中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmal of Pharmaceuticals 2015, 46(3)●227●硼替佐米的合成鄭德強(qiáng)，張利劍，張治云(山東省藥學(xué)科學(xué)院，山東濟(jì)南250101)摘要: L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽與吡嗪-2-甲酸經(jīng)酰胺化、酯解得到(S)-3-苯基-2-(吡嗪-2-甲酰胺基)丙酸，再與(R)-(1-氨基-3-甲基)丁基硼酸-(s,2S,3R,SS)-蒎烷二醇酯三氟乙酸鹽(6)縮合、脫保護(hù)得到硼替佐米，總收率約27% (以6計(jì))。關(guān)鍵詞:硼替佐米;多發(fā)性骨髓瘤;合成中圖分類號(hào): R979.1"2文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào): 1001-8255 (2015)03-0227-03Synthesis of BortezomibZHENG Deqiang, ZHANG Lijian, ZHANG Zhiyun(Shandong Academy of Pharmaceutical Science, Jinan 250101)ABSTRACT: Bortezomib was synthesized from methyl L-phenylalaninate hydrochloride via acylation withpyrazine-2-carboxylic acid, and hydrolysis to give (S) -3-pheny!l-2- (pyrazine- 2-carboxamido) propanoic acid, which wassubjected to condensation with (1S,2S,3R,5S) -pinanedioxy (R)-(1-amino-3-methy) butylboronate 2,2.2-trifluoroacetate(6), and derotection with an overall yield of about 27% (based on 6).Key Words: bortezomib, multiplemyeloma; synthesis硼替佐米(bortezomib, 1)， 化學(xué)名為[(1R)-3-選擇性蛋白酶體抑制劑,通過抑制特異蛋白質(zhì)降解，甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪甲?；?-阻斷細(xì)胞的 多級(jí)信號(hào)串聯(lián)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡(5。氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，商品名為萬珂文獻(xiàn)綜述了1的合成路線「4，主要有2種:(Velcade)，2003 年5月由美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，已①手性的氨基硼酸酯和N端保護(hù)的L-苯丙氨酸縮在包括中國(guó)在內(nèi)的83個(gè)國(guó)家上市，臨床用于治療合[5],然后經(jīng)脫保護(hù)，與吡嗪-2-甲酸(3)縮合，多發(fā)性骨髓瘤和復(fù)發(fā)難治性套細(xì)胞淋巴瘤。1是高再經(jīng)硼酸酯水解得15.6。該路線為線性合成，其中手性的氨基硼酸酯在合成早期引入，總收率較低，收稿日期: 2014-07-01成本較高。②3先和C端保護(hù)的L-苯丙氨酸縮合，作者簡(jiǎn)介:鄭德強(qiáng)(1978-)， 男，高級(jí)工程師，從事藥物合成研究。C端通過水解脫保護(hù)后[n],進(jìn)一步與手性的氨基硼Tel: 0531-81213099E-mail: zdq2000zdq@sina. com酸酯縮合[s]，再在異丁基硼酸和鹽酸作用下水解得[6] laxminarayan SP, Narayanrao KR, Ramachanadra RD,manufacture of letrozole: wo, 2007144896 [P]. 2007-12-21.et al. Synthesis of 4-[1- (4-cyanophenyI)-(1,2,4-triazol-[9] Yadav AG, Bobade AS, Athlekar SV, et al. Synthesis of1-yl) methyl] benzonitrile and 4-[1-(1H1,2.4-triazol-1-2,4-disubstituted thiazoles with 1,2,4-triazole ring system asyI) methylbenontrile intrmediate: wO, 2007107733 [P].antimicrobial agents [J]. Indian J Heterocy Ch, 2009, 19(1):2007-09-27.21-24.[7]周金培, 朱鳳軍，黃文龍.抗癌藥來曲唑的合成研究[].[10] Kil K, Biegon A, Ding Y, et al. Synthesis and PET studies中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2003, 34(4): 375-376.of[IC| 中國(guó)煤化工aomase ihito[8] Kishan KA, Srinivas R, Rao AKSB, et al. A method ofdrug [0]MYHCNMH G5-223.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmal of Pharmaceuticals 2015, 46(3)到15-7。該路線采用匯聚式，在后期引入手性的氨當(dāng)量，反應(yīng)時(shí)間由文獻(xiàn)的16h降至5 h5:7],更適合基硼酸酯，總收率較高，成本較低。工業(yè)化生產(chǎn)。精制1時(shí)，文獻(xiàn)用乙酸乙酯精制2次本研究對(duì)方法②進(jìn)行了工藝優(yōu)化:價(jià)廉的L-以上[5.0,本研究改用甲醇和水精制1次,操作簡(jiǎn)便,苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(2)與3在0-苯并三氮唑-純度99.7%，更適合工業(yè)化。改進(jìn)后的工藝成本下N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)作用下酰胺降，反應(yīng)條件溫和,操作簡(jiǎn)便,收率27% (以6計(jì))?；蒒-(2-吡嗪基羰基)-L-苯丙氨酸甲酯(4)，41的合成路線見圖1。.經(jīng)堿性酯解后再酸化生成(S)-3- 苯基-2-(吡嗪-2-實(shí)驗(yàn)部分甲酰胺基)丙酸(5)，5和(R)-(1-氨基-3-甲基)-N-(2-吡嗪基羰基)-L-苯丙氨酸甲酯(4)丁基硼酸-(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇酯三氟乙酸鹽將2(64 g，0.30 mol)、3(34 g，0.274 mol)和(6)在N,N-二異丙基乙胺(DIEA)、TBTU作用下TBTU(105 g, 0.33 mol)加入二氯甲烷(800ml)中,縮合生成(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇-N-(吡嗪-2-羰冷至-10 C以下，滴加DIEA(179 ml,1.1 mol),加畢，基)-L-苯丙氨酸-L亮氨酸硼酸鹽(7), 7和異丁室溫?cái)嚢?h，依次用水(500 ml)、1 mol/L鹽酸基硼酸在酸性條件下脫保護(hù)基后經(jīng)重結(jié)晶制得1。(500 ml)、水(500 ml)和飽和碳酸鉀溶液(500 m1)制備4時(shí)，采用乙酸乙酯和正庚烷進(jìn)行重結(jié)晶，洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，加純度提高至98%以上(文獻(xiàn)90% [");制備5時(shí)，入乙酸乙酯(150 ml)和正庚烷(400 m1)，0“C以.采用鹽酸調(diào)節(jié)pH值，直接在低溫析晶，簡(jiǎn)化操作，下攪拌2h，抽濾，得白色固體4(65g, 85% ),收率86%，純度99.9% (文獻(xiàn)[5]: 收率63.2%,mp65~68 C，純度99.1% [HPLC歸一化法:純度95.7%);制備7時(shí)，反應(yīng)溫度由0 C降至色譜柱Waters SunFireM C.柱(4.6 mmx250 mm,-10 C，產(chǎn)品收率98.7%，純度89.2% (文獻(xiàn)([):5μm);流動(dòng)相乙腈:水(10 : 90→90 : 10);收率87.1%，純度84% );采用新型縮合劑TBTU檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm;流速1.0 m/min;進(jìn)樣量10 μ1]代替EDC、HOBT等,避免氨基上的手性碳消旋化，(文獻(xiàn)":純度90.0%，收率76% )。立體選擇性強(qiáng)，所得1的手性純度大于99.5%。制(S)-3-苯基-2-(吡嗪-2-甲酰胺基)丙酸(5)備1時(shí)，異丁基硼酸的投料量由1.5當(dāng)量增至1.7將4(65 g, 0.23 mol)加入丙酮(350 ml)中,iCHs +TBTU, DIEANaOH)HNH2●HCICH32o5H3CH3CH3,CHHO,CH2NHCB-0HcCF;COOH .OHB-o HICICH, .7 CH3圖11的合成路線Fig.1 Synthetic Route of 1中國(guó)煤化工MHCNMHG中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志Chinese Jourmnal of Pharmaceuticals 2015, 46(3)攪拌溶解后，加入1 mol/L氫氧化鈉溶液(350 ml),383[M-H]; IR(KBr)v(cm"): 3 384, 3 199, 3 064,室溫?cái)嚢?h后，用1 mol/L鹽酸(約300 m1)調(diào)2 954, 2869, 1 681,1 513,1 455, 1 406, 1 385, 1 021,至pH2,降溫至0T以下，攪拌3h,抽濾，得白774, 702; 'H NMR (300 MHz, DMSO-d)8: 9.09 (d,色固體5(53.6g，86%)，mp 167~ 170 C,純度J=1.5 Hz, 1H), 8.87~ 8.93 (m, 2H), 8.85(d, J=99.9% [HPLC歸-化法:色譜柱Waters Symmetry2.4 Hz, 1H), 8.72(d,J=3.9 Hz, 1H), 7.11 ~ 7.25 (m,Cig柱(4.6 mmx250 mm，5 μm);流動(dòng)相乙腈:5H), 4.87 ~ 4.95 (m, 1H), 3.07 ~ 3.20 (m, 2H), 2.61~水(30 : 70→80 : 20); 檢測(cè)波長(zhǎng)270 nm;流速2.64(m, 1H), 1.47~ 1.58(m, 1H), 1.14~ 1.35 (m,1.0 m/min;進(jìn)樣量10μ](文獻(xiàn)”:純度95.7%,2H), 0.77(d, J=1.5 Hz, 3H), 0.75(d, J=1.5 Hz, 3H)。收率63.2% )。'C NMR (300 MHz, DMSO-dg) 8: 172.6, 162.4,(1S,2S,3R,S)-蒎烷二醇-N-(吡嗪-2-羰基)-L-147.6, 143.9, 143.4, 143.2, 136.8, 129.2, 127.9, 126.3,苯丙氨酸-L亮氨酸硼酸鹽(7)51.6, 42.8, 39.90, 37.2, 24.9, 22.8, 22.3。元素分析將5(40g, 0.147 mol)、TBTU(48g, 0.176 mol)(C1,H23BN,O,)測(cè)定值(理論值，%): C 62.60和6(56.9 g，0.15 mol)加入二氯甲烷(120 ml)中,(62.31), N 15.09(15.30), H 6. 16(6.33), B 2.80-10 C以下滴加DIEA(44 ml, 0.266 mol)， 滴畢，(2.95)。室溫?cái)嚢?h。依次用水(500ml)、2%碳酸鉀溶液(500 ml)、1% 磷酸(500 ml)和飽和氯化鈉溶液參考文獻(xiàn):(500 ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得[1]姚淑娟,章萍,齊軍元.硼替佐米聯(lián)合沙利度胺治療復(fù)發(fā)、淡黃色油狀物7(75.2 g, 98.7% ) ,純度89.2% (HPLC難治性多發(fā)性骨髓瘤的療效與安全性觀察[J].藥物不良?xì)w一化法:進(jìn)樣量為20μl，其他同化合物5)(文反應(yīng)雜志, 2011, 13(5): 283-286.獻(xiàn)[7:純度84%，收率87.1%)。2] 譚振清,羅自勉,周新伏，等.硼替佐米聯(lián)合化療與常規(guī)化療方案治療多發(fā)性骨髓瘤的臨床比較[J].臨床醫(yī)學(xué),硼替佐米(1)2012, 32(3): 14.圓底燒瓶中依次加入7(75g，0.145 mol)、甲醇[3] US FDA. Velcade (bortezomib) injection label[ EB/(550 ml)、正庚烷(550 ml)、1 mol/L鹽酸(450 ml)OL]. [2012-01-24]. http://www. accessdata.fda.gov/和異丁基硼酸(25g，0.25 mol)，室溫?cái)嚢?h，棄drugsatfda_ docs/label/2012/021602s0271b.pdf去正庚烷層，用二氯甲烷(500 m1x4)萃取，合并[4] 李忠,毛化,鐘靜芬.硼替佐米合成路線圖解[].中國(guó)有機(jī)相，依次用純化水(500 mlx2)和飽和氯化鈉醫(yī)藥工業(yè)雜志, 2012, 43(5): 393-395.容液(500 ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，[5] Pickersgill IF, Bishop J, Koellner C, et al. Synthesis of加入正庚烷(500 ml)，劇烈攪拌，抽濾，濾餅用甲boronic ester and acid compounds: WO, 2005097809 [P].2005-10-20.醇:水(1 : 1,150 ml)重結(jié)晶,得白色固體1(15 g,27.3% ),測(cè)熔點(diǎn)試驗(yàn)未見明顯熔程，[a]20 -52.0(c[6] Li YX, Plesescu M, Sheehan P, 'et al. Synthesis of fourisotopically labeled forms of a proteasome inhibitor,1.0，甲醇)[文獻(xiàn): [a]2° -43.82(c 1.0，甲醇)叨]，bortezomib [J]. J Labelled Compd Radiopharm, 2007,純度99.7% (HPLC條件同化合物7)，手性純度50(5-6): 402-406.99.92% [HPLC歸- -化法:色譜柱Daicel AD-H[7] Venkata PR, Madinaguda MN, Hyderabad M, et al. 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