安徽農(nóng)學(xué)通報, Anhui Agri.Sd.Bul2010,l6(20)聚乙二醇(PEG)處理對希蒙德木種子活力的影響周建勇高捍東2(1滁州市林業(yè)局安徽滁州2390002南京林業(yè)大學(xué))摘要:希蒙德木種子經(jīng)過PEG處理后內(nèi)部酶的活性發(fā)生變化,不同濃度的PEG處理24h后,可以降低種子的膜透性和兩二醛的含量,提高超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的活性;但隨著處理時間的延長,膜的透性增加,丙二醛含量上升,超氧化物歧化酶和過氧化氬酶的活性降低。PEG5%處理24h效果最好關(guān)鍵詞:聚乙二醇;希蒙德木種子;相對電導(dǎo)率;丙二醛;超氧化物岐酶;過氧化氬酶中圖分類號S793文獻(xiàn)標(biāo)識碼B文章編號1007-7731(2010)20-047-003Effect of PEG Pretreatment on Vigor of Simmondsia SeedZhou Jianyong Gao Handong1Chuzhou Forestry Bureau, Chuzhou339000, China: 2 Nanjing Forestry UniversityAbstrac: Simmondsia seeds were treated with PEG. The results showed that pretreatments of PEG with differentlevels after 24h can decrease relative electrical conductivity and MDA content, and increase SOD activity and CATactivity. But with the time longened, relative electrical conductivity and MDA content increase while SOD and CATactivity decrease. The treatment of PEG5% with 24h has the greatest effect.Key words: PEG; Simmondsis seed; Relative electrical conductivity; Malonaldehyde; Catalase; Superoxide dismutase希蒙德木 Simmondsia Chinensis(Link) Schneider)系 DUNCAN多重比較。希蒙德木科僅1屬1種,為多年生常綠灌木是一種耐干早2結(jié)果與分析的重要油料植物,原產(chǎn)地在美國西南部與墨西哥西北部接21PEG處理對種子活力的影響壤的索諾拉沙漠地區(qū)。PEG是一種優(yōu)良的高分子滲透劑種子發(fā)芽率是衡量種子生活力的重要指標(biāo),而種子發(fā)1973年 Heydecker首次利用PEG處理種子獲得了整齊的出芽指數(shù)和活力指數(shù)反映出該批種子萌發(fā)速率和活力狀況。苗效果。我們用PEG-6000處理希蒙德木種子,研究其對種PEG處理對種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)影響子生化指標(biāo)的影響,以期提高種子活力。如圖1。從圖中可以發(fā)現(xiàn),不同濃度、不同滲調(diào)時間處理對1試驗材料與方法種子的發(fā)芽率有明顯的差異,B2處理比對照提高了1734%1.1試驗材料其次是Cl、A1比對照相應(yīng)地增加了1667%、12%,而B3和C3試驗用種子為以色列進(jìn)兩個處理反而比對照的發(fā)芽率低。在發(fā)芽勢發(fā)芽指數(shù)、活12試驗方法力指數(shù)方面都比對照有明顯的提高。但隨著滲透調(diào)節(jié)時間121PEG滲透調(diào)節(jié)處理采用PEC-6000按下表處理,以清的延長,各項指標(biāo)都相應(yīng)地下降,這是因為PEG溶液是粘稠水浸泡12h的種子為對照(5%、15%、25%的PEC-6000的的液體隨著濃度、時間的增加溶液中氧氣的含量下降,抑滲透勢分別相當(dāng)于025Mp、-0.75Mpa、-125Mpa,每處制了種子的有氧呼吸在某種程度上抑制了種子代謝理重復(fù)3次,每次隨機(jī)取100粒種子。122生化指標(biāo)的測定發(fā)芽測定:將各處理種子洗凈后放置在鋪有濕潤脫脂棉的發(fā)芽盒內(nèi),置于25℃恒溫發(fā)芽箱中發(fā)芽,定期統(tǒng)計發(fā)芽數(shù),并對發(fā)芽率發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)進(jìn)行計算。質(zhì)膜透性的測定采用相對電導(dǎo)率法;過氧化氫酶(CAT活性的測定采用高錳酸鉀滴定法;丙二醛MDA含量的測定方法參照汪安琳的硫代巴比妥酸圖1不同PEG處理對種子發(fā)芽的影響(TBA琺;超氧化物歧化酶SOD性的測定方法參照汪種子活力是指在適宜和不適宜的環(huán)境條件下種子的發(fā)安琳、李柏林,采用NBT光照化學(xué)還原法。芽和出苗能力包括幼苗生長勢和整齊度。因此在衡量種子3數(shù)據(jù)分析與處理活力中國煤化工合起來用活力指數(shù)采用 Microsoft Excel、SAS統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析和反映CNMHG價時活力指數(shù)是作者簡介:周建勇1973-),男,工程師從事林學(xué)管理林木種苗研究收稿日期:2010-09-21安徽農(nóng)學(xué)通報, Anhui Agri.si.Bull200,16(20)一個比較靈敏的指標(biāo)。它綜合了種子發(fā)芽率發(fā)芽速度和膜脂過氧化指標(biāo),表示細(xì)胞膜過氧化程度和對逆境條件反幼苗生長勢等因素。方差分析表明表1)不同處理對活力應(yīng)的強(qiáng)弱。PEG處理對丙二醛含量的影響如圖3不同處理指數(shù)影響達(dá)到極顯著差異。多重比較表明表2),在005水的丙二醛的含量都比對照低。同一濃度,隨著滲透時間的平下,A1與B2、A2、C1、A3、C2、B3、C3、ck之間差異顯著、B1延長丙二醛的含量也逐步上升。PEG15%處理24h丙二醛與A3、C2、B3C3、ck之間差異顯著、B2與ck之間差異顯著,的含量最低,PEG25%處理72h丙二醛含量是PEG15%處理其它處理間不顯著;在001水平下,A1與A3C2、B3、C3、ck72h的1.99倍,是PEG5%處理72h的239倍。PEG處理的丙之間差異極顯著、B1與A3、C2、B3、C3、ck之間差異極顯著。二醛含量變化與電導(dǎo)率的變化是一致的。方差分析表3)綜合活力指數(shù)發(fā)芽指數(shù)發(fā)芽勢和發(fā)芽率,B1處理效果最表明各處理間差異極顯著好。其次是A1、C1,C3處理效果最差不同處理對種子活力指數(shù)影響的方差分析變異來源自由度平方和1444.1644160.4627507·00012632611331.63062076.7757注:··表示在001水平下差異極顯著圖3不同處理對MDA含量的影響表2不同處理對種子活力指數(shù)影響多重比較不同處理對MA含量影響的方差分析處理A1A2A3B1B2B3cIC2變異來源自由度平方和平均值334320.1716.127.3620.7613.8120.1149911439.5401521911.280222.87000010.4933bed ed ab be ed hedBC CC總變異a=0.0l注:…表示在001水平下差異極顯著注:相同字母表示處理間差異不顯著2.2PEG處理對種子膜透性的影響細(xì)胞膜透性或細(xì)胞膜的完整性是評價種子活力高低的重要指標(biāo)之一阿種子在貯藏過程中或吸脹階段細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整性會遭到破壞,膜透性增加,引起外滲液電導(dǎo)率和濃度的增加,種子活力降低。根據(jù)膜修復(fù)理論種子萌發(fā)前首先必須吸水使細(xì)胞膜得到修復(fù)種子質(zhì)量好、活力高、膜修復(fù)快細(xì)胞液外滲量少而外滲細(xì)胞液的數(shù)量可以通過電導(dǎo)率大小來測定不同處理對S0D相對活性的影響23.2S0D活性的變化超氧物歧化酶SOD是一種清除自由基的酶,它催化02的反應(yīng)式為:202+2H’→H2O2+O2反應(yīng)產(chǎn)生的HO2可被過氧化氫酶CAT進(jìn)一步分解。不同滲調(diào)處理SOD活性變化如圖4不同濃度PEG滲透處理后SOD相對活性均有不同程度的提高。3種濃度的PEG處理圖2不同處理對相對電導(dǎo)率的影響24h酶活性之間差異不顯著,PEC5%、PEG15%、PEG25%處電導(dǎo)率的結(jié)果從膜透性的恢復(fù)方面反映了PEG處理對理24hSOD相對活性分別是對照的176、1.67、179倍。滲透種子活力的影響。由圖2可知,不同濃度的PEC在滲透24h時間對SOD活性影響很大,同一濃度隨著處理時間的增加后,相對電導(dǎo)率都呈下降的趨勢,PEGl5%處理的電導(dǎo)率比SOD活性逐步下降,PEC5%處理下降的速度比其它兩種濃對照下降了769%,PEG5%的處理只比對照低048%,可能度處理的更快。是因為濃度較低,種子吸水相對較快,從而造成種子的修復(fù)程度較低;滲透48h后,PEG25%的處理電導(dǎo)率比對照高表4不同處理對S0相對活性影響的方差分析變異來源自由度平方和了3.92%,72h時,比對照高687%。種子吸水,其內(nèi)部代謝加強(qiáng),由于濃度過高滲透時間過長溶液中氧氣缺乏,使種16197597179.9733187,72·*00001917450.9587子由有氧呼吸轉(zhuǎn)為無氧呼吸使得細(xì)胞膜不但沒有得到修復(fù),反而遭到破壞,在電導(dǎo)率上得到反映中國煤化工23PEG處理對酶活性的影響CNMH顯著。SOD活性的23.1丙二醛活性的變化植物器官衰老或在逆境條件下,增大會發(fā)生膜脂過氧化作用,其產(chǎn)物是丙二醛,通常用它作為2.33CAT活性的變化(下轉(zhuǎn)54頁)安徽農(nóng)學(xué)通報ui Agri Sci. Bull. 2010, 16(20)嚴(yán)格禁食、禁水,以減輕對消化道的刺激。由于本病脫水迅[文正張君慧張晶等103例犬細(xì)小病毒病臨床特征和診療速,故應(yīng)根據(jù)脫水程度以及癥狀合理輸液、補(bǔ)糖和電解質(zhì)門甘肅備牧獸醫(yī),2009,46-7嘔吐嚴(yán)重的應(yīng)注意補(bǔ)鉀,腹瀉嚴(yán)重的應(yīng)注意補(bǔ)碳酸氫鈉,[2張仁舟楊松濤馮吳等中國國內(nèi)首次檢測到犬細(xì)小病毒cPV同時也應(yīng)注意補(bǔ)鈣以增強(qiáng)心肌收縮力2中國病原生物學(xué)雜志,2010,5(4):246-249(6)在臨床診療中,用云南白藥思密達(dá)、抗生素、高錳3余燕,馬金友陳金山犬細(xì)小病毒病的組織病理學(xué)觀察印山酸鉀溶液等進(jìn)行灌腸也是犬細(xì)小病毒病比較多用的一種西農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(4):75-76輔助治療方法。灌腸可使犬排出腸內(nèi)容物,防治腸內(nèi)毒素4許建民犬瘟熱與犬細(xì)小病毒病例消化道與呼吸道細(xì)菌的分離、的產(chǎn)生和蓄積另外還可以使藥物與腸黏膜直接接觸發(fā)揮培養(yǎng)鑒定與藥敏試驗門]中國動物槍疫,2003,20(7):23-26藥效。但灌腸本身對受損的腸黏膜產(chǎn)生刺激,所以灌腸療(5舊振貴高玉君蘇平等犬細(xì)小病毒病的綜合診療[裔牧與法適用于犬細(xì)小病毒病的中后期,且只能使用1-2次,不獸醫(yī),2006,38(5):4041.可多用6]靳月生姚學(xué)軍楊曉青等用灌腸療法輔助治療犬細(xì)小病毒病參考文獻(xiàn)效果好當(dāng)代畜牧,2007,1:54-5(張宏民編校)上接48頁)CAT普遍存在于植物的組織與細(xì)胞中,是最早由基的協(xié)調(diào)作用,SOD、CAT與MDA極其負(fù)相關(guān)說明SOD發(fā)現(xiàn)的與種子活力有關(guān)的氧化酶類之一,CAT屬于血紅與CAT能在一定程度上減緩自由基對細(xì)胞膜的傷害。電蛋白酶含有鐵金屬催化H2O2的反應(yīng)如下R(Fe2)2+導(dǎo)率MDA與Ⅴ之間呈負(fù)相關(guān)SOD、CAT與v!呈正相關(guān)。H2O2→R(FeOH)2;R(FeOH)2+202→R(Fe2PEC處理能夠提高SOD、CAT的活性減少MDA含量,減輕+2H2O+O2其活性可間接反映種子活力的大小由圖5發(fā)對膜的傷害,質(zhì)膜相對透性減小,種子活力得到提高。現(xiàn),不同處理CAT活性的變化趨勢與SOD變化大致相同,同3結(jié)論濃度PEC處理24h后CAT酶活性上升到最大值,隨著滲調(diào)PEG滲透調(diào)節(jié)后,活力指數(shù)均有不同程度的提高,時間的持續(xù),酶活性逐漸下降。PEC5%處理的CAT增加量PEG5%處理24h后活力指數(shù)提高最高,比對照增加了比其它兩種濃度都大。CAT活性的提高使清除過氧化氫2839。隨著PEG濃度增加和滲調(diào)時間的延長,發(fā)芽率發(fā)芽的能力大大增強(qiáng)。勢、發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)均呈不同程度的下降,其中3種濃度處理72h后種子發(fā)芽率都比對照下降。3種濃度PEG處理24h后相對電導(dǎo)率均比對照下降,其中PEG15%處理相對電導(dǎo)率最低。PEG25%處理48h72h的相對電導(dǎo)率比對照分別高3.98%、6.87%。PEG滲調(diào)后S0D、CAT兩種酶活性均比對照顯著提高,MDA相應(yīng)下降。SOD與CAT間相關(guān)系數(shù)為0.8959,SOD、CAT與MDA極其負(fù)田5不同處理對QAT活性的影響相關(guān),電導(dǎo)率MDA與ⅤI之間呈負(fù)相關(guān),SOD、CAT與V呈正相關(guān)。PEG處理能明顯提高SOD和CAT保護(hù)酶系統(tǒng)活性不同處理對CAT活性影響的方差分析從而有利于清除過多的自由基,MDA產(chǎn)生量明顯較對照變異來源自由度平方和低,質(zhì)膜相對透性降低。PEG處理后能夠促進(jìn)種子膜的修106090.11940320001復(fù),有效地提高種子SOD、CAT酶的活性減輕膜脂的過氧0.0029總變異90911193化作用,提高種子活力。綜合生理生化各指標(biāo),PEG5%處理注:表示在001水平下差異極顯著24h效果最好參考文獻(xiàn)方差分析表5)顯示各處理間差異達(dá)到極顯著程度,[湯福泉等希蒙得木扦插試驗門中國野生植物,199(4):3941PEG5%、24h與PEG25%、24h兩處理對CAT活性影響最大。[2]李合生等植物生理生化實驗原理和技術(shù)M]北京高等教育出版社,2001PEG處理后各生理生化指標(biāo)間的相關(guān)分析3汪安琳等油菜素內(nèi)酯對濕地松幼苗抗逆性的影響南京林業(yè)電導(dǎo)率CAT大學(xué)學(xué)報,1993,17(3):27-31.電9要10000-0.5593056364李柏林等燕麥葉片衰老與活性氧代謝的關(guān)系門植物生理學(xué)報0.5636-07330-088561.00005]呂中國煤化工化與脫酯化中國科CNMHG234生理生化指標(biāo)之間的相關(guān)關(guān)系分析表6表明,SOD徐除本美等種}活力研究種于,1989:5):53-5與CAT間相關(guān)系數(shù)為08959,表明兩者對清除種子體內(nèi)自(廖雯娟編、校