定回收率為99. 49% ,RSD為1.15%(n=9)。結(jié)論采用紫外分光光度法測(cè)定吡硫醇聚乙二醇前藥中吡硫醇含量的方法簡(jiǎn)便可行。.關(guān)鍵詞:吡巰醇;單甲氧基聚乙二醇;前藥;紫外分光光度法;含量測(cè)定中圖分類號(hào):R 944.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1008 -987X(2010)03 -0029 -02Determination of Pyritinol in Pyritinol PEG ProdrugsCAI Botao, WANG Hong, XUE Daquan,ZHANG Weiyu(College of Pharmacy, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065 ,China)Abstract: Objective To explore the content determination of pyritinol in pyritinol PEG prodrugs. Methods Determined the pyritinolin pyritinol PEG prodrugs by UV - spectrophotometry using pyritinol as comparison sample. Wavelength:314nm. Resuts The content of thepyritinol solution showed a better linear relationship with the absorbance in the range of 2. 88 - 23.02 ug/mL,Correlation cofficient Was0.999 ;The recovery rate was 99. 49% and the relative standard deviation was 1. 15% (n =9). Conclusion The method of determination issimple and Feasible.Keyword: Pyritinol; Methoxy polyethyleneglycol; Prodrugs; Utraviolet spectrophotomety; Content determination吡硫醇主要用于治療阿爾茲海默病、腦血管疾患性癡呆、腦震蕩或腦外傷后遺癥、腦炎及腦膜炎后遺癥等伴隨的頭暈脹tsc[J_ 飲痛、失眠、記憶力減退、注意力不集中、情緒變化等癥狀。臨床主要用其鹽酸鹽,分子式為CrgHzN2O,S2●2HCl●H20。但該藥對(duì)血管黏膜有刺激作用,易發(fā)生注射部位血管腫脹疼痛、呈青HO、2)H紫色樹枝狀及注射部位乃至整個(gè)上肢皮膚水腫、發(fā)硬、癢痛等CHy不良反應(yīng)1-4。該藥在臨床應(yīng)用過程中,因其半衰期(tn)短,HgC口服給藥1天3次,很不方便,而其靜脈滴注時(shí),對(duì)血管有很強(qiáng)圈1吡硫醇聚乙二酵前藥結(jié)構(gòu)式的刺激作用,產(chǎn)生疼痛,病人難以耐受。筆者采用單甲氧基聚乙1材料二醇與吡硫醇合成前體藥物15-。通過對(duì)目標(biāo)化合物的體外降11 儀器解試驗(yàn)和刺激性試驗(yàn)的初步研究，顯示出一定的緩釋效果和島津紫外可見分光光度計(jì)UV - 1700; METTLER TOLEDO對(duì)注射部位及血管的刺激性有顯著減小的作用。筆者在參照電子天平( max200g,d =0.1mg) ;KQ - 250B型超聲波清洗器(昆文獻(xiàn)周的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，采用紫外分光光度法[0]對(duì)吡硫醇山市超聲儀器有限公司)聚乙二醇合成的前體藥物(見圖1)含量測(cè)定進(jìn)行了方法學(xué)考1.2 試藥察。單甲氧基聚乙二醇前藥(本實(shí)驗(yàn)室自制,批號(hào):20080701 ,中國(guó)煤化工金項(xiàng)目:翻北省自然科學(xué)基金資助課題(2007ABA213)。MHCNMH G作者簡(jiǎn)介:蔡波街(1980- ) .男,湖北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院2000級(jí)碩士研究生,E - mu;cuwww 1os. c∞m。通訊作者:王紅,女,教授,研究方向:新藥研究,電話:13607160931 ,E - mil:wanghonghb502@ yaoo. com. cn。●30●湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2010年第12卷第3期20080702 , 20080703);吡硫醇對(duì)照品(含量: 98.5%,水分:由于吡硫醇結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)醇羥基和兩個(gè)酚羥基(見圖1),不0. 17% ,批號(hào):080519,上海新云化工有限公司提供) ;氫氧化鈉、可能是某一單一的化合物，而是以吡硫醇一端醇羥基修 飾為主鹽酸、磷酸二氫鉀均為分析純的一類前藥,他們的共同特點(diǎn)都是在吡硫醇的結(jié)構(gòu)中以酯鍵的2方法與結(jié)果形式引入了mPEG,紫外最大吸收波長(zhǎng)幾乎在同-位置。另外，2.1 對(duì)照品溶液的制備考慮到吡硫醇分子的紫外吸收來源于其分子中的共軛結(jié)構(gòu),吡精密稱取吡硫醇對(duì)照品(批號(hào):080519)14. 63mg (折算成硫醇聚乙二醇前藥結(jié)構(gòu)中的其他結(jié)構(gòu)如mPEG在測(cè)定范圍內(nèi)不含吡碗醇14. 39mg) ,置100mL容量瓶中,加0.1moVL NaOH溶會(huì)產(chǎn)生紫外吸收,所以 ,吡硫醇聚乙二醇前藥在該波長(zhǎng)下的吸收解,稀釋至刻度?？烧J(rèn)為僅僅是由其中的吡硫醇共軛結(jié)構(gòu)引起,吸收度大小與吡2.2供試品溶液的制備硫醇含量成正比。精密稱取吡硫醇聚乙二醇前藥適量,置50mL容量瓶中,加.2 溶劑的選擇0. 1mol/L NaOH稀釋至刻度,得吡硫醇聚乙二醇前藥樣品溶液。經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn)的篩選，選取0. 1mo/L的鹽酸、0.1mol/L的2.3 線性關(guān)系考察.NaOH.0. 1mol/L的pH7. 2的磷酸鹽緩沖液作為溶劑進(jìn)行試驗(yàn)，按照2.1項(xiàng)下方法,制備吡硫醇對(duì)照品溶液,分別精密取其中以0. 1moVL的鹽酸和0.1moL/L、pH7. 2的磷酸鹽緩沖液作0.5、1.0、2. 0、3.0.4.0mL至25mL.容量瓶中,用0. 1mol/L NaOH為溶劑，吡硫醇和吡硫醇聚乙二醇前藥在200nm - 400nm均有最稀釋至刻度,分別用紫外分光光度計(jì)在314nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收大吸收,且吡硫醇聚乙二醇前藥的最大吸收波長(zhǎng)相對(duì)于吡硫醇發(fā)度,以吸收度對(duì)吡硫醇濃度線性回歸,得回歸方程為:A=生了紅移。而以0. 1mol/L的NaOH作為溶劑,吡硫醇和吡硫醇0.0419C+0.0057,r-9.999。結(jié)果表明,吡硫醇測(cè)定濃度在聚乙二醇前藥在同- 波長(zhǎng)處有 最大吸收,并且該溶劑也不會(huì)影響2. 88 -23.02μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。吡硫醇的基本結(jié)構(gòu),所以選取0. 1mo/L NaOH作為溶劑。2.4精密度試驗(yàn)3.3波長(zhǎng)的選擇將2.3項(xiàng)下“線性關(guān)系的考察"中的中間濃度溶液連續(xù)測(cè)稱取吡硫醇和吡硫醇聚乙二醇前藥用0. 1mol/L的NaOH定5次,記錄吸收度(A) ,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0. 24% ,結(jié)果配成- -定濃度的溶液,于200nm - 400nm紫外掃描,吡硫醇和吡表明該儀器的精密度良好。硫醇聚乙二醇前藥均在313. 6nm波長(zhǎng)處有最大吸收,因此選取2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)檢測(cè)波長(zhǎng)為314nm。按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液(批號(hào):20080702) ,室溫保3.4 結(jié)論存,每隔2h測(cè)定1次吸收度, RSD為0.56%。結(jié)果表明:室溫采用紫外分光光度法測(cè)定吡硫醇聚乙二醇前藥中吡硫醇條件下,樣品溶液在8h內(nèi)保持穩(wěn)定。含量的方法簡(jiǎn)便可行。2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)參考文獻(xiàn):取同一批樣品(批號(hào):20080702)5份,按2.2項(xiàng)下方法制備[1]李新芳 ,古麗巴新.靜脈滴注鹽酸吡硫醇氯化鈉注射液引起的靜供試品溶液,測(cè)定吸收度,計(jì)算含量, RSD為0. 83% ,表明本方脈炎[].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志,2006 ,23(2):173.法重現(xiàn)性良好。[2] 孟繁娜,唐屋. PH值對(duì)鹽酸毗硫醇水榕液穩(wěn)定性的影響[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2007 ,27(3) :400 - 402.2.7加樣回收率試驗(yàn)2.7.1對(duì)照品溶液的制備:精 密稱取10. 18mg吡硫醇對(duì)照品,折3] 張健.鹽酸吡硫醇藥理作用與臨床應(yīng)用[].中國(guó)熱楷醫(yī)學(xué),2005 ,5(2) :394 -395.算成含毗硫醇10. 01mg,置100mL容量瓶中,用0.1mol/L NaOH4] 馬琪林。吡硫醇的藥理和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)溶解后稀釋至刻度,得0.1001mg/ mL的吡硫醇對(duì)照品溶液。分冊(cè)1992,19(5) :278 -280.2.7.2回收率試驗(yàn) :精巒稱取吡硫醇聚乙二醇前藥置50mL容5] 王俊,裴元英.用聚乙二醇修飾大分子藥物的研究進(jìn)展[J].中國(guó)量瓶中,分別加人對(duì)照品溶液i 5、5.0、7.5mL,加0.1molVL NaOH醫(yī)藥工業(yè)雜志2004 ,35(11) :696 -701.稀釋至刻度,按紫外分光光度法測(cè)定吸收度。計(jì)算吡硫醇的含6] 陳濤,王進(jìn),佛江濤,等.聚乙二醇前體藥銣[J].世界最新醫(yī)學(xué)信量,得出回收率。結(jié)果:平均回收率為99.49% ,RSD為1. 15%。息文摘,2003.2(5) :806 -810.2.8 祥品含量測(cè)定7] Doucea J,Coo ZH,MacLaren LA,ct aL Mifecaion of xenoantigens on按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液(批號(hào): 20080701、porcine eythoctea for xenotamnion[J]. Surgery ,2004 , 135<2):20080702、20080703),進(jìn)行測(cè)定,3批樣品含量結(jié)果分別為178 - 186.4. 89% .4. 52%、4. 50%。[8] 張劍鋒,魏東芝,周雄,等.甲氨蝶呤-豪乙二醇偶聯(lián)物的合戚及3討論中國(guó)煤化工' ,42(6).60 -610.3.1方法的選擇吡硫醇藥物中具有大量共軛結(jié)構(gòu)體系,在紫外區(qū)有強(qiáng)吸YHCNMHG-09-10編輯:郯曉屏)收,我們采用單甲氧基聚乙二醇( mPEG)修飾吡硫醇后得前藥,